Dithiothreitol (DTT) ist ein Reagenz, das zur Reduzierung von Protein-S-S-Bindungen verwendet wird. In der biochemischen Forschung, es ist ein Thiol-schützendes Mittel, eine spezifische Enzym Inhibitor, und zur Messung der Enzymaktivität verwendet. Es wird auch bei der Zubereitung von verwendet SDS-SEITE Probenpuffer.
Lösen Sie 3,09 g DTT in 20 ml 0,01 mol/L Natriumacetatlösung (pH5,2), filtern und sterilisieren, Anschließend in 1-ml-Fläschchen aliquotieren und bei -20 °C lagern.
Weiße Nadel oder weißes Granulat
≥99 %
2-8℃
Vier Jahre
Dithiothreitol (DTT) ist ein kleines organisches Molekül, das Wirkstoffe mit der chemischen Formel C4H10O2S2 reduzieren kann.
Im reduzierten Zustand ist es ein lineares Molekül und wird nach der Oxidation zu einer sechsgliedrigen Ringstruktur, die eine Disulfidbindung enthält.
Der Name Dithiothreitol leitet sich von Erythritol ab (ein Zucker mit vier Kohlenstoffatomen). Das Isomer von DTT ist Dithioerythrit (DTE), welches ein C3-Epimer von DTT ist.
Die allgemeinen Lagerbedingungen für DTT-Pulver sollten bei -20 °C gelagert werden. 1M DTT-Lösung kann bei -20℃ länger als gelagert werden 2 Jahre.
DTT ist aufgrund seiner leichten Oxidation durch Luft relativ instabil, Jedoch, Die Haltbarkeit kann durch Einfrieren oder Handhabung unter Inertgas verlängert werden.
Da die Nukleophilie von protoniertem Schwefel geringer ist, Auch die effektive Reduktionskraft von DTT nimmt mit sinkendem pH-Wert ab; Tris(2-Carboxyethyl)Phosphin-HCl (TCEP-Hydrochlorid) kann als Alternative zu DTT unter Bedingungen mit niedrigem pH-Wert verwendet werden, und es ist auch stabiler als DTT.
Umgekehrt, Die Einbettungstiefe kann anhand des Unterschieds in der Geschwindigkeit der Reduktion der Disulfidbindung in Gegenwart von DTT bestimmt werden.
DTT ist ein sehr starkes Reduktionsmittel, und seine Reduktionskraft beruht größtenteils auf der Konformationsstabilität seines oxidierten Sechsrings (enthält eine Disulfidbindung).
Bei pH 7, sein Redoxpotential beträgt -0.33 Volt.
Darunter, Der bei der Reaktion gebildete Zwischenzustand ist sehr instabil, weil die zweite Thiolgruppe am DTT dazu neigt, sich mit dem oxidierten Schwefelatom zu verbinden, Daher wandelt sich der Zwischenzustand schnell in die zyklische oxidierte Struktur von DTT um, Dadurch wird die Reduktion der Disulfidbindung abgeschlossen.
Die Reduktionsfähigkeit von DTT wird vom pH-Wert beeinflusst und funktioniert nur, wenn der pH-Wert größer als ist 7. Dies liegt daran, dass nur das Thiolatanion deprotoniert wird (-S-) ist reaktiv, während das Thiol (-Sch) ist nicht reaktiv; Der pKa von Mercaptan liegt normalerweise bei ca 8.3.
Dithiothreitol (DTT) ist ein niedermolekulares organisches Reduktionsmittel, das einen unangenehmen Geruch abgibt. Beim Einatmen kann es gesundheitsschädlich sein, geschluckt, oder über die Haut aufgenommen. Die Exposition gegenüber DTT kann verschiedene Gesundheitsprobleme verursachen, einschließlich:
DTT ist ein wertvolles Werkzeug in der biologischen Forschung, Es ist jedoch wichtig, vorsichtig damit umzugehen, um mögliche Gesundheitsrisiken zu vermeiden. Indem Sie die empfohlenen Sicherheitsvorkehrungen befolgen, Sie können die mit der Verwendung von DVB-T verbundenen Risiken minimieren.
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