Présentation du produit
RAP amplification of DNA fragments, Marquage ADN, extension d'amorce, détermination de la séquence, ajout d'une extrémité émoussée de A, TA vector cloning
| Product Information | |
|---|---|
| Masse moléculaire | 94 KD |
| Polymerase Activity | 5′-3′ ADN polymérase, 5′-3′ exonuclease (no 3′-5′ exonuclease) |
| Tampon PCR | 10 X PCR Buffer for direct loading |
| Experimental Efficiency | The PCR reaction can be directly detected by electrophoresis |
| Extension Speed | 1-2 Ko/min |
| Terminal Base | Product has A at the 3′ fin, facilitating TA vector cloning |
| Système de réaction (20µl) | Addition Amount | Remarks |
|---|---|---|
| ADN polymérase pure | 0.8µl | Adjust for amplification needs |
| 10x Tampon PCR | 2µl | |
| dNTP (2.5mM) | 2µl | |
| ApprêtF | 0.1-1µl | 10-50pmol used |
| ApprêtR | 0.1-1µl | 10-50pmol used |
| Modèle | <1µg | |
| dH2O | Jusqu'à 20μl |
| Programme des cycles | Température (°C) | Temps | Remarks |
|---|---|---|---|
| Dénaturation initiale | 94 | 3min | |
| Dénaturation | 94 | 30s (30-40 cycles) | |
| Recuit | 45-60 | 30s | |
| Extension | 72 | 30s-2min | Extension time varies with fragment |
| Prolongation finale | 72 | 10min |
Procédure
Can be directly detected without adding a Loading Buffer
Détection des résultats
After PCR, prendre 5 μl of product for agarose gel electrophoresis
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