구강 면봉 게놈 DNA 추출 키트

1. 시약 키트의 구성 요소

2. 저장

이 시약 키트는 실온에서 보관해야 합니다. (15-25℃) 그리고 건조한 환경에서는, 유효기간이 있는 12 개월. DNA 추출 정제 컬럼은 다음 용도로 보관할 수 있습니다. 1 시원하고 건조한 환경에서 1년 동안. 단백질분해효소 K 및 RNase A 방부제 함유, 실온에서 운송 가능, 하지만 장기간 보관을 위해서는, -20℃에 보관해야 합니다.

3. 시약 키트 사용 지침

3.1 이 시약 키트는 분자생물학 연구용이므로 질병 진단이나 치료에 사용해서는 안 됩니다..

3.2 시약 키트의 일부 구성품에는 자극제가 포함되어 있습니다.. 보호복, 고글 착용 등의 보호 조치가 권장됩니다..

3.3 이 시약 키트를 사용하는 동안, 고속 원심분리기, 욕조 (금속 욕조), 소용돌이 믹서, 무수에탄올, 멸균 탈이온수, EP 튜브는 사용자가 준비해야 합니다..

4. 시약 키트 소개

The Oral Swab DNA 정제 Kit provides a rapid and efficient method for purifying DNA from oral swabs, widely used for the extraction of epithelial cells such as oral epithelium.

The Oral Swab DNA Rapid Purification Kit can extract total DNA from oral epithelial cells within 30 분. 전체 정제 공정에는 페놀-클로로포름과 같은 독성 시약이 필요하지 않습니다.. 추출된 DNA는 다음과 같은 목적으로 직접 사용될 수 있습니다. PCR, 서던 블로팅, 및 기타 응용 프로그램.

5. 실험 원리 및 절차

6. 추출과정

실험을 시작하기 전에:

ㅏ. Reagent Buffer B and C 저온 조건에서 침전될 수 있음. 65℃로 가열하는 것을 권장합니다. 5 분. 침전물이 용해된 후, 정상적으로 사용할 수 있어요.

비. 사용하기 전에, 규정량의 무수에탄올을 첨가한다. 세척 버퍼 1병 라벨에 표시된대로. 무수 에탄올 첨가를 나타내기 위해 라벨에 체크 표시를 하십시오..

씨. 용출 완충액은0.1x TE 솔루션최소한의 EDTA 함유. EDTA가 후속 실험에 영향을 미칠 수 있는 경우, Elution Buffer를 멸균 탈이온수로 대체하는 것이 좋습니다..

1. 샘플 취급:
2. Sampling: Take a sterilized cotton swab, insert it into the mouth, rub against the inner cheek back and forth for more than 20 타임스.
3. Use scissors to cut the head of the cotton swab, place it into a 2 ml centrifuge tube, and add 400μl의 시약 Buffer B.
4. 추가하다10μl 단백질분해효소 K (10 mg/ml) and 10μl RNase A (10 mg/ml), invert thoroughly, 65°C에서 배양합니다. 20 분, vortex for 10 seconds during incubation.
5. 추가하다 400μl의 시약 Buffer C용해물에, vortex thoroughly.
6. 추가하다 200μl of pre-chilled absolute ethanol, 잘 섞다; precipitation may occur, 하지만 후속 실험에는 영향을 미치지 않습니다..
7. Transfer the obtained liquid into a DNA extraction and purification column (전부) (매번 약 650~700μl), 원심분리기 >8,000 rpm 1 분, 수집된 폐액을 폐기합니다., and reinsert the collection tube into the DNA extraction and purification column (전부) 다음 단계를 위해.
8. Place the DNA extraction and purification column (전부) into a collection tube, 추가하다 300세척 완충액의 μl 1, 원심분리기 >8,000 rpm 1 분, 폐액을 버리다, and reinsert the DNA extraction and purification column (전부) 다음 단계를 위해 튜브에.

(메모: Ensure that absolute ethanol has been added to Wash Buffer 1.)

7. 추가하다 500세척 완충액의 μl 1to the DNA extraction and purification column (전부), 원심분리기 14,000 rpm (20,000×g) ~을 위한 2 분, extend the centrifugation time appropriately to dry the membrane further.
8. Place the DNA extraction and purification column (전부) 새로운 원심분리 튜브에, 뚜껑을 열어라, 65°C에서 배양합니다. 2 분; this step can be extended appropriately to evaporate ethanol as much as possible, preventing residual ethanol from affecting downstream experiments.
9. Elute 100용출 완충액 μl멤브레인 위에, 원심분리기 12,000 rpm 2 분.

(메모: 1. Eluting DNA with 50μl of Elution Buffer can increase DNA concentration but decrease total DNA yield; 2. Eluted DNA in the eluate can be reapplied to the DNA extraction and purification column, 다시 원심분리기를 놓는다 12,000 rpm 2 minutes to increase DNA yield.)