This product provides an easy-to-use workflow for selective isolation of bacterial DNA from samples that are intrinsically rich in host DNA, such as body fluids or swabs. The method is specific for the identification of intact bacteria so it prevents false results due to nucleic acids from dead bacteria. The Kit allows isolation of enriched bacterial DNA suitable for a variety of applications, including qPCR and whole metagenome or 16S rRNA gene sequencing.
Einzelheiten
Spezifikationen
| Merkmale | Spezifikationen |
| Hauptfunktionen | Isolation gDNA from biological sample and remove host DNA |
| Anwendungen | PCR, southern blot and enzyme digestion, usw. |
| Reinigungsmethode | Mini Spin-Säule |
| Reinigungstechnologie | Silica-Technologie |
| Prozessmethode | Handbuch (Zentrifugation oder Vakuum) |
| Beispielstyp | Culture medium, swab, parasitic blood, tissue, sputum, usw. |
| Probenmenge | Blood sample, homogenate, Plasma, brain effusion, swab immersion solution, centrifuged concentrated liquid, usw.:0.5-1ml |
| Elutionsvolumen | ≥50μl |
| Zeit pro Lauf | ≤60 minutes |
| Flüssigkeitstransportvolumen pro Säule | 800μl |
| Bindungsausbeute der Säule | 100μg |
Prinzip
Dieses Produkt basiert auf der Silica-Säulenreinigung. This product efficiently depletes human and animal host DNA and yields enriched bacterial DNA. An optimized combination of mechanical and chemical lysis allows efficient disruption of bacterial cells. Target DNA is adsorbed on the membrane, während Protein nicht adsorbiert wird und durch Filtration entfernt wird. Nach dem Waschen von Proteinen und anderen Verunreinigungen, nucleic acid was finally eluted with low-salt buffer (10mm Tris, pH9,0, 0.5mm EDTA).
Vorteile
- High concentration – the host DNA is digested by dnase, without contamination of host DNA
- High recovery – DNA can be recovered at the level of PG
- Good repeatability – silica technology can obtain ideal results every time
- Breite Anwendbarkeit – it can be used in blood, tissue, intestinal contents and other samples
Inhalt des Kits
| Inhalt | D314802 | D314803 |
| Reinigungszeiten | 50 Vorbereitungen | 250 Vorbereitungen |
| Hipure DNA Mini Columns I | 50 | 2 X 125 |
| 2ml-Sammelröhrchen | 50 | 2 X 125 |
| 2ml beads Tubes | 50 | 250 |
| Buffer DRB | 15 ml | 60 ml |
| Buffer ES | 6 ml | 30 ml |
| Reagent DX | 0.5 ml | 1 ml |
| Buffer DL | 30 ml | 120 ml |
| Buffer GW1 | 22 ml | 110 ml |
| Puffer GW2 | 12 ml | 50 ml |
| DNase I (Powder) | 6 mg | 30 mg |
| Proteinase K | 24 mg | 120 mg |
| Protease-Auflösungspuffer | 5 ml | 15 ml |
| Puffer AE | 15 ml | 60 ml |
Lagerung und Stabilität
DNase I and Proteinase K should be stored at 2–8°C upon arrival. Jedoch, kurzfristige Lagerung (bis zu 12 Wochen) bei Raumtemperatur (15–25°C) hat keinen Einfluss auf ihre Leistung. Die restlichen Kit-Komponenten können trocken bei Raumtemperatur gelagert werden (15–25°C) und sind mindestens stabil 18 Monate unter diesen Bedingungen. The entire kit can be stored at 2–8°C, In diesem Fall sollten die Puffer jedoch vor der Verwendung erneut aufgelöst werden. Stellen Sie sicher, dass alle Puffer bei der Verwendung Raumtemperatur haben.
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