Kucing No.: PC0015
Ukuran: 50T
Penyimpanan: Pelestarian segel setelah dibuka, kit ini sejak tanggal pemesanan berlaku selama sembilan bulan.
Keterangan
Pewarna Coomassie G-250 adalah reagen kolorimetri yang digunakan untuk mendeteksi dan menghitung total protein. Dalam media asam pewarna Coomassie mengikat protein menyebabkan pergeseran maksimum serapan langsung dari 465nm ke 595nm disertai perubahan warna dari hijau menjadi biru. Dalam rentang konsentrasi tertentu, nilai serapan A595 yang diukur berbanding lurus dengan konsentrasi protein.
Protokol
- Pelat mikroPembaca
- Larutkan sepenuhnya standar BSA, encerkan 10ul menjadi 250ul, konsentrasi akhir 0,2mg/ml. Buffer pengenceran tergantung pada sampel protein yang diukur. Demi kesederhanaan, disarankan untuk menggunakan NaCl 0,9% atau PBS.
- 5×G250aduk rata sebelum 1ml 5×G250 diencerkan dengan 4ml ddH2O. 1×Solusi G250 dapat menghemat satu minggu pada suhu 4℃.
- Standar menurut 0, 2, 4, 6, 8, 12, 16, dan 20ul masing-masing ditambahkan ke pelat 96well, dan pengenceran PBS sebagai pelengkap.
- Encerkan sampel(siapkan beberapa gradien, seperti 2 waktu, 4 waktu, 8 kali pengenceran), dan tambahkan 20ul sampel ke 96 Sehat. Untuk menghindari kesalahan, titik sampel perlu ditetapkan setelah garis standar 1/2.
- Tambahkan 200ul encer 1×G250 ke setiap sumur, suhu kamar untuk 3-5 menit.
- Penentuan serapan.
- Menurut kurva standar, hitung protein sampel
- UV-VisSpektrofotometer
- 8*10ml tabung sentrifugasi(atau lebih) dan diberi label dengan1~8.
- Encerkan 100ul BSA dengan 2,4ml PBS menjadi 2mg/ml.
- 5×G250 aduk rata sebelum digunakan. 1ml 5×G250 diencerkan dengan 4ml ddH2O. 1×Solusi G250 dapat menghemat satu minggu pada suhu 4℃.
- Tambahkan reagen sesuai tabel berikut (masing-masing sumur 5ml, kelebihannya digunakan untuk membersihkan kuvet)
PBS | 500jalan | 400jalan | 300jalan | 200jalan | 100jalan | 0jalan | 0jalan | 0jalan | 0jalan |
1×G250 | 5ml | 5ml | 5ml | 5ml | 5ml | 5ml | 5ml | 5ml | 5ml |
- Ukur nilai OD setelahnya 3 menit reaksi. Untuk memastikan keakuratan percobaan, mengukur nilai OD setiap 2 menit
Tabung | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 | 8 | ...... |
Solusi Noda(menit) | 0 | 2 | 4 | 6 | 8 | 10 | 12 | 14 | ...... |
nilai OD | 3 | 5 | 7 | 9 | 11 | 13 | 15 | 17 | ...... |
Produk-produk terkait:
Larutan standar protein PC0001 (5mg/ml BSA) Reagen BCA PC0021
PC0030 Kit Uji Protein Lowry PC0020 Protein BCA Penyangga RIPA Kit Uji Uji R0010(tinggi)
PR1600 Penanda Protein Tertahan(14.4kD-97.4kD) Kit Ekstraksi Protein Nuklir R0050
Makalah Terkait:
- Zhongyuan Li,Xiumei Li,Tianhui Liu,dkk. Peran penting residu permukaan yang terbuka untuk termostabilitas dan halotoleransi xilanase GH11 baru dari perpustakaan metagenomik tanah salin-basa. Jurnal Internasional Makromolecu Biologi Les. Juli 2019;133:316-323. (JIKA784)
- Qinlu Zhang,Qian Liu,Menghan Du,dkk. Cetuximab dan Doxorubicin memuat nanopartikel magnetik Fe3O4 berlapis dekstran sebagai nanocarrier bertarget baru untuk kanker paru-paru non-sel kecil. Jurnal Magnetisme dan Bahan Magnetik. Juni 2018. (JIKA046)
Ulasan
Belum ada ulasan.