Ribulose 1, 5-bisphosphate carboxylase/oxygenase(Rubisco) Assay Kit

Solarbio Ribulosa 1 5-bifosfat karboksilase/oksigenase (Rubisco) Perangkat Pengujian

Name: Solarbio Ribulose 1 5-bisphosphate carboxylase/oxygenase (Rubisco) Assay Kit
SKU: 5393
Availability: InStock

$474.00 – $740.00

Pengiriman Rp 45 - Gratis lebih dari USD 300

DTE adalah platform e-niaga berbasis di Tiongkok yang mengkhususkan diri dalam penjualan pengujian molekuler secara online, ELISA, dan produk terkait.

Pabrikan: Merek Cina terkemuka
Pengiriman: Pengiriman FedEx yang dipercepat langsung dari pabrik
Memenuhi syarat untuk pengembalian atau penggantian dalam waktu 30 hari
cara Pembayaran: Amankan PayPal atau kartu kredit.

Deskripsi

Catatan: Ambil dua atau tiga sampel berbeda untuk prediksi sebelum pengujian.

Peralatan Operasi: Spektrofotometer

Kucing No: BC0440

Ukuran:50T/48S

Komponen:

Reagen	Spesifikasi	Kondisi penyimpanan	Persiapan Sebelum Digunakan
Ekstrak Solusi	50 mL × 1	4℃	–
Reagen I	50 mL × 1	4℃	–
Reagen II	Bubuk × 1	-20℃	–
Reagen III	Bubuk × 2	-20℃	Larutkan dengan 1 mL air suling sebelum digunakan; Jika kekeruhan muncul setelah osilasi, sentrifugasi sebelum digunakan.
Reagen IV	Bubuk × 1	-20℃	Larutkan dengan 2 mL air suling sebelum digunakan.
Solusi Kerja	–	–	Tambahkan semua Reagen I ke Reagen II sebelum digunakan, aduk rata, dan inkubasi pada suhu 25℃ selama 5 menit.

Deskripsi Produk:

Ribulosa 1,5-bifosfat karboksilase/oksigenase (Rubisco) merupakan enzim kunci dalam fotosintesis tanaman.
Ia mengontrol fiksasi karbon dioksida dan mengatur aliran karbon ke dalam siklus Calvin dan siklus fotorespirasi.
Aktivitas Rubisco secara langsung mempengaruhi laju fotosintesis.
Rubisco mengkatalisis kombinasi ribulosa-1,5-difosfat (RuBP) dan karbon dioksida untuk menghasilkan 3-fosfogliserat (PGA).
PGA selanjutnya diubah menjadi gliseraldehida-3-fosfat, disertai dengan oksidasi NADH membentuk NAD+.
NADH menyerap cahaya pada 340 nm, sedangkan NAD+ tidak.
Dalam paket ini, Aktivitas rubisco ditentukan dengan mengukur penurunan serapan NADH pada 340 nm.

Reagen dan Peralatan Diperlukan tetapi Tidak Disediakan:

Spektrofotometer ultraviolet, mesin sentrifugal meja, pipet yang dapat disesuaikan, mandi air, 1 mL kuvet kuarsa, mortir/homogenizer, Es, air suling.

Prosedur:

Persiapan Sampel:

- Bakteri atau Sel:
  - Kumpulkan bakteri atau sel ke dalam tabung centrifuge dan centrifuge untuk membuang supernatan.
  - Menambahkan 1 mL larutan Ekstrak ke 5 juta bakteri atau sel.
  - Gunakan ultrasonikasi (di atas es, 20% kekuatan, 3 detik menyala, 10 detik libur, ulang 30 waktu) untuk melisiskan bakteri atau sel.
  - Sentrifugasi di 10000 ×g untuk 10 menit pada suhu 4°C untuk menghilangkan bahan yang tidak larut dan mengumpulkan supernatan di atas es untuk pengujian.
- Jaringan:
  - Menambahkan 1 mL larutan Ekstrak ke 0.1 g tisu (sebaiknya sampel tanaman segar) dan homogenkan di atas es.
  - Sentrifugasi di 10000 ×g untuk 10 menit pada suhu 4°C untuk menghilangkan bahan yang tidak larut, dan kumpulkan supernatan di atas es untuk pengujian.

