Introducción
The HiPure ADN plásmido Mega Kits combine the power of HiPure technology with the time-tested consistency of alkaline-Ficha de datos de seguridad (MSDS) lysis of bacterial cells to deliver high-quality DNA. HiPure DNA columns facilitate the binding, washing and elution steps thus enabling multiple samples to be simultaneously processed. Plasmid DNA purified by this system is suitable for automated fluorescent DNA sequencing, restriction endonuclease digestion, transfection of mammalian cells, and other manipulations. Hasta 10 mg high copy number plasmid DNA can be purified from 500 mL overnight culture.
Detalles
Especificaciones
| Características | Especificaciones |
| Funciones principales | Isolation up to 10mg endotoxin-free plasmid DNA from 500ml bacterial culture |
| Aplicaciones | Transfección celular, inyección de animales, etc.. |
| Método de purificación | Mega columna de giro |
| Tecnología de purificación | tecnología de sílice |
| método de proceso | Manual (centrifugación o vacío) |
| Tipo de ejemplo | Plásmido convencional, plásmido de menos de 30 KB |
| Cantidad de muestra | High copy plasmid: 500ml culture medium |
| Producir | 10mg |
| Volumen de elución | ≥0,8 ml |
| Tiempo por carrera | ≤70 minutos |
| Volumen de transporte de líquido por columna | 50ml |
| Rendimiento de unión de la columna | 10mg |
Principio
El procedimiento HiPure Plasmid se basa en la lisis alcalina de células bacterianas seguida de la adsorción de ADN en sílice en presencia de un alto contenido de sal.. La exclusiva membrana de sílice utilizada en el kit reemplaza completamente las suspensiones de vidrio o sílice para minipreparaciones de ADN plasmídico.. El procedimiento consiste en 3 Pasos básicos: Preparación y aclaración de un lisado bacteriano por método alcalino.，luego transfiera el sobrenadante a la columna para unir el ADN.. Después del lavado de proteínas y otras impurezas., El ácido nucleico finalmente se eluyó con un tampón bajo en sal. (10mm tris, pH9.0, 0.5mmEDTA).
Ventajas
- Alta pureza – El plásmido purificado se puede utilizar directamente en la secuenciación., digestión enzimática y PCR, etc..
- Rápido – La purificación en columna de gel de sílice es mucho más rápida que el intercambio iónico
- Alto rendimiento – up to 10mg plasmid can be binded in one column
- Low endotoxin – the obtainedplasmid can be directly used for cell transfection and animal injection, etc..
Contenido del kit
| Contenido | P111602 | P111603 |
| Tiempos de purificación | 10 preparativos | 50 preparativos |
| ARNasa A | 60 mg | 2 X 150 mg |
| Tampón E1 | 220 ml | 2 X 550 ml |
| Tampón E2 | 220 ml | 2 X 550 ml |
| Búfer E3 | 220 ml | 2 X 550 ml |
| Tampón E4 | 220 ml | 2 X 550 ml |
| Tampón E5 | 120 ml | 550 ml |
| Buffer PW2 | 25 ml | 2 X 100 ml |
| Tampón de elución | 30 ml | 120 ml |
| HiPure EF Maxi Columns | 10 | 50 |
| Lysate Clear Maxi Syringe | 10 | 50 |
| 50 Tubos de recolección de ml | 20 | 100 |
Almacenamiento y estabilidad
Los componentes del kit se pueden almacenar secos a temperatura ambiente. (15-25°C) y son estables durante al menos 18 meses en estas condiciones. Si se forma algún precipitado en los tampones, calentar a 37 ℃ para disolver.
Guía de compra
| Nombre | NO GATO | Cantidad de muestra | Tipo de columna | Volumen de elución | Producir | Tiempo por carrera | Requisitos de centrífuga |
| Mini kit HiPure Plasmid EF | P1154 | 10-15ml | 1.5columna de ml | ≥75μl | 10–70 µg/15 ml | ≤40 minutos | pequeña centrífuga |
| Plásmido HiPure EF 96 Equipo | P1157 | 1-5ml | 96 buen plato | ≥75μl | 30µg/1ml | ≤60 minutos | 96 centrífuga de placa de pocillos |
| Kit midi HiPure Plasmid EF | P1231 | 30-50ml | 15columna de ml | ≥0,4 ml | 10-500microgramos/50ml | ≤60 minutos | 15centrífuga ml |
| Kit maxi HiPure Plasmid EF | P1156 | 100-200ml | 50columna de ml | ≥0,8 ml | 100–1500 µg/200 ml | ≤60 minutos | 50centrífuga ml |
| Megakit HiPure Plasmid EF | P1116 | 500ml | 50columna de ml | ≥0,8 ml | 10mg/500ml | ≤70 minutos | 50centrífuga ml |
Reseñas
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