ソーラーバイオトリグリセリド (TG) コンテンツアッセイキット

中性脂肪(TG) コンテンツアッセイキット

注記: テスト前に予測のために 2 つまたは 3 つの異なるサンプルを取得します.

操作装置: マイクロプレートリーダー/分光光度計

カタログ番号: BC0625

サイズ:100T/96S

コンポーネント:

試薬I: 自前試薬, 追加 80 mLのn-ヘプタンと 80 空のガラス瓶にイソプロピルアルコール mL. 密閉してよく混ぜる, 4℃で保存.

試薬II: 3 mL×1本. 4℃で保存.

試薬Ⅲ: 10 mL×1本. 4℃で保存.

試薬IV: 3 mL×1本. 4℃で保存, 光から守られる. 試薬V: 10 mL×1本. 4℃で保存, 光から守られる. 試薬VI: 10 mL×1本. 4℃で保存, 光から守られる.

標準: 粉末×1本, 追加 5 使用前の試薬 I mL. 1 mg/mL 中性脂肪標準液, 4℃で保存.

製品説明:

中性脂肪(TG) 長鎖脂肪酸とグリセロールによって形成される脂肪分子です。, 細胞膜の主成分であるだけでなく、, だけでなく重要な呼吸基質でもあります. TGはイソプロピルアルコールで抽出されます, KOHによるTGのけん化後、グリセロールと脂肪酸に加水分解. グリセロールは過ヨウ素酸によって酸化されてホルムアルデヒドが生成されます。. 塩化物イオンの存在下でホルムアルデヒドとアセチルアセトンが縮合して黄色の成分を形成する. 黄色の成分は、次のような特徴的な吸収を持っています。 420 nm、TG含有量に比例.

必要だが提供されていない試薬と装置:

分光光度計/マイクロプレートリーダー, マイクロガラスキュベット/96ウェル平底プレート, n-ヘプタン, イソプロピルアルコール, 水浴, 調整可能なピペット, 蒸留水と 125 空のボトル ​​mL.

手順:

私. サンプルの準備:

• 組織:

氷浴の均一性は組織質量の比率に従って行われます。 (g): 試薬Ⅰの量 (mL) = 1: 5~10 (およそ摂取することをお勧めします 0.1 ティッシュ1gを加えて 1 試薬I mL). で遠心分離します。 8000 グラムのための 10 4℃で5分, 上清は試験に使用されます.

• 細菌:

集める 5 数百万の細胞または細菌を遠心分離管に入れる, その後上清を捨てます, 最終追加 1 試薬I mL. 超音波で細菌や細胞を分裂させる 1 分 (力 20%, 作業時間2秒, 間隔1秒). で遠心分離します。 8000 グラムのための 10 4℃で5分, 上清は試験に使用されます.

• 血清: 検出する

Ⅱ. 手順:

1. 予熱用分光光度計 30 分, 波長を調整して 420 nm, 蒸留水でゼロを設定する.
2. ウォーターバスを65℃に予熱します.

3. TG コンテンツの検出:

冷却後, EP チューブからマイクロガラスキュベット/96 ウェル平底プレートに液体を移します。, で吸光度を測定します。 420 nm.

注記: ブランクチューブと標準チューブの測定は 1 回だけで済みます.

Ⅲ. 計算:

1) 血清:

TG(mg/dL)=C×(で- AB)÷(として- AB)×100 =(で- AB)÷(として- AB)×100

2) 組織:

タンパク質濃度:

TG(mg/mgプロット)= C×V×(で- AB)÷(として- AB) ÷(心肺蘇生×V)=(で- AB)÷(として- AB) ÷心肺蘇生法

サンプル重量:

TG(mg/g) = C×V×(で- AB)÷(として- AB) ÷W=(で- AB)÷(として- AB) ÷W

3 ) 細菌とか 細胞:

TG(U/104セル) =C×(で- AB)÷(として- AB) ÷D=(で- AB)÷(として- AB) ÷D 1dL =100mL;

V: 試薬1の量, 1 mL;

C: 標準濃度, 1 mg/mL;

心肺蘇生法: サンプルタンパク質濃度 (mg/mL); W: サンプル重量(g);

D: 細菌または細胞の密度, 104 セル/mL.

注記:

1. キットには揮発性物質が含まれています. 実験中は手袋とマスクを着用してください. 試薬ボトルのキャップは、使用後すぐに閉める必要があります。
2. 試薬Ⅱ添加後, 繰り返し激しく振動させる必要がある, 試験液中のトリグリセリドを十分に抽出できるようにするため, と振動振幅, 時間, を繰り返し、層別化の時間を待つ必要があります。
3. テストの再現性を確保するために, 各水浴後の冷却時間は次のとおりです。
4. 試験管の外径値が より大きい場合 1.5, 試験前に試薬 I でサンプルを適切に希釈することをお勧めします。, 計算中に対応する希釈倍率を掛けます。.

参考文献

• フレッチャー・M・J. 比色法により血清中性脂肪を推定する方法[J]. クリニカ チミカ アクタ, 1968, 22(3): 393-397.
• ヘラクレスDM, シーハン T L. 血清グリセロールおよびトリグリセリドの化学発光測定[J]. 分析化学, 1978, 50(1):22-25.

関連製品

BC1890/BC1895 遊離コレステノン (FC) コンテンツアッセイキット

BC0750/BC0755 アセトアルデヒド脱水素酵素(ALDH) 活性アッセイキット

BC0410/BC0415 アセチル CoA カルボキシラーゼ(ACC) 活性アッセイキット

BC1980/BC1985 総コレステロール(TC) コンテンツアッセイキット

技術仕様:

検出限界: 0.0372 mg/mL

直線範囲: 0.0625-3 mg/mL