Prosedur Penetapan:

- - - Panaskan terlebih dahulu spektrofotometer UV untuk 30 menit dan sesuaikan panjang gelombangnya menjadi 340 nm. Nolkan instrumen dengan air suling.
    - Tambahkan reagen berikut:

Reagen (μL)	Tabung reaksi (T)	Tabung kosong (B)
Sampel	100	–
air suling	–	100
Reagen III	35	35
Reagen IV	35	35
Solusi kerja	900	900

Deteksi serapan pada 340 nm pada waktu 20an dan 5 menit20an, rekam sebagai A1 dan A2 masing-masing. ΔA(T)=A2(T)-A1(T), ΔA(B)=A2(B)-A1(B), ΔA=ΔA(T)-ΔA(B). Disimpan pada suhu 25℃ selama reaksi. Tabung kosong hanya perlu diuji satu atau dua kali.

Perhitungan:

Konsentrasi Protein:

- Definisi Satuan: Satu unit aktivitas enzim didefinisikan sebagai jumlah enzim yang mengkatalisis produksi 1 nmol NADH per menit untuk setiap miligram protein.
- Rubisco (U/mg keuntungan) Perhitungan:
  - Rubisco(U/mg keuntungan) = [ΔA (×d) × 10^9 × Tali] − (Vs × Cpr) − T
  - Rubisco(U/mg keuntungan) = 344 × ΔA − Cpr

Berat Sampel:

- Definisi Satuan: Satu unit aktivitas enzim didefinisikan sebagai jumlah enzim yang mengkatalisis produksi 1 nmol NADH per menit untuk setiap gram jaringan.
- Rubisco (berat U/g) Perhitungan:
  - Rubisco(berat U/g) = [ΔA (×d) × 10^9 × Tali] − (W − Ve × Vs) − T
  - Rubisco(berat U/g) = 344 × ΔA Mbps W

Bakteri atau Sel yang Dikultur:

- Definisi Satuan: Satu unit aktivitas enzim didefinisikan sebagai jumlah enzim yang mengkatalisis produksi 1 nmol NADH per menit untuk setiap 10,000 sel atau bakteri.
- Rubisco (U/10^4 sel) Perhitungan:
  - Rubisco(U/10^4 sel) = [ΔA (×d) × 10^9 × Tali] − (Vs − Ve × 500) − T
  - Rubisco(U/10^4 sel) = 0.69 ×ΔA

Konstanta dan Parameter:

e: Koefisien kepunahan molar NADH, 6.22 × 10^3 L/mol/cm
D: Jalur cahaya kuvet, 1 cm
Tali: Volume reaksi total, 1.07 × 10^-3 L
Vs: Volume supernatan, 0.1 ml
Ve: Ekstrak larutan menambah volume, 1 ml
Cpr: Konsentrasi protein sampel (mg/mL)
T: Waktu reaksi, 5 menit
W: Berat sampel (G)
500: 5 juta sel atau bakteri
10^9: 1 mol = 10^9 nmol

Contoh eksperimental:

Ambil 0,1g daun tanaman, menambahkan 1 mL larutan Ekstrak untuk homogenisasi, ambil supernatannya, dan kemudian beroperasi sesuai dengan langkah penentuan.

Ukur dengan kuvet mikro kuarsa dan hitung

ΔAT= AT1-AT2=1,279-1,206=0,073, ΔAB=AB1–AB2=0,834-0,823=0,011,

ΔA= ΔAT -ΔAB=0,073-0,011=0,062

Aktivitas Rubisco (massa U/g) = 344 × ΔA ÷ W =344×0,062±0,1=213,28 U/g massa.

Produk-produk terkait:

BC0310/BC0315 Koenzim DAN MENDATANG(H) Kit Pengujian Konten

BC1030/BC1035 NAD Kinase (NADK) Kit Uji Aktivitas

BC0630/BC0635 NADH Oksidase (TIDAK) Kit Uji Aktivitas

Enzim Malik BC1130/BC1135 NAD (NAD-AKU) Kit Uji Aktivitas

Informasi Tambahan

ukuran	25T, 50T

Ulasan (0)

Ulasan

Belum ada ulasan.

Jadilah yang pertama memberikan ulasan “Solarbio Ribulosa 1 5-bifosfat karboksilase/oksigenase (Rubisco) Perangkat Pengujian”