Ce produit fournit un flux de travail facile à utiliser pour l'isolement sélectif de l'ADN bactérien à partir d'échantillons intrinsèquement riches en ADN hôte., comme des liquides organiques ou des tampons. La méthode est spécifique pour l'identification de bactéries intactes et évite ainsi les faux résultats dus aux acides nucléiques de bactéries mortes.. Le kit permet l'isolement d'ADN bactérien enrichi adapté à une variété d'applications, including qPCR and whole metagenome or 16S rRNA gene sequencing.
Détails
Caractéristiques
Caractéristiques | Caractéristiques |
Fonctions principales | Isoler l'ADNg de l'échantillon biologique et éliminer l'ADN de l'hôte |
Applications | RAP, Southern blot et digestion enzymatique, etc.. |
Méthode de purification | Mini colonne de rotation |
Technologie de purification | Technologie de la silice |
Méthode de processus | Manuel (centrifugation ou vide) |
Échantillon type | Milieu de culture, écouvillon, sang parasite, tissu, expectorations, etc.. |
Montant de l'échantillon | Échantillon de sang, homogénéiser, plasma, épanchement cérébral, solution d'immersion par écouvillon, liquide concentré centrifugé, etc.:0.5-1ml |
Volume d'élution | ≥50μl |
Temps par course | ≤60 minutes |
Volume de liquide transporté par colonne | 800µl |
Rendement de liaison de la colonne | 100µg |
Principe
Ce produit est basé sur la purification sur colonne de silice. Ce produit épuise efficacement l'ADN de l'hôte humain et animal et produit un ADN bactérien enrichi. Une combinaison optimisée de lyse mécanique et chimique permet une perturbation efficace des cellules bactériennes. L'ADN cible est adsorbé sur la membrane, tandis que les protéines ne sont pas adsorbées et sont éliminées par filtration. Après avoir lavé les protéines et autres impuretés, l'acide nucléique a finalement été élué avec un tampon à faible teneur en sel (10mmTris, pH9,0, 0.5mmEDTA).
Avantages
- Haute concentration – l'ADN de l'hôte est digéré par la dnase, sans contamination de l'ADN de l'hôte
- Récupération élevée – L'ADN peut être récupéré au niveau du PG
- Bonne répétabilité – la technologie de la silice peut obtenir des résultats idéaux à chaque fois
- Large applicabilité – il peut être utilisé dans le sang, tissu, contenu intestinal et autres échantillons
Contenu du kit
Contenu | D314802 | D314803 |
Temps de purification | 50 Préparations | 250 Préparations |
Mini-colonnes Hipure DNA I | 50 | 2 X 125 |
2Tubes de prélèvement ml | 50 | 2 X 125 |
2Tubes de perles ml | 50 | 250 |
Tampon DRB | 15 ml | 60 ml |
Tampon ES | 6 ml | 30 ml |
Réactif DX | 0.5 ml | 1 ml |
Tampon DL | 30 ml | 120 ml |
Tampon GW1 | 22 ml | 110 ml |
Tampon GW2 | 12 ml | 50 ml |
DNase I (Poudre) | 6 mg | 30 mg |
Protéinase K | 24 mg | 120 mg |
Tampon de dissolution de protéase | 5 ml | 15 ml |
Tampon AE | 15 ml | 60 ml |
Stockage et stabilité
La DNase I et la Proteinase K doivent être conservées entre 2 et 8 °C à l'arrivée. Cependant, stockage à court terme (jusqu'à 12 semaines) à température ambiante (15–25°C) n'affecte pas leurs performances. Les composants restants du kit peuvent être stockés au sec à température ambiante (15–25°C) et sont stables pendant au moins 18 mois dans ces conditions. L'ensemble du kit peut être conservé entre 2 et 8°C, mais dans ce cas, les tampons doivent être redissous avant utilisation. Assurez-vous que tous les tampons sont à température ambiante lorsqu'ils sont utilisés.
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