DTT Dithiothreitol (5G) CAS 3483-12-3

DTT, oder Dithiothreitol, ist ein Reduktionsmittel, das häufig in Laboratorien für Biochemie und Molekularbiologie verwendet wird. Es ist ein kleines Molekül, das zwei Thiole enthält (Sulfhydryl) Gruppen und wird verwendet, um Disulfidbindungen in Proteinen aufzubrechen und in verschiedenen biochemischen Tests eine reduzierende Umgebung aufrechtzuerhalten. Die CAS-Nummer für DTT lautet 3483-12-3.

Verwendung von DTT:

1. Denaturierung und Entfaltung von Proteinen:
   • DTT wird häufig zur Reduzierung von Disulfidbindungen in Proteinen eingesetzt, Dies führt zur Denaturierung und Entfaltung der Proteinstruktur. Dies ist besonders nützlich, wenn die Proteinfaltung untersucht oder Proteine ​​für die Analyse vorbereitet werden.
2. Enzymaktivierung:
   • Einige Enzyme benötigen eine reduzierende Umgebung, um aktiv zu sein. DTT wird verwendet, um einen reduzierenden Zustand aufrechtzuerhalten, Gewährleistung der ordnungsgemäßen Funktion dieser Enzyme.
3. Reduzierung von Proteinaggregaten:
   • DTT kann zur Reduzierung von Proteinaggregaten oder fehlgefalteten Proteinen eingesetzt werden, erleichtert ihre Solubilisierung und Trennung bei Experimenten wie der Gelelektrophorese.
4. Verhinderung der Oxidation in der Zellkultur:
   • In der Zellkultur, Manchmal wird dem Medium DTT zugesetzt, um die Oxidation von Cysteinresten in Proteinen zu verhindern und die für bestimmte zelluläre Prozesse notwendigen reduzierenden Bedingungen aufrechtzuerhalten.

So verwenden Sie DTT:

1. Vorbereitung der DTT-Lösung:
   • Lösen Sie DTT in einem geeigneten Puffer oder Lösungsmittel auf, um eine DTT-Lösung mit der gewünschten Konzentration zu erhalten. Häufig verwendete Konzentrationen reichen von 1 mM bis 100 mm, abhängig von der konkreten Anwendung.
2. Zusatz zu Proteinproben:
   • DTT wird typischerweise direkt zu Proteinproben oder Reaktionsmischungen hinzugefügt, um die gewünschten reduzierenden Bedingungen zu erreichen. Die DTT-Konzentration sollte basierend auf den spezifischen experimentellen Anforderungen optimiert werden.
3. Inkubation:
   • Lassen Sie die Reaktionsmischung ausreichend lange inkubieren, damit DTT Disulfidbindungen reduzieren kann. Die Inkubationszeit kann je nach Versuchsaufbau und den spezifischen Zielen der Studie variieren.
4. Abschrecken:
   • Nachdem die Reduktionsreaktion abgeschlossen ist, Es ist wichtig, das überschüssige DTT zu löschen, um Störungen bei nachgelagerten Anwendungen zu verhindern. Dies kann durch Zugabe eines Löschreagenzes oder durch andere geeignete Methoden erreicht werden.
5. Analyse:
   • Fahren Sie mit der Analyse Ihrer Proben fort, ob es sich um eine Gelelektrophorese handelt, Enzymtests, oder andere biochemische Techniken.