Produktübersicht:
Dithiothreitol (DTT) ist ein Reagenz, das zur Reduzierung von Protein-S-S-Bindungen verwendet wird. In der biochemischen Forschung, es ist ein Thiol-schützendes Mittel, eine spezifische Enzym Inhibitor, und zur Messung der Enzymaktivität verwendet. Es wird auch bei der Zubereitung von verwendet SDS-SEITE Probenpuffer.
Vorbereitung:
Lösen Sie 3,09 g DTT in 20 ml 0,01 mol/L Natriumacetatlösung (pH5,2), filtern und sterilisieren, Anschließend in 1-ml-Fläschchen aliquotieren und bei -20 °C lagern.
CAS-Nummer:
Aussehen:
Weiße Nadel oder weißes Granulat
Reinheit:
≥99 %
Lagerungsbedingungen für Dithiothreitol:
2-8℃
Haltbarkeit:
Vier Jahre
Was ist Dithiothreitol? (DTT)?
Dithiothreitol (DTT) ist ein kleines organisches Molekül, das Wirkstoffe mit der chemischen Formel C4H10O2S2 reduzieren kann.
Im reduzierten Zustand ist es ein lineares Molekül und wird nach der Oxidation zu einer sechsgliedrigen Ringstruktur, die eine Disulfidbindung enthält.
Der Name Dithiothreitol leitet sich von Erythritol ab (ein Zucker mit vier Kohlenstoffatomen). Das Isomer von DTT ist Dithioerythrit (DTE), welches ein C3-Epimer von DTT ist.
Was sollte du weißt über Dithiothreitol Lagerung?
Die allgemeinen Lagerbedingungen für DTT-Pulver sollten bei -20 °C gelagert werden. 1M DTT-Lösung kann bei -20℃ länger als gelagert werden 2 Jahre.
DTT ist aufgrund seiner leichten Oxidation durch Luft relativ instabil, Jedoch, Die Haltbarkeit kann durch Einfrieren oder Handhabung unter Inertgas verlängert werden.
Da die Nukleophilie von protoniertem Schwefel geringer ist, Auch die effektive Reduktionskraft von DTT nimmt mit sinkendem pH-Wert ab; Tris(2-Carboxyethyl)Phosphin-HCl (TCEP-Hydrochlorid) kann als Alternative zu DTT unter Bedingungen mit niedrigem pH-Wert verwendet werden, und es ist auch stabiler als DTT.
Was sind die Anwendungen von DTT?
- Es wird als Reduktions- und Entschützungsmittel für thiolierte DNA verwendet. Die thiolierten DNA-terminalen Schwefelatome neigen dazu, in Lösung Dimere zu bilden, insbesondere in Gegenwart von Sauerstoff. Diese Dimerisierung verringert die Effizienz bestimmter Kopplungsreaktionsexperimente erheblich (wie die Immobilisierung von DNA in Biosensoren). Die Zugabe von DTT zur DNA-Lösung und das Entfernen nach einer Reaktionszeit kann die Dimerisierung der DNA verringern.
- Es wird verwendet, um Disulfidbindungen in Proteinen zu reduzieren. Es kann verwendet werden, um die Bildung intramolekularer oder intermolekularer Disulfidbindungen zwischen Cysteinresten in Proteinen zu verhindern. Jedoch, DTT ist im Allgemeinen nicht in der Lage, in der Proteinstruktur eingebettete Disulfidbindungen zu reduzieren (für Lösungsmittel nicht zugänglich). Die Reduktion solcher Disulfidbindungen erfordert normalerweise eine Denaturierung des Proteins (Erhitzen bei hoher Temperatur oder Zugabe von Vergällungsmitteln wie 6M Guanidin Hydrochlorid, 8M Harnstoff, oder 1% Sicherheitsdatenblatt).
Umgekehrt, Die Einbettungstiefe kann anhand des Unterschieds in der Geschwindigkeit der Reduktion der Disulfidbindung in Gegenwart von DTT bestimmt werden.
Warum DTT ist ein starker reduzierend Agent?
DTT ist ein sehr starkes Reduktionsmittel, und seine Reduktionskraft beruht größtenteils auf der Konformationsstabilität seines oxidierten Sechsrings (enthält eine Disulfidbindung).
Bei pH 7, sein Redoxpotential beträgt -0.33 Volt.
Darunter, Der bei der Reaktion gebildete Zwischenzustand ist sehr instabil, weil die zweite Thiolgruppe am DTT dazu neigt, sich mit dem oxidierten Schwefelatom zu verbinden, Daher wandelt sich der Zwischenzustand schnell in die zyklische oxidierte Struktur von DTT um, Dadurch wird die Reduktion der Disulfidbindung abgeschlossen.
Die Reduktionsfähigkeit von DTT wird vom pH-Wert beeinflusst und funktioniert nur, wenn der pH-Wert größer als ist 7. Dies liegt daran, dass nur das Thiolatanion deprotoniert wird (-S-) ist reaktiv, während das Thiol (-Sch) ist nicht reaktiv; Der pKa von Mercaptan liegt normalerweise bei ca 8.3.
Welche Gefahren birgt DTT für den menschlichen Körper??
Dithiothreitol (DTT) ist ein niedermolekulares organisches Reduktionsmittel, das einen unangenehmen Geruch abgibt. Beim Einatmen kann es gesundheitsschädlich sein, geschluckt, oder über die Haut aufgenommen. Die Exposition gegenüber DTT kann verschiedene Gesundheitsprobleme verursachen, einschließlich:
- Haut- und Augenreizung: DTT kann bei Kontakt Haut und Augen reizen. Zu den Symptomen kann Rötung gehören, Juckreiz, Verbrennung, und tränende Augen.
- Reizung der Atemwege: Das Einatmen von DTT-Staub oder -Nebel kann die Atemwege reizen, Husten verursachen, niesen, Kurzatmigkeit, und keuchend.
- Sensibilisierung der Haut: Eine längere oder wiederholte Exposition gegenüber DTT kann zu einer Hautsensibilisierung führen, wo die Haut überempfindlich gegenüber DTT wird, bei weiterem Kontakt eine allergische Reaktion hervorrufen. Dies kann sich als Ausschlag äußern, Blasen, oder Schwellung.
Sicherheitsvorkehrungen:
- Tragen Sie beim Umgang mit DTT Handschuhe und Augenschutz, insbesondere in fester oder hochkonzentrierter Form.
- Arbeiten Sie in einem gut belüfteten Abzug, um ein Einatmen zu vermeiden.
- Kontakt mit Haut und Augen vermeiden.
- Nach dem Umgang mit DTT gründlich die Hände waschen.
- Entsorgen Sie DTT-Abfälle gemäß den örtlichen Vorschriften.
Abschluss
DTT ist ein wertvolles Werkzeug in der biologischen Forschung, Es ist jedoch wichtig, vorsichtig damit umzugehen, um mögliche Gesundheitsrisiken zu vermeiden. Indem Sie die empfohlenen Sicherheitsvorkehrungen befolgen, Sie können die mit der Verwendung von DVB-T verbundenen Risiken minimieren.
