1. Komponen kit reagen
| Spesifikasi | 50T | 100T |
| Kucing. TIDAK. | SN0233 | SN0234 |
| Kolom Ekstraksi DNA (mengatur) | 50 (mengatur) | 100 (mengatur) |
| Penyangga Reagen B | 20 ml | 2×20 ml |
| Buffer Reagen C | 30 ml | 2×30 ml |
| Cuci Buffer 1 | 15 ml | 2 × 15 ml |
| Penyangga Elusi | 20 ml | 20 ml |
| Proteinase K | 1ml | 1ml |
| RNase A | 1ml | 1ml |
| Instruksi manual | 1 | 1 |
2. Penyimpanan
Kit reagen ini harus disimpan pada suhu kamar (15-25℃) dan dalam kondisi kering, dengan umur simpan 12 bulan. Kolom pemurnian ekstraksi DNA dapat disimpan 1 tahun di lingkungan sejuk dan kering. Proteinase K dan RNase A mengandung bahan pengawet, memungkinkan transportasi pada suhu kamar, tapi untuk penyimpanan jangka panjang, mereka harus disimpan pada -20℃.
3. Petunjuk Penggunaan Kit Reagen
3.1 Kit reagen ini ditujukan untuk penelitian biologi molekuler dan tidak boleh digunakan untuk diagnosis atau pengobatan penyakit.
3.2 Beberapa komponen dalam kit reagen mengandung bahan iritan. Tindakan perlindungan seperti mengenakan pakaian pelindung dan kacamata direkomendasikan.
3.3 Selama penggunaan kit reagen ini, mesin sentrifugal berkecepatan tinggi, mandi air (mandi logam), pencampur pusaran, etanol anhidrat, air deionisasi steril, dan tabung EP perlu disiapkan oleh pengguna.
4. Pengantar Kit Reagen
The Oral Swab Pemurnian DNA Kit provides a rapid and efficient method for purifying DNA from oral swabs, widely used for the extraction of epithelial cells such as oral epithelium.
The Oral Swab DNA Rapid Purification Kit can extract total DNA from oral epithelial cells within 30 menit. The entire purification process does not require toxic reagents such as phenol-chloroform. DNA yang diekstraksi dapat langsung digunakan untuk PCR, Blot Selatan, dan aplikasi lainnya.
5. Prinsip dan Prosedur Eksperimental
6. Proses Ekstraksi
Sebelum Memulai Eksperimen:
A. Reagent Buffer B and C dapat mengendap pada kondisi suhu rendah. We recommend heating at 65℃for 5 menit. After the precipitate dissolves, it can be used normally.
B. Sebelum digunakan, add the specified amount of anhydrous ethanol to Cuci Buffer 1as indicated on the bottle label. Mark a check on the label to indicate the addition of anhydrous ethanol.
C. Buffer Elusi adalah a0.1x solusi TEcontaining minimal amounts of EDTA. Jika EDTA mungkin mempengaruhi percobaan selanjutnya, it is advisable to substitute Elution Buffer with sterile deionized water.
- Penanganan Sampel:
- Sampling: Take a sterilized cotton swab, insert it into the mouth, rub against the inner cheek back and forth for more than 20 waktu.
- Use scissors to cut the head of the cotton swab, place it into a 2 ml tabung sentrifugasi, and add 400μl dari Reagen Buffer B.
- Menambahkan10μl Proteinase K (10 mg/ml) and 10μl RNase A (10 mg/ml), invert thoroughly, incubate at 65°C for 20 menit, vortex for 10 seconds during incubation.
- Menambahkan 400μl dari Reagen Buffer Cke lisat, vortex thoroughly.
- Menambahkan 200μl of pre-chilled absolute ethanol, campur dengan baik; precipitation may occur, tapi itu tidak akan mempengaruhi percobaan selanjutnya.
- Transfer the obtained liquid into a DNA extraction and purification column (perlengkapan) (sekitar 650~700μl setiap kali), sentrifugasi di >8,000 rpm untuk 1 menit, discard the collected waste liquid, and reinsert the collection tube into the DNA extraction and purification column (perlengkapan) untuk langkah selanjutnya.
- Place the DNA extraction and purification column (perlengkapan) ke dalam tabung koleksi, menambahkan 300μl Buffer Cuci 1, sentrifugasi di >8,000 rpm untuk 1 menit, discard the waste liquid, and reinsert the DNA extraction and purification column (perlengkapan) ke dalam tabung untuk langkah selanjutnya.
(Catatan: Ensure that absolute ethanol has been added to Wash Buffer 1.)
- Menambahkan 500μl Buffer Cuci 1to the DNA extraction and purification column (perlengkapan), sentrifugasi di 14,000 rpm (20,000×g) untuk 2 menit, extend the centrifugation time appropriately to dry the membrane further.
- Place the DNA extraction and purification column (perlengkapan) ke dalam tabung centrifuge yang baru, open the lid, incubate at 65°C for 2 menit; this step can be extended appropriately to evaporate ethanol as much as possible, preventing residual ethanol from affecting downstream experiments.
- Elute 100μl Buffer Elusike membran, sentrifugasi di 12,000 rpm untuk 2 menit.
(Catatan: 1. Eluting DNA with 50μl of Elution Buffer can increase DNA concentration but decrease total DNA yield; 2. Eluted DNA in the eluate can be reapplied to the DNA extraction and purification column, centrifuge again at 12,000 rpm untuk 2 minutes to increase DNA yield.)
Ulasan
Belum ada ulasan.