Oral Swab Genomic DNA Extraction Kit

1. Componentes del kit de reactivos

2. Almacenamiento

Este kit de reactivos debe almacenarse a temperatura ambiente. (15-25℃) y en condiciones secas, con una vida útil de 12 meses. Las columnas de purificación y extracción de ADN se pueden almacenar durante 1 año en un ambiente fresco y seco. Proteinasa K y ARNasa A contienen conservantes, permitiendo el transporte a temperatura ambiente, pero para almacenamiento a largo plazo, deben mantenerse a -20 ℃.

3. Instrucciones para usar el kit de reactivos

3.1 Este kit de reactivos está destinado a la investigación de biología molecular y no debe utilizarse para el diagnóstico o tratamiento de enfermedades..

3.2 Algunos componentes del kit de reactivos contienen irritantes.. Se recomiendan medidas de protección como el uso de ropa y gafas protectoras..

3.3 Durante el uso de este kit de reactivos, una centrífuga de alta velocidad, baño de agua (baño de metal), mezclador Vortex, etanol anhidro, agua desionizada estéril, y los tubos EP deben ser preparados por el usuario.

4. Introducción al kit de reactivos

The Oral Swab Purificación de ADN Kit provides a rapid and efficient method for purifying DNA from oral swabs, widely used for the extraction of epithelial cells such as oral epithelium.

The Oral Swab DNA Rapid Purification Kit can extract total DNA from oral epithelial cells within 30 minutos. Todo el proceso de purificación no requiere reactivos tóxicos como el fenol-cloroformo.. El ADN extraído se puede utilizar directamente para PCR, transferencia del sur, y otras aplicaciones.

5. Principios y procedimientos experimentales

6. Proceso de extracción

Antes de comenzar el experimento:

A. Reagent Buffer B and C puede precipitar en condiciones de baja temperatura. We recommend heating at 65℃for 5 minutos. After the precipitate dissolves, se puede utilizar normalmente.

B. Antes de usar, agregue la cantidad especificada de etanol anhidro a Tampón de lavado 1as indicated on the bottle label. Mark a check on the label to indicate the addition of anhydrous ethanol.

C. El tampón de elución es un0.1x solución TEcontaining minimal amounts of EDTA. Si el EDTA podría afectar experimentos posteriores, it is advisable to substitute Elution Buffer with sterile deionized water.

1. Manejo de muestras:
2. Sampling: Take a sterilized cotton swab, insert it into the mouth, rub against the inner cheek back and forth for more than 20 veces.
3. Use scissors to cut the head of the cotton swab, place it into a 2 ml centrifuge tube, and add 400µl de Reactivo Buffer B.
4. Agregar10μl Proteinase K (10 mg/ml) and 10μl RNase A (10 mg/ml), invert thoroughly, incubate at 65°C for 20 minutos, vortex for 10 seconds during incubation.
5. Agregar 400µl de Reactivo Buffer Cal lisado, vortex thoroughly.
6. Agregar 200μl of pre-chilled absolute ethanol, mezclar bien; precipitation may occur, pero no afectará los experimentos posteriores..
7. Transfer the obtained liquid into a DNA extraction and purification column (equipo) (aproximadamente 650~700μl cada vez), centrifugar en >8,000 rpm para 1 minuto, discard the collected waste liquid, and reinsert the collection tube into the DNA extraction and purification column (equipo) para el siguiente paso.
8. Place the DNA extraction and purification column (equipo) into a collection tube, agregar 300μl of Wash Buffer 1, centrifugar en >8,000 rpm para 1 minuto, discard the waste liquid, and reinsert the DNA extraction and purification column (equipo) en el tubo para el siguiente paso.

(Nota: Ensure that absolute ethanol has been added to Wash Buffer 1.)

7. Agregar 500μl of Wash Buffer 1to the DNA extraction and purification column (equipo), centrifugar en 14,000 rpm (20,000×g) para 2 minutos, extend the centrifugation time appropriately to dry the membrane further.
8. Place the DNA extraction and purification column (equipo) en un nuevo tubo de centrífuga, open the lid, incubate at 65°C for 2 minutos; this step can be extended appropriately to evaporate ethanol as much as possible, preventing residual ethanol from affecting downstream experiments.
9. Elute 100μl of Elution Buffersobre la membrana, centrifugar en 12,000 rpm para 2 minutos.

(Nota: 1. Eluting DNA with 50μl of Elution Buffer can increase DNA concentration but decrease total DNA yield; 2. Eluted DNA in the eluate can be reapplied to the DNA extraction and purification column, centrifuge again at 12,000 rpm para 2 minutes to increase DNA yield.)