Introducción
El sistema HiPure Midi proporciona una rápida, simple, y rentable ADN plásmido Método midiprep para aplicaciones rutinarias de laboratorio de biología molecular. Los kits HiPure Midiprep utilizan tecnología de membrana de sílice para eliminar los pasos engorrosos asociados con resinas o lodos sueltos.. El ADN plasmídico purificado con Mini Kits está inmediatamente listo para su uso.. No se requiere extracción con fenol ni precipitación con etanol., y el ADN plasmídico de alta calidad se eluye en un pequeño volumen de tampón Tris o agua.
Detalles
Especificaciones
| Características | Especificaciones |
| Funciones principales | Aislamiento de hasta 500 µg de ADN plasmídico libre de endotoxinas a partir de 25-50 ml de cultivo bacteriano |
| Aplicaciones | Transfección celular, inyección de animales, etc.. |
| Método de purificación | midi columna de giro |
| Tecnología de purificación | tecnología de sílice |
| método de proceso | Manual (centrifugación o vacío) |
| Tipo de ejemplo | Plásmido convencional, plásmido de menos de 30 KB |
| Cantidad de muestra | 25-50ml |
| Producir | 10-500µg |
| Volumen de elución | ≥0,4 ml |
| Tiempo por carrera | ≤60 minutos |
| Volumen de transporte de líquido por columna | 4ml |
| Rendimiento de unión de la columna | 250µg |
Principio
El procedimiento HiPure Plasmid se basa en la lisis alcalina de células bacterianas seguida de la adsorción de ADN en sílice en presencia de un alto contenido de sal.. La exclusiva membrana de sílice utilizada en el kit reemplaza completamente las suspensiones de vidrio o sílice para minipreparaciones de ADN plasmídico.. El procedimiento consiste en 3 Pasos básicos: Preparación y aclaración de un lisado bacteriano por método alcalino.，luego transfiera el sobrenadante a la columna para unir el ADN.. Después del lavado de proteínas y otras impurezas., El ácido nucleico finalmente se eluyó con un tampón bajo en sal. (10mm tris, pH9.0, 0.5mmEDTA).
Ventajas
- Alta pureza – El plásmido purificado se puede utilizar directamente en la secuenciación., digestión enzimática y PCR, etc..
- Rápido – La purificación en columna de gel de sílice es mucho más rápida que el intercambio iónico
- Alto rendimiento – Se pueden unir hasta 250 μg de plásmido en una columna.
- Bajo contenido de endotoxinas – El plásmido obtenido se puede utilizar directamente en la transfección celular y la inyección en animales.
Contenido del kit
| Contenido | P123102 | P123102B |
| Tiempos de purificación | 50 preparativos | 50 preparativos |
| ARNasa A | 30 mg | 30 mg |
| Tampón E1 | 150 ml | 150 ml |
| Tampón E2 | 150 ml | 150 ml |
| Búfer E3 | 150 ml | 150 ml |
| Tampón E4 | 150 ml | 150 ml |
| Tampón E5 | 150 ml | 150 ml |
| Búfer PW2* | 50 ml | 50 ml |
| Tampón de elución | 30 ml | 30 ml |
| Minicolumna MaxPure EF | 50 | 50 |
| 2 Tubos de recolección de ml | 50 | 50 |
| Jeringa midi transparente lisado | 50 | 50 |
| Extender tubos | 50 | 50 |
| 50Tubos de centrífuga de ml | 50 | |
| Tubos de soporte | 50 |
Almacenamiento y estabilidad
Los componentes del kit se pueden almacenar secos a temperatura ambiente. (15-25°C) y son estables durante al menos 18 meses en estas condiciones. Si se forma algún precipitado en los tampones, calentar a 37 ℃ para disolver. Después de la adición de RNasa A y reactivo LyseBlue opcional, El búfer P1 es estable durante 6 meses cuando se almacena a 2-8°C.
Guía de compra
| Nombre | NO GATO | Cantidad de muestra | Tipo de columna | Volumen de elución | Producir | Tiempo por carrera | Requisitos de centrífuga |
| Mini kit HiPure Plasmid EF | P1154 | 10-15ml | 1.5columna de ml | ≥75μl | 10–70 µg/15 ml | ≤40 minutos | pequeña centrífuga |
| Plásmido HiPure EF 96 Equipo | P1157 | 1-5ml | 96 buen plato | ≥75μl | 30µg/1ml | ≤60 minutos | 96 centrífuga de placa de pocillos |
| Kit midi HiPure Plasmid EF | P1231 | 30-50ml | 15columna de ml | ≥0,4 ml | 10-500microgramos/50ml | ≤60 minutos | 15centrífuga ml |
| Kit maxi HiPure Plasmid EF | P1156 | 100-200ml | 50columna de ml | ≥0,8 ml | 100–1500 µg/200 ml | ≤60 minutos | 50centrífuga ml |
| Megakit HiPure Plasmid EF | P1116 | 500ml | 50columna de ml | ≥0,8 ml | 10mg/500ml | ≤70 minutos | 50centrífuga ml |
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