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Introduction
Characteristics of RNase A:
- Enzyme Type:
- RNase A is an endoribonuclease that specifically degrades single-stranded RNA.
- Spécificité:
- It specifically cleaves RNA at cytosine (C) and uracil (U) residues.
- Action Mechanism:
- The enzyme cleaves the phosphodiester bonds between the 5′-ribose of a nucleotide and the phosphate group attached to the 3′-ribose d'un nucléotide pyrimidine adjacent.
- This action initially forms a 2′,3′-cyclic phosphate, which is subsequently hydrolyzed to a 3′-phosphate de nucléoside.
- Structure:
- RNase A is a single-chain polypeptide that includes 4 ponts disulfure, contributing to its stability.
- Optimal Activity:
- The highest enzymatic activity of RNase A is observed when acting on single-stranded RNA.
Applications of RNase A:
Primary Use:
- RNase A is extensively used to remove RNA from preparations of ADN plasmidique, ensuring that the DNA samples are free of RNA contamination.
Activity Across Different Conditions:
Salt Concentration Influence:
- À de faibles concentrations de sel (0 à 100 mMNaCl), RNase A can cleave both single-stranded and double-stranded RNA, and the RNA strand in RNA-DNA hybrids.
- At higher salt concentrations (0.3 M NaCl or more), its activity becomes specific to single-stranded RNA.
Détails
Caractéristiques
| Caractéristiques | Caractéristiques |
| Apparence | Poudre lyophilisée blanche ou jaune clair |
| Masse moléculaire | 13.7 KDa |
| Pureté | ≥60 % de RNase A (FDS-PAGE) |
| Activité spécifique | >50 Unités Kunitz/mg de protéine |
| Conditions de conservation | -20-8 °C. RNase is stable under heating and detergent conditions and can withstand high temperature treatment of 100 °C. |
| Détection de résidus de DNase | Non-détecté. Dans 10μl (y compris 200 ng plasmid) solution, La RNase A a été ajoutée à la concentration finale de 50-100 μg/ml et placé à température ambiante pendant 30 minutes. Après électrophorèse, le groupe principal était évident sans dégradation. |
| Application | Retirer l'ARN des préparations d'ADN plasmidique |
Avantages
- Haute activité, >50 U/mg
- Performances à coût élevé
- Haute pureté, pollution protéique à faible impureté
- Pas de Dnase résiduelle ou trace de Dnase
Informations de commande
| Contenu | C12120 | C12121 |
| RNase A, Lyophilisat, >50 U/mg de protéine | 1 g | 10 g |
Stockage et stabilité
Magen recommends storage at -20-8 °C. When stored at 2-8 °C, le produit conserve son activité pendant au moins 2 années.
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