Solarbio Azul Alcián Ácido Periódico Schiff(AB-PAS) Kit de manchas

Componentes del kit

Introducción

La tinción con glucógeno es un método de tinción patológico convencional.. Utilizado por primera vez por McManus en 1946, La tecnología PAS muestra mucina y otros polisacáridos. Este método se emplea para visualizar el glucógeno y otros polisacáridos.. La solución colorante también puede contener sustancias mucilaginosas neutras y algunas sustancias ácidas..

La combinación de la tecnología Alcian Blue y PAS identifica mucina neutra y mucina ácida en la misma sección de tejido. Esta técnica se utiliza comúnmente para detectar mucinas.. Un resultado de tinción negativo indica claramente la ausencia de mucina.. Típicamente, Las secciones se tiñen primero con azul alcián estándar. (pH 2.5) seguido de la tecnología PAS. El azul alcián puede teñir la mucina salival, hiomucina, y azul de proteoglicano. La tecnología PAS puede teñir la mucina neutra de color rojo intenso o rojo violeta y, simultáneamente, teñir tejidos y células que contienen mucina neutra y ácida en diferentes tonos de púrpura., debido a la combinación y reacción del azul alcián y el reactivo de Schiff.

Materiales proporcionados por uno mismo

Agua destilada, Serie de etanol

Protocolo (solo por referencia)

1. Desparafinar a agua destilada, luego enjuague con agua destilada durante 2 minutos.
2. Teñir con solución de tinción de azul alcián para 10-20 minutos.
3. Enjuague en agua destilada tres veces por cada vez. 1-2 minutos.
4. Tratar con oxidante para 5 minutos. Enjuague con agua del grifo y luego enjuague con agua destilada dos veces..
5. Remojar en reactivo de Schiff y teñir durante 10-20 minutos. Luego lavar con agua corriente durante 10 minutos.
6. Teñir con solución de hematoxilina para 1-2 minutos, luego lavar con agua.
7. Diferenciar con solución de diferenciación ácida para 2-5 segundos, luego lavar con agua.
8. Azul con Scott Bluing Solution para 3 minutos y lavar con agua durante 3 minutos.
9. Deshidratar con una serie de etanol., transparente con xileno, y sellar con resineno.

Resultado

• glucógeno, mucinas neutras, y varias glicoproteínas: Rojo púrpura
• Mucinas ácidas (sulfatados y carboxilados): Azul
• proteoglicanos, ácido hialurónico: Azul

Nota: Las células o tejidos que contienen mucinas neutras y ácidas se pueden teñir en diferentes tonos de azul violeta a violeta..

Nota

1. Asegúrese de desparafinar la sección limpia para evitar afectar el efecto de teñido..
2. El tiempo de oxidación del oxidante no debe ser demasiado largo.; la temperatura óptima es 18-22°C.
3. Reactivos A, B, y C deben almacenarse herméticamente a 4°C, evitando la exposición excesiva a la luz solar y al aire. Antes de usar, déjelos alcanzar la temperatura ambiente en la oscuridad.
4. La solución de diferenciación ácida debe reemplazarse con frecuencia., y tiempo de diferenciación ajustado en función del espesor de la sección, tipo de tejido, y edad de la solución. Es esencial un lavado suficiente con agua del grifo después de la diferenciación..
5. El tiempo de acción del oxidante y del reactivo de Schiff es crítico y depende del grosor de la sección y del tipo de tejido..
6. Al volver a teñir con solución de hematoxilina, realice un teñido claro para evitar enmascarar el color del azul alcian. El objetivo es evitar que la tinción de citoplasma o mucina cubra el color del azul alcian..
7. La secuencia de Alcian Blue-PAS Stain puede influir en los resultados finales.. Cuando la tinción PAS precede a la tinción con azul alcián, la mucina neutra y el glucógeno se pueden teñir de color púrpura. En cambio, El azul alcian puede teñir estas sustancias de color rojo violáceo antes de la tinción PAS..
8. Por seguridad y salud, Use ropa experimental y guantes desechables..