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Introducción
La proteinasa K es una serina proteasa estable con amplia especificidad de sustrato. Degrada muchas proteínas en estado nativo incluso en presencia de detergentes.. No es activado por metaliones., agentes quelantes (Por ejemplo, EDTA), reactivos de sulfhidrilo, o por tripsinos o inhibidores de quimotripsina.. Es estable en un amplio rango de pH. (4-12.5), con actividad óptima a pH 6,5–9,5. La actividad puede estimularse mediante la adición de agentes desnaturalizantes. (Ficha de datos de seguridad (MSDS) y urea). La desnaturalización rápida de la enzima se produce a temperaturas superiores a 70°C.. La autólisis de la enzima ocurre cada vez más a pH alcalino.. Sin embargo, La proteinasa K no se inactiva completamente por autólisis.. Algunos fragmentos de enzimas continúan manteniendo su actividad proteolítica completa., incluso después de una autólisis extensa.
La proteinasa K se utiliza frecuentemente en aplicaciones de biología molecular para digerir proteínas no deseadas., como las nucleasas en preparaciones de ADN o ARN de microorganismos, células cultivadas, y plantas. La enzima se utiliza normalmente en dosis de 50 a 200 μg/ml en preparaciones de ácido nucleico a pH 7.5-8.0 y 37-55°C. Los tiempos de incubación varían de 30 minutos para 18 horas.
Detalles
Especificaciones
| Características | Especificaciones |
| Peso molecular | 29.3kDa |
| Punto isoeléctrico | 8.9 |
| Pureza | 95% (Análisis SDS-PAGE) |
| Actividad específica | ≥600 unidades/ml |
| Característica de temperatura | 70°C (temperatura máxima de actividad) (La temperatura de actividad efectiva es de 37-70°C.) |
| Características del PH | 4.0-12.0, el rango óptimo es ph7.5-11.5. jugo indigestivo, 65 grados |
| Condiciones de conservación | Se recomienda almacenar a baja temperatura para garantizar al máximo la estabilidad de la actividad. (El transporte o almacenamiento a temperatura normal no reducirá la actividad enzimática.). La vida útil a temperatura ambiente es de hasta 1 año.. |
| Método de uso | Se añadió proteinasa K a la solución digestiva o al lisado hasta que la concentración final fue de 50-200 ug/ml y se incubó a 55-70°C.. La proteinasa K después de la reacción se puede eliminar o inactivar mediante el método de perlas magnéticas, método sobre columna o extracción con fenol cloroformo. La proteasa K puede inactivarse mediante incubación a 95°C durante 3 minutos o 70°C durante 15 minutos |
| Detección de residuos de ácidos nucleicos. | Cuantificación de cúbits, ≤1 ppm. Sin contaminación de ADN de origen humano (no detectado en tiempo real PCR) |
| Detección de nucleasas | ADNasa no detectada ARNasa no detectada |
| Aplicación recomendada | Extracción de ADN de células y tejidos., Aislamiento de ácido nucleico viral |
Ventajas
- Proteasa líquida K lista para usar a temperatura normal
- Conveniente para transportar y almacenar a temperatura ambiente.
- Alta actividad, 20 mg/ml, >600 mAu/ml
Información sobre pedidos
| Contenido | C12103 | C12104 |
| Solución de proteinasa K (20mg/ml) | 10 ml | 1000 ml |
Reseñas
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