Uvod
Sustav HiPure Midi omogućuje brzu, jednostavan, and cost-effective plasmid DNA midiprep method for routine molecular biology laboratory applications. HiPure Midiprep setovi koriste tehnologiju membrane od silicijevog dioksida kako bi eliminirali glomazne korake povezane s labavim smolama ili kašama. Plazmidna DNK pročišćena Mini Kitovima odmah je spremna za upotrebu. Ekstrakcija fenolom i taloženje etanolom nisu potrebni, a plazmidna DNA visoke kvalitete eluira se u malom volumenu Tris pufera ili vode.
pojedinosti
Tehnički podaci
| Značajke | Tehnički podaci |
| Glavne funkcije | Izolacija do 500 µg plazmidne DNA bez endotoksina iz 25-50 ml bakterijske kulture |
| Prijave | Transfekcija stanica, injekcija životinja, itd. |
| Metoda pročišćavanja | Midi spin column |
| Tehnologija pročišćavanja | Silika tehnologija |
| Procesna metoda | Priručnik (centrifugiranje ili vakuum) |
| Vrsta uzorka | Konvencionalni plazmid, plazmid manji od 30KB |
| Količina uzorka | 25-50ml |
| Prinos | 10-500μg |
| Volumen eluacije | ≥0,4 ml |
| Vrijeme po vožnji | ≤60 minuta |
| Nosivi volumen tekućine po stupcu | 4ml |
| Prinos vezivanja kolone | 250μg |
Načelo
HiPure Plasmid postupak temelji se na alkalnoj lizi bakterijskih stanica nakon čega slijedi adsorpcija DNA na siliciju u prisutnosti visoke soli. Jedinstvena membrana od silicijevog dioksida koja se koristi u kompletu u potpunosti zamjenjuje staklene ili silikatne kaše za minipreparacije plazmidne DNK. Postupak se sastoji od 3 osnovni koraci: Priprema i čišćenje bakterijskog lizata alkalnom metodom，zatim prenesite supernatant u kolonu za vezanje DNA. Nakon pranja proteina i drugih nečistoća, nukleinska kiselina je konačno eluirana s puferom s malo soli (10mm Tris, pH 9,0, 0.5mm EDTA).
Prednosti
- Visoka čistoća – pročišćeni plazmid može se izravno koristiti u sekvenciranju, enzimska probava i PCR, itd.
- Brzo – pročišćavanje stupca silika gela puno je brže od ionske izmjene
- Visok prinos – u jednu kolonu može se vezati do 250μg plazmida
- Nizak sadržaj endotoksina – dobiveni plazmid može se izravno koristiti u transfekciji stanica i injekciji životinjama
Sadržaj kompleta
| Sadržaj | P123102 | P123102B |
| Vremena pročišćavanja | 50 Pripreme | 50 Pripreme |
| RNaza A | 30 mg | 30 mg |
| Međuspremnik E1 | 150 ml | 150 ml |
| Međuspremnik E2 | 150 ml | 150 ml |
| Međuspremnik E3 | 150 ml | 150 ml |
| Međuspremnik E4 | 150 ml | 150 ml |
| Međuspremnik E5 | 150 ml | 150 ml |
| Međuspremnik PW2* | 50 ml | 50 ml |
| Elucijski pufer | 30 ml | 30 ml |
| MaxPure EF Mini kolona | 50 | 50 |
| 2 ml cijevi za prikupljanje | 50 | 50 |
| Lysate Clear Midi štrcaljka | 50 | 50 |
| Proširite cijevi | 50 | 50 |
| 50ml epruvete za centrifugu | 50 | |
| Potporne cijevi | 50 |
Skladištenje i stabilnost
Komponente kompleta mogu se čuvati na suhom na sobnoj temperaturi (15-25°C) i stabilni su najmanje 18 mjeseci pod ovim uvjetima. Ako se u puferima stvori bilo kakav talog, zagrijte na 37 ℃ da se otopi. Nakon dodatka RNaze A i izbornog reagensa LyseBlue, Međuspremnik P1 je stabilan za 6 mjeseca ako se čuva na 2–8°C.
Vodič za kupnju
| Ime | MAČKA BR | Količina uzorka | Vrsta stupca | Volumen eluacije | Prinos | Vrijeme po vožnji | Zahtjevi za centrifugu |
| HiPure Plasmid EF Mini Kit | P1154 | 10-15ml | 1.5ml stupca | ≥75μl | 10–70µg/15 ml | ≤40 minuta | mala centrifuga |
| HiPure plazmid EF 96 Kit | P1157 | 1-5ml | 96 bunar ploča | ≥75μl | 30µg/1 ml | ≤60 minuta | 96 well plate centrifuge |
| HiPure Plasmid EF Midi Kit | P1231 | 30-50ml | 15ml stupca | ≥0,4 ml | 10-500μg/50 ml | ≤60 minuta | 15ml centrifuga |
| HiPure Plasmid EF Maxi Kit | P1156 | 100-200ml | 50ml stupca | ≥0,8 ml | 100–1500µg/200ml | ≤60 minuta | 50ml centrifuga |
| HiPure Plasmid EF Mega Kit | P1116 | 500ml | 50ml stupca | ≥0,8 ml | 10mg/500 ml | ≤70 minuta | 50ml centrifuga |
Recenzije
Još nema recenzija.