Oral Swab Genomic DNA Extraction Kit

1. Bestandteile des Reagenzienkits

2. Lagerung

Dieses Reagenzienkit sollte bei Raumtemperatur gelagert werden (15-25℃) und bei trockenen Bedingungen, mit einer Haltbarkeit von 12 Monate. Die DNA-Extraktions-Reinigungssäulen können aufbewahrt werden 1 Jahr in einer kühlen und trockenen Umgebung. Proteinase K und RNase A enthalten Konservierungsstoffe, ermöglicht den Transport bei Raumtemperatur, aber zur Langzeitlagerung, Sie sollten bei -20℃ aufbewahrt werden.

3. Anweisungen zur Verwendung des Reagenzienkits

3.1 Dieses Reagenzienkit ist für die molekularbiologische Forschung bestimmt und sollte nicht zur Diagnose oder Behandlung von Krankheiten verwendet werden.

3.2 Einige Komponenten im Reagenzienkit enthalten Reizstoffe. Schutzmaßnahmen wie das Tragen von Schutzkleidung und Schutzbrille werden empfohlen.

3.3 Während der Verwendung dieses Reagenzienkits, eine Hochgeschwindigkeitszentrifuge, Wasserbad (Metallbad), Vortexmixer, Wasserfreies Ethanol, steriles entionisiertes Wasser, und EP-Röhren müssen vom Benutzer vorbereitet werden.

4. Einführung in das Reagenzienkit

The Oral Swab DNA-Reinigung Kit provides a rapid and efficient method for purifying DNA from oral swabs, widely used for the extraction of epithelial cells such as oral epithelium.

The Oral Swab DNA Rapid Purification Kit can extract total DNA from oral epithelial cells within 30 Protokoll. The entire purification process does not require toxic reagents such as phenol-chloroform. Die extrahierte DNA kann direkt verwendet werden PCR, Southern Blot, und andere Anwendungen.

5. Experimentelle Prinzipien und Verfahren

6. Extraktionsprozess

Vor Beginn des Experiments:

A. Reagent Buffer B and C kann bei niedrigen Temperaturen ausfallen. We recommend heating at 65℃for 5 Protokoll. Nachdem sich der Niederschlag aufgelöst hat, es kann normal verwendet werden.

B. Vor Gebrauch, add the specified amount of anhydrous ethanol to Waschpuffer 1as indicated on the bottle label. Markieren Sie auf dem Etikett ein Häkchen, um die Zugabe von wasserfreiem Ethanol anzuzeigen.

C. Elutionspuffer ist ein0.1x TE-Lösungcontaining minimal amounts of EDTA. If EDTA might affect subsequent experiments, it is advisable to substitute Elution Buffer with sterile deionized water.

1. Probenhandhabung:
2. Sampling: Take a sterilized cotton swab, insert it into the mouth, rub against the inner cheek back and forth for more than 20 mal.
3. Use scissors to cut the head of the cotton swab, place it into a 2 ml centrifuge tube, and add 400μl von Reagens Buffer B.
4. Hinzufügen10μl Proteinase K (10 mg/ml) and 10μl RNase A (10 mg/ml), invert thoroughly, incubate at 65°C for 20 Protokoll, vortex for 10 seconds during incubation.
5. Hinzufügen 400μl von Reagens Buffer Cto the lysate, vortex thoroughly.
6. Hinzufügen 200μl of pre-chilled absolute ethanol, gut mischen; precipitation may occur, Dies hat jedoch keinen Einfluss auf nachfolgende Experimente.
7. Transfer the obtained liquid into a DNA extraction and purification column (Bausatz) (approximately 650~700μl each time), Zentrifuge bei >8,000 U/min für 1 Minute, Entsorgen Sie die gesammelte Abfallflüssigkeit, and reinsert the collection tube into the DNA extraction and purification column (Bausatz) for the next step.
8. Place the DNA extraction and purification column (Bausatz) into a collection tube, hinzufügen 300μl Waschpuffer 1, Zentrifuge bei >8,000 U/min für 1 Minute, Entsorgen Sie die Abfallflüssigkeit, and reinsert the DNA extraction and purification column (Bausatz) in die Röhre für den nächsten Schritt.

(Notiz: Ensure that absolute ethanol has been added to Wash Buffer 1.)

7. Hinzufügen 500μl Waschpuffer 1to the DNA extraction and purification column (Bausatz), Zentrifuge bei 14,000 U/min (20,000×g) für 2 Protokoll, extend the centrifugation time appropriately to dry the membrane further.
8. Place the DNA extraction and purification column (Bausatz) in ein neues Zentrifugenröhrchen füllen, Öffne den Deckel, incubate at 65°C for 2 Protokoll; this step can be extended appropriately to evaporate ethanol as much as possible, preventing residual ethanol from affecting downstream experiments.
9. Elute 100μl Elutionspufferauf die Membran, Zentrifuge bei 12,000 U/min für 2 Protokoll.

(Notiz: 1. Eluting DNA with 50μl of Elution Buffer can increase DNA concentration but decrease total DNA yield; 2. Eluted DNA in the eluate can be reapplied to the DNA extraction and purification column, centrifuge again at 12,000 U/min für 2 minutes to increase DNA yield.)