Solarbio Coomassie (Bradford) Kit de dosage de protéines 50T

Chat n°: PC0015

Taille: 50T

Stockage: Conservation du sceau après ouverture, ce kit à compter de la date de commande est valable neuf mois.

Description

Le colorant Coomassie G-250 est un réactif colorimétrique utilisé pour la détection et la quantification des protéines totales. Dans un milieu acide, le colorant Coomassie se lie aux protéines, provoquant un changement immédiat du maximum d'absorption de 465 nm à 595 nm avec un changement de couleur concomitant du vert au bleu.. Dans une certaine plage de concentration, la valeur d'absorbance A595 mesurée est directement proportionnelle à la concentration en protéines.

Protocole

• MicroplaqueLecteur
  1. Dissoudre complètement la norme BSA, diluer 10ul à 250ul, la concentration finale de 0,2 mg/ml. Le tampon de dilution dépendait de l'échantillon de protéine mesuré. Par souci de simplicité, il est suggéré d'utiliser du NaCl à 0,9 % ou du PBS.
  2. 5×G250bien mélanger avant 1 ml 5×G250 dilué avec 4 ml de ddH2O. 1La solution ×G250 peut économiser une semaine à 4 ℃.
  3. La norme selon 0, 2, 4, 6, 8, 12, 16, et 20 ul respectivement ajoutés aux plaques 96 puits, et dilution PBS pour compléter.
  4. Diluer l'échantillon(préparer quelques dégradés, tel que 2 fois, 4 fois, 8 fois dilution), et ajoutez 20ul d'échantillon à 96 Bien. Pour éviter les erreurs, les points d'échantillonnage doivent être définis après la ligne standard de 1/2.
  5. Ajouter 200 ul dilués 1 × G250 dans chaque puits, température ambiante pour 3-5 minutes.
  6. Détermination de l'absorbance.
  7. Selon la courbe standard, calculez la protéine de l'échantillon

• UV-VisSpectrophotomètre

1. 8*10tube à centrifuger ml(ou plus) et étiqueté avec 1 ~ 8.
2. Diluer 100 ul de BSA avec 2,4 ml de PBS à 2 mg/ml.
3. 5×G250 bien mélanger avant utilisation. 1ml 5×G250 dilué avec 4 ml ddH2O. 1La solution ×G250 peut économiser une semaine à 4 ℃.
4. Ajouter les réactifs selon le tableau suivant (chaque puits 5ml, le surplus sert à nettoyer la cuvette)

5. Mesurer la valeur OD après 3 minutes de réaction. Pour garantir l’exactitude de l’expérience, mesurer la valeur OD tous les 2 minutes

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