Introducción
HiPure Plasmid EF Mini Kit Overview:
- Technology Integration:
- Combines HiPure technology with Magen’s innovative Endotoxin Removal Technology (ETR) to ensure high-quality plasmid purificación de ADN.
- Endotoxin Management:
- Features a specially formulated buffer designed to prevent endotoxins from binding to the HiPure matrix, significantly reducing endotoxin levels in the final DNA product.
- Application Suitability:
- Provides plasmid DNA ideal for eukaryotic transfection and in vitro experiments, especially where low endotoxin levels are critical.
- Impact of Endotoxin Contamination:
- Endotoxin contamination can drastically lower transfection efficiencies, particularly in endotoxin-sensitive cell lines.
- Clinical Relevance:
- In contexts such as gene therapy, controlling endotoxin levels is crucial due to the potential for serious adverse effects like fever, endotoxin shock syndrome, and negative impacts on in vitro transfection into immune cells.
Detalles
Especificaciones
| Características | Especificaciones |
| Funciones principales | Isolation up to 70µg endotoxin-free plasmid DNA from 10-15ml bacterial culture |
| Aplicaciones | Transfección celular, inyección de animales, etc.. |
| Método de purificación | Mini columna de giro |
| Tecnología de purificación | tecnología de sílice |
| método de proceso | Manual (centrifugación o vacío) |
| Tipo de ejemplo | Plásmido convencional |
| Cantidad de muestra | High copy plasmid: 10ml culture medium Low copy number plasmid : 10-15ml culture medium |
| Producir | 10-70µg |
| Volumen de elución | ≥75μl |
| Tiempo por carrera | ≤40 minutos |
| Volumen de transporte de líquido por columna | 800µl |
| Rendimiento de unión de la columna | 70µg |
Principio
El procedimiento HiPure Plasmid se basa en la lisis alcalina de células bacterianas seguida de la adsorción de ADN en sílice en presencia de un alto contenido de sal.. La exclusiva membrana de sílice utilizada en el kit reemplaza completamente las suspensiones de vidrio o sílice para minipreparaciones de ADN plasmídico.. El procedimiento consiste en 3 Pasos básicos: Preparación y aclaración de un lisado bacteriano por método alcalino.，luego transfiera el sobrenadante a la columna para unir el ADN.. Después del lavado de proteínas y otras impurezas., El ácido nucleico finalmente se eluyó con un tampón bajo en sal. (10mm tris, pH9.0, 0.5mmEDTA).
Ventajas
- Alta pureza – El plásmido purificado se puede utilizar directamente en la secuenciación., digestión enzimática y PCR, etc..
- Rápido – La purificación en columna de gel de sílice es mucho más rápida que el intercambio iónico
- Alto rendimiento – up to 70μg plasmid can be binded in one column
- Bajo contenido de endotoxinas – El plásmido obtenido se puede utilizar directamente en la transfección celular y la inyección en animales.
Contenido del kit
| Contenido | P115402 | P115403 |
| Tiempos de purificación | 50 preparativos | 250 preparativos |
| ARNasa A | 5 mg | 20 mg |
| Búfer P1 | 30 ml | 140 ml |
| Buffer P2 | 30 ml | 140 ml |
| Buffer LEN3 | 15 ml | 70 ml |
| Buffer LN4 | 50 ml | 250 ml |
| Buffer LN5 | 30 ml | 140 ml |
| Buffer PW1 | 30 ml | 140 ml |
| Buffer PW2 | 12 ml | 50 ml |
| Tampón de elución | 15 ml | 30 ml |
| HiPure DNA Mini Columns III | 50 | 250 |
| 2 Tubos de recolección de ml | 50 | 250 |
Almacenamiento y estabilidad
Storage Instructions:
- General Storage:
- Kit components can be stored dry at room temperature (15–25°C).
- Stable for at least 18 meses en estas condiciones.
- Handling Precipitates:
- Si se forma algún precipitado en los tampones, warm at 37°C to dissolve.
- Specific Storage for Buffer P1 with RNase A:
- After addition of RNase A, El búfer P1 es estable durante 6 meses cuando se almacena a 2-8°C.
Guía de compra
| Nombre | NO GATO | Cantidad de muestra | Tipo de columna | Volumen de elución | Producir | Tiempo por carrera | Requisitos de centrífuga |
| Mini kit HiPure Plasmid EF | P1154 | 10-15ml | 1.5columna de ml | ≥75μl | 10–70 µg/15 ml | ≤40 minutos | pequeña centrífuga |
| Plásmido HiPure EF 96 Equipo | P1157 | 1-5ml | 96 buen plato | ≥75μl | 30µg/1ml | ≤60 minutos | 96 centrífuga de placa de pocillos |
| Kit midi HiPure Plasmid EF | P1231 | 30-50ml | 15columna de ml | ≥0,4 ml | 10-500microgramos/50ml | ≤60 minutos | 15centrífuga ml |
| Kit maxi HiPure Plasmid EF | P1156 | 100-200ml | 50columna de ml | ≥0,8 ml | 100–1500 µg/200 ml | ≤60 minutos | 50centrífuga ml |
| Megakit HiPure Plasmid EF | P1116 | 500ml | 50columna de ml | ≥0,8 ml | 10mg/500ml | ≤70 minutos | 50centrífuga ml |
Reseñas
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