Triglycéride Solarbio (TG) Kit d'analyse de contenu

Triglycéride(TG) Kit d'analyse de contenu

Note: Prenez deux ou trois échantillons différents pour la prédiction avant le test.

Équipement d'exploitation: Lecteur de microplaques/Spectrophotomètre

Numéro de catalogue: BC0625

Taille:100T/96S

Composants:

Réactif I: Réactif fourni soi-même, ajouter 80 mL de n-heptane et 80 mL d'alcool isopropylique dans une bouteille en verre vide. Fermer et bien mélanger, stockage à 4℃.

Réactif II: 3 mL×1 bouteille. Stockage à 4℃.

Réactif III: 10 mL×1 bouteille. Stockage à 4℃.

Réactif IV: 3 mL×1 bouteille. Stockage à 4℃, protégé de la lumière. Réactif V: 10 mL×1 bouteille. Stockage à 4℃, protégé de la lumière. Réactif VI: 10 mL×1 bouteille. Stockage à 4℃, protégé de la lumière.

Standard: poudre ×1 bouteille, ajouter 5 mL de Réactif I avant utilisation. 1 mg/mL de solution étalon de triglycérides, stockage à 4℃.

Description du produit:

Triglycéride(TG) est une molécule de graisse formée d'acides gras à longue chaîne et de glycérol, qui n'est pas seulement le composant principal de la membrane cellulaire, mais aussi un substrat respiratoire important. Le TG est extrait avec de l'alcool isopropylique, puis hydrolyse en glycérol et acides gras après saponification des TG par KOH. Le glycérol est oxydé par l'acide périodique pour former du formaldéhyde. Condensation du formaldéhyde et de l'acétylacétone pour former des composants jaunes en présence d'ions chlorure. Le composant jaune a une absorption caractéristique à 420 nm et proportionnel à la teneur en TG.

Réactifs et équipements requis mais non fournis:

Spectrophotomètre/lecteur de microplaques, cuvette en verre micro/plaque à fond plat de 96 puits, n-heptane, alcool isopropylique, bain d'eau, pipette réglable, de l'eau distillée et 125 mL de bouteille vide.

Procédure:

je. La préparation des échantillons:

• Tissu:

L'homogénéité du bain de glace est réalisée en fonction du rapport de la masse tissulaire (g): Réactif Ⅰ volume (ml) = 1: 5~10 (il est suggéré de prendre environ 0.1 g de mouchoir et ajouter 1 mL de réactif I). Centrifuger à 8000 g pour 10 minutes à 4℃, le surnageant est utilisé pour le test.

• Bactéries:

Collecter 5 millions de cellules ou de bactéries dans le tube à centrifuger, puis jetez le surnageant, ajout final 1 mL de réactif I. Diviser des bactéries ou des cellules avec des ultrasons pour 1 minute (pouvoir 20%, temps de travail 2s, intervalle 1s). Centrifuger à 8000 g pour 10 minutes à 4℃, le surnageant est utilisé pour le test.

• Sérum: Détecter

II. Procédure:

1. Spectrophotomètre de préchauffage pour 30 minutes, ajuster la longueur d'onde à 420 nm, mettre à zéro avec de l'eau distillée.
2. Préchauffer le bain-marie à 65 ℃.

3. Détecter le contenu TG:

Après refroidissement, transférer le liquide du tube EP vers une microcuvette en verre/une plaque à fond plat de 96 puits, et déterminer l'absorbance à 420 nm.

Note: Le tube vierge et le tube standard ne doivent être mesurés qu'une seule fois.

III. Calcul:

1) Sérum:

TG(mg/dL)= C ×(À- UN B)÷(COMME- UN B)×100 =(À- UN B)÷(COMME- UN B)×100

2) Tissu:

Concentration en protéines:

TG(mg/mg prot)= C×V×(À- UN B)÷(COMME- UN B) ÷(Cpr×V)=(À- UN B)÷(COMME- UN B) ÷Cpr

Poids de l'échantillon:

TG(mg/g) = C×V×(À- UN B)÷(COMME- UN B) ÷W=(À- UN B)÷(COMME- UN B) ÷W

3 ) Des bactéries ou cellules:

TG(Cellule U/104) = C ×(À- UN B)÷(COMME- UN B) ÷D=(À- UN B)÷(COMME- UN B) ÷D 1dL =100 mL;

V: Le volume de réactif1, 1 ml;

C: Concentration standard, 1 mg/ml;

Cpr: Concentration de protéines de l'échantillon (mg/ml); W: Poids de l'échantillon(g);

D: Densité de bactéries ou de cellules, 104 cellule/mL.

Note:

1. Il y a des substances volatiles dans le kit. Des gants et des masques doivent être portés pendant l'expérience. Le bouchon du flacon de réactif doit être fermé à temps après
2. Après l'ajout du réactif Ⅱ, il est nécessaire de vibrer de manière répétée et violente, afin que le triglycéride dans la solution d'essai puisse être entièrement extrait, et l'amplitude des oscillations, temps, des fois répétées et l'attente du temps de stratification doivent être
3. Afin de garantir la répétabilité du test, le temps de refroidissement après chaque bain-marie doit être
4. Si la valeur OD du tube à essai est supérieure à 1.5, il est recommandé de diluer correctement l'échantillon avec le réactif I avant de tester, et multipliez-le par le multiple de dilution correspondant lors du calcul.

Les références

• Fletcher M J. Une méthode colorimétrique pour estimer les triglycérides sériques[J.]. Clinique Chimique Acta, 1968, 22(3): 393-397.
• Hercule D M, Sheehan T L. Dosage par chimiluminescence du glycérol sérique et des triglycérides[J.]. Chimie analytique, 1978, 50(1):22-25.

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Spécifications techniques:

La limite de détection: 0.0372 mg/ml

Plage linéaire: 0.0625-3 mg/ml