introduzione
Hipure viral RNA kit is suitable for purifying viral RNA from samples such as cell-free body fluid or culture medium. The kit is based on silica gel column purification technology. It requires no toxic phenol chloroform extraction and time-consuming alcohol precipitation in the extraction. The whole extraction process takes only 25 minuti. The kit is suitable for extracting viral RNA from 1-140µl cell-free fluid samples such as serum, plasma, cell-free body fluid or culture medium. The product has successfully extracted hepatitis B A/C, hepatitis C RNA, SARS and HIV. The obtained RNA can be directly used for RT-PCR, Northern hybridization and virus detection.
Dettagli
Specifiche
| Caratteristiche | Specifiche |
| Funzioni principali | Extract viral RNA from 140μl cell-free samples |
| Applicazioni | RT-PCR, Northern hybridization, and various virus detection |
| Metodo di purificazione | Mini colonna rotante |
| Tecnologia di purificazione | Tecnologia della silice |
| Metodo di processo | Manuale (centrifugazione o vuoto) |
| Tipo di campione | Cell-free body fluid or culture medium |
| Importo del campione | 140ml |
| Volume di eluizione | ≥15μ |
| Tempo per corsa | ≤25 minutes |
| Volume di trasporto del liquido per colonna | 800ml |
| Resa legante della colonna | 100μg |
Principio
Hipure silica gel column is based on glass fiber filter membrane with high binding force. Under the condition of high concentration of ionizing agent (ad esempio guanidina cloridrato o isotiocianato di guanidina), the filter membrane can adsorb nucleic acid through hydrogen bond and electrostatic, mentre le proteine e altre impurità non vengono adsorbite e rimosse. La membrana filtrante adsorbita con acido nucleico viene lavata per rimuovere la proteina residua e il sale. Finalmente, l'acido nucleico adsorbito sulla membrana del filtro può essere lavato via con un tampone a basso contenuto di sale (come il tampone TE) o acqua. L'acido nucleico ottenuto ha un'elevata purezza e può essere utilizzato direttamente in vari esperimenti a valle.
The sample is homogenized and lysed in the lysate, and RNA is released into the lysate. The high concentration of guanidine isothiocyanate contained in the lysate denatured and inactivated endogenous or exogenous RNase, while RNA is protected from degradation. The lysate is centrifuged to remove insoluble impurities. After adding ethanol to adjust the binding conditions, it is transferred to the column for filtration. RNA is adsorbed on the membrane of the column, while protein is removed without adsorption. The column is washed with buffer VHB to remove protein and other impurities, washed with buffer RW2 to remove salt. Finally the RNA is eluted by RNase free water. The eluted RNA can be directly used in RT-PCR, Northern blot, poly-A purification, in vitro translation, eccetera.
Vantaggi
- Veloce – possono essere estratti diversi campioni 20 minutes by column method
- Alta qualità – L'RNA totale ad elevata purezza può essere utilizzato direttamente in varie applicazioni sensibili a valle
- Sicuro – no phenol chloroform extraction required
- Sensibile – RNA can be recovered at the level of PG
- High yield – carrier RNA contained in the product maximize the recovery of trace nucleic acid
Contenuto del kit
| Contenuti | R417102 | R417103 |
| Tempi di purificazione | 50 Preparativi | 250 Preparativi |
| HiPure Viral Micro Columns | 50 | 250 |
| 2ml Provette di raccolta | 100 | 500 |
| Buffer VRL | 50 ml | 200 ml |
| Carrier RNA | 310 mg | 3 X 310 mg |
| Buffer VHB* | 13 ml | 110 ml |
| Buffer RW2* | 20 ml | 2 X 50 ml |
| Nuclease Free Water | 10 ml | 30 ml |
Conservazione e stabilità
Carrier RNA should be stored at 2–8°C upon arrival. Tuttavia, conservazione a breve termine (fino a 12 settimane) a temperatura ambiente (15–25°C) non influisce sulle loro prestazioni. I restanti componenti del kit possono essere conservati a temperatura ambiente (15–25°C) e sono stabili almeno per 18 months under theseconditions
Recensioni
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