Présentation du produit:
- Matériel de support: L'agarose sert de matériau de support courant dans l'électrophorèse sur gel.
- Impact sur la pureté: La pureté de l'agarose influence directement la résolution des bandes d'ADN et la clarté des résultats d'électrophorèse.
- Préparation: Agarose, une forme d'agar de haute pureté, est généralement préparé sous forme de gel avec des concentrations allant de 0.5% à 2%.
- Applications: L'électrophorèse sur gel d'agarose est utilisée pour la séparation et l'identification des acides nucléiques, y compris le profilage de l'ADN et la cartographie des enzymes de restriction de l'ADN.
- Visualisation: Des colorants fluorescents d'acide nucléique sont ajoutés au gel, et les bandes d'ADN sont visualisées à l'aide d'un scanner d'imagerie sur gel post-électrophorèse.
Contenu du produit:
Composants | DA003-02(100g) |
Agarose | 100g |
Contrôle de qualité:
Paramètre | spécification |
---|---|
Force du gel (1% gel) | > 1200g/cm² |
Electroendosmose (EEO) | < 0.15 |
Sulfate | ≤ 0.15% |
Température du gel (1.5% gel) | 35-37℃ |
Température de fusion (1.5% gel) | 87-89℃ |
Humidité | ≤ 10% |
Absence de nucléases.
Instructions d'utilisation:
- En fonction de la taille des fragments d'acide nucléique cibles et du type de tampon d'électrophorèse, déterminer la concentration d'agarose requise:
Concentration d'agarose | Plage de résolution linéaire idéale (bp) | |
1× TAE | 1× TBE | |
0.6% | 1200-15000 | 1200-12000 |
0.8% | 1000-10000 | 1000-12000 |
1.0% | 200-10000 | 100-10000 |
1.2% | 100-8000 | 100-5000 |
1.5% | 100-5000 | 50-3000 |
2.0% | 50-3000 | 50-3000 |
2.5% | 50-3000 | 50-2000 |
- Préparation du gel d'agarose (Exemple d'électrophorèse sur gel horizontal):
- En fonction de la quantité de gel nécessaire et de la concentration d'agarose souhaitée, mesurer un volume approprié de tampon d'électrophorèse (TAE ou TBE) et versez-le dans une fiole triangulaire.
Note: Le tampon utilisé pour la préparation du gel doit être le même que le tampon d'électrophorèse.
- Pesez avec précision l'agarose et ajoutez-le soigneusement dans la fiole triangulaire. Couvrir l'ouverture du flacon avec du papier sulfurisé et chauffer au four à micro-ondes pour dissoudre l'agarose.. Chauffer la solution jusqu'à ébullition, puis porter des gants résistants à la chaleur, faire tourner doucement le flacon. Répétez ce processus plusieurs fois jusqu'à ce que l'agarose soit complètement dissous.
Note: Utilisez plusieurs étapes d'ébullition courtes pendant la dissolution de l'agarose pour éviter la surchauffe et le débordement.. Assurez-vous que l'agarose est complètement dissous pour éviter des résultats d'électrophorèse flous.
- Ajouter le colorant d'acide nucléique à la solution d'agarose entièrement dissoute.
- Versez la solution d'agarose dans le moule à gel, puis insérez le peigne à la position appropriée. L'épaisseur du gel est généralement comprise entre 3 et 5 mm.
- Laisser le gel se solidifier à température ambiante (environ 30 minutes pour 1 heure) puis placez-le dans l'appareil d'électrophorèse pour l'électrophorèse.
Précautions:
- Attention à l'ébullition pendant le processus de dissolution de l'agarose pour éviter les brûlures.
- DA003-01 est une marque déposée nationale, et DA003-02 est un réactif importé.
- Veuillez porter des gants, surtout lors de l'utilisation de colorants fluorescents aux propriétés cancérigènes (comme le bromure d'éthidium) pour la coloration sur gel d'acide nucléique.
- Si le gel préparé n'est pas utilisé immédiatement, stockez-le immergé dans un tampon d'électrophorèse (TAE ou TBE) à éviter le dessèchement du gel.
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