導入
- 速い, 単純, and Cost-Effective: Offers a rapid, easy-to-use, and economical method for プラスミドDNA miniprep suitable for routine molecular biology applications.
- Silica Membrane Technology: Utilizes silica membrane technology, eliminating the need for cumbersome steps associated with loose resins or slurries, streamlining the purification process.
- Immediate Usability: Purified plasmid DNA is immediately ready for downstream applications, saving time and effort.
- No Phenol Extraction or Ethanol Precipitation: Bypasses the need for phenol extraction and ethanol precipitation, simplifying the workflow and reducing hands-on time.
- High-Quality DNA: Yields high-quality plasmid DNA eluted in a small volume of Tris buffer or water, ensuring optimal performance in downstream applications.
仕様
特徴 | 仕様 |
主な機能 | Isolation of up to 35μg plasmid DNA from 1-5ml bacterial culture |
アプリケーション | 酵素消化, 順序付け, PCR, cloning, 等. |
精製方法 | Mini スピンカラム |
精製技術 | シリカ技術 |
加工方法 | マニュアル (遠心分離または真空) |
サンプルの種類 | 従来のプラスミド, 30KB未満のプラスミド |
サンプル量 | High copy plasmid: 1-5ml culture medium Low copy number plasmid: 5-10ml culture medium |
収率 | 5-35μg |
溶出量 | ≥30μl |
実行あたりの時間 | Complete 1-24 samples in 30 分 |
カラムあたりの液体搬送量 | 800µl |
カラムの結合収量 | 35μg |
原理
- Alkaline Lysis: Begins with the alkaline lysis of bacterial cells, which breaks down the cell membrane and releases plasmid DNA into the lysate.
- Silica-Based DNA Binding: The released DNA is adsorbed onto the silica membrane in the presence of high salt, facilitating efficient binding of DNA to the membrane surface.
- Three Basic Steps: The procedure involves three main steps: (1) Preparation and clearing of the bacterial lysate using an alkaline method, (2) Transfer of the cleared lysate to a column for DNA binding, そして (3) Washing to remove proteins and other impurities.
- Silica Membrane: Utilizes a unique silica membrane in the kit, which completely replaces traditional glass or silica slurries typically used in plasmid DNA minipreps.
- Elution with Low-Salt Buffer: After washing to remove impurities, nucleic acid, including plasmid DNA, is eluted from the silica membrane using a low-salt buffer containing 10mM Tris, pH 9.0, and 0.5mM EDTA.
利点
- 高純度 – 精製されたプラスミドは配列決定に直接使用できます, enzyme digestion PCR, 等.
- 速い – それだけが必要です 1 minute to obtain supernatant by optimized solution (10 minutes for other brands)
- 高収量 – up to 35µg plasmid can be bound in one column
キット内容
コンテンツ | P100102 | P100103 |
浄化時間 | 100 準備 | 250 準備 |
RNase A | 5 mg | 10 mg |
バッファP1 | 30 ミリリットル | 80 ミリリットル |
バッファP2 | 30 ミリリットル | 80 ミリリットル |
Buffer P3 | 40 ミリリットル | 100 ミリリットル |
バッファPW1 | 60 ミリリットル | 140 ミリリットル |
Buffer PW2* | 20 ミリリットル | 50 ミリリットル |
溶出バッファー | 15 ミリリットル | 30 ミリリットル |
HiPure DNA Mini Columns II | 100 | 250 |
2 ml 採取管 | 100 | 250 |
保管と安定性
- Storage Conditions: Kit components can be stored dry at room temperature (15-25℃) and remain stable for a minimum of 18 この状況下で数か月.
- Buffer Precipitates: In case of any precipitates forming in the buffers, warm them at 37°C to dissolve effectively.
- Buffer P1 Stability: After the addition of RNase A, Buffer P1 remains stable for up to 6 2~8°Cで保管した場合、数か月.
実験データ
購入ガイド
名前 | カタログ番号 | サンプル量 | 列の種類 | 溶出量 | 収率 | 実行あたりの時間 | 遠心分離機の要件 |
HiPure プラスミド ミニ キット | P1001 | 1-5ミリリットル | 1.5mlカラム | 30-50μl | 5–35μg/5ml | 30分以内 | 小型遠心分離機 |
HiPure プラスミド ミニ キット II | P1002 | 5-15ミリリットル | 1.5mlカラム | 75-100μl | 20-80μg/15ml | 30分以内 | 小型遠心分離機 |
HiPure プラスミド プラス 96 キット | P1006 | 1-1.5ミリリットル | 96 ウェルプレート | 70-150μl | 1-15μg/1ml | 60分以内 | 96-ウェルプレート遠心分離機 |
HiPure Fastfilter プラスミド Midi キット | P1013 | 30-50ミリリットル | 15mlカラム | 0.3-0.8ミリリットル | 50–250μg/50ml | 60分以内 | 15ml遠心分離機 |
HiPure Fastfilter Plasmid Maxi キット | P1014 | 100-200ミリリットル | 50mlカラム | 0.5-1.5ミリリットル | 0.4–1mg/200ml | 60分以内 | 50ml遠心分離機 |
レビュー
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