Codice articolo: BC0685
Specifica: 100 Test/48 strisce
introduzione
- La lattato deidrogenasi (LDH) Il kit di analisi dell'attività quantifica l'attività degli enzimi LDH nei campioni biologici.
- LDH è cruciale nella respirazione cellulare, convertendo il lattato in piruvato.
- Livelli elevati di LDH nei tessuti o nei fluidi corporei possono indicare danni o patologie cellulari.
- Il test viene utilizzato nei laboratori clinici e di ricerca per scopi diagnostici e sperimentali.
Contenuto
Componenti chiave del kit di analisi dell'attività LDH:
- Soluzione substrato: Contiene i componenti necessari per la reazione enzimatica, tipicamente includendo lattato e NAD^+ (nicotinammide adenina dinucleotide).
- Tampone di reazione: Fornisce le condizioni ottimali per la reazione enzimatica.
- Standard enzimatico LDH: Uno standard di riferimento con una concentrazione nota di attività LDH per la generazione di una curva standard.
- Reagente del dosaggio LDH: Un reagente colorimetrico o fluorimetrico che rileva il prodotto della reazione LDH, spesso portando ad un cambiamento di colore o fluorescenza.
Come utilizzare il kit di analisi dell'attività LDH:
Quella che segue è una guida generale su come utilizzare un kit di analisi dell'attività LDH. I protocolli specifici possono variare tra i kit, ed è fondamentale seguire le istruzioni fornite dal produttore del kit:
- Preparazione del campione: Prepara i tuoi campioni biologici (per esempio., lisati cellulari, il tessuto si omogeneizza, o fluidi corporei) e diluirli opportunamente in un tampone compatibile, se necessario.
- Preparazione della curva standard: Preparare una serie di standard con concentrazioni note di attività dell'enzima LDH utilizzando lo standard dell'enzima LDH fornito. Ciò si ottiene generalmente diluendo lo standard in un tampone o in una matrice del campione.
- Configurazione della piastra di analisi: Aggiungere i campioni e gli standard diluiti ai pozzetti di una micropiastra o di una cuvetta.
- Aggiunta della soluzione di substrato: Aggiungere la soluzione substrato a ciascun pozzetto o cuvetta contenente i campioni e gli standard. La reazione enzimatica convertirà il lattato in piruvato.
- Incubazione: Incubare la miscela di reazione per un periodo specificato, tipicamente a temperatura controllata. Si verificherà la reazione enzimatica, generando NADH (forma ridotta di NAD^+).
- Misurazione: Misurare l'assorbanza o la fluorescenza della miscela di reazione alla lunghezza d'onda appropriata utilizzando un lettore di micropiastre o un fluorimetro.
- Analisi dei dati: Utilizzare la curva standard per convertire i valori di assorbanza o fluorescenza in unità di attività dell'enzima LDH.
- Controllo di qualità: Controllare la precisione e l'accuratezza dei risultati assicurandosi che le prestazioni del test rientrino nell'intervallo accettabile.
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