The Kit provides fast purification of high-quality RNA from paxigene Blood RNA Tube using silica-membrane spin columns. RNA purified using the HiPure System is ready for applications such as RT-PCR, transferencia Northern, ARN poli A+ (ARNm) purificación, protección de nucleasa, y traducción in vitro.
Detalles
Especificaciones
Características | Especificaciones |
Funciones principales | Isolation of total RNA from Paxgene RNA Tubes |
Aplicaciones | RT-PCR, qPCR, hibridación del norte, NGS, protección del ácido nucleico, traducción in vitro |
Método de purificación | Mini columna de giro |
Tecnología de purificación | tecnología de sílice, Tecnología de filtración de ADN. |
método de proceso | Manual (centrifugación o vacío) |
Tipo de ejemplo | Blood in the preservation tube |
Cantidad de muestra | 2.5ml |
Volumen de elución | ≥30µl |
Volumen de transporte de líquido por columna | 800l |
Rendimiento de unión de la columna | 100µg |
Principio
The Kit is for the purification of total RNA from 2.5 ml human whole blood collected in a PAXgene Blood RNA Tube. Purification begins with a centrifugation step to pellet nucleic acids in the PAXgene Blood RNA Tube. The pellet is washed and resuspended, and incubated in optimized buffers together with proteinase K. DNA wash The lysate is passed through a DNA Mini column. Ethanol is added to adjust binding conditions, and the lysate is applied to a column.RNA is selectively bound to the silica membrane as contaminants pass through. The remaining contaminants are removed in several efficient wash steps. Between the first and second wash steps, the membrane is treated with DNase I to remove trace amounts of bound DNA. After the wash steps, RNA is eluted in elution buffer and heat-denatured.
Ventajas
- Alta calidad – El ARN total de alta pureza se puede utilizar directamente en diversas aplicaciones sensibles posteriores.
- Rápido – isolation of several samples can be completed in 40 minutes by using the column purification method
- Seguridad – no phenol-chloroform extraction is required
- Sensible – direct lysis of blood, plasma, and other samples without separation of leukocytes
Contenido del kit
Contenido | R416802 | R416803 |
Tiempos de purificación | 10 preparativos | 50 preparativos |
HiPure RNA Mini Columns I | 10 | 50 |
gDNA Filter Mini Columns | 10 | 50 |
2Tubos de recolección de ml | 30 | 150 |
Agua libre de ARNasa | 60 ml | 250 ml |
Buffer MBR1 | 10 ml | 30 ml |
Buffer MBR2 | 5 ml | 15 ml |
Memoria intermedia RW1 | 15 ml | 60 ml |
Búfer RW2* | 6 ml | 20 ml |
Proteinasa K | 12 mg | 50 mg |
Tampón de disolución de proteasa | 1.8 ml | 5 ml |
ADNasa I | 120 l | 600 l |
Tampón ADNasa | 6 ml | 30 ml |
Almacenamiento y estabilidad
La proteinasa K debe almacenarse a una temperatura de 2 a 8 °C a su llegada.. La ADNasa I debe conservarse a -20°C.. Sin embargo, almacenamiento a corto plazo (ADNasa I hasta 1 semanas, Proteinasa K hasta 8 semanas) a temperatura ambiente (15–25°C) no afecta su rendimiento. Los componentes restantes del kit se pueden almacenar a temperatura ambiente. (15–25°C) y son estables durante al menos 18 meses en estas condiciones.
Datos del experimento
Reseñas
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