소개
- 단백질분해효소 K 특성:
- 광범위한 기질 특이성을 지닌 안정적인 세린 프로테아제.
- 세제가 있는 경우에도 자연 상태에서 많은 단백질을 분해합니다..
- 금속 이온에 의해 활성화되지 않음, 킬레이트제 (예를 들어, EDTA), 설프하이드릴 시약, 또는 트립신 또는 키모트립신 억제제.
- 넓은 pH 범위에서 안정적 (4-12.5), pH 6.5~9.5에서 최적의 활성.
- 변성제에 의해 활동이 자극될 수 있음 (예를 들어, SDS 및 요소).
- 70°C 이상의 온도에서는 급속한 변성이 발생합니다..
- 알칼리성 pH에서 자가분해 증가, 그러나 일부 효소 단편은 광범위한 자가분해 후에도 완전한 단백질 분해 활성을 유지합니다..
- 응용:
- 원치 않는 단백질을 소화하기 위해 분자 생물학에서 자주 사용됩니다., DNA 또는 RNA 제제의 뉴클레아제와 같은.
- 일반적으로 핵산 준비 시 50~200μg/ml로 사용됩니다..
- 최적의 조건: pH 7.5-8.0 37~55°C.
- 인큐베이션 시간은 다음과 같습니다. 30 분까지 18 시간.
명세서
| 특징 | 명세서 |
| 분자 무게 | 29.3kDa |
| 등전점 | 8.9 |
| 모습 | 백색 동결건조 분말 |
| 청정 | 95% (SDS-PAGE 분석) |
| 특정 활동 | ≥34 단위/mg 단백질 |
| 온도특성 | 효과적인 활동 온도는 37-70°C입니다., 65°C에서의 효소 활성은 25°C의 두 배입니다.. |
| PH 특성 | 4.0-12.0, 최적의 범위는 ph7.5-11.5입니다. |
| 보존 조건 | 안정성을 최대한 보장하려면 -20°C에서 보관하는 것이 좋습니다. (상온 운송 또는 보관은 효소 활성을 감소시키지 않습니다.). 유통기한은 까지예요 3 -20°C에서 1년, 2 2~8°C에서 년. |
| 사용방법 | 용액으로 20mg/ml를 준비합니다., 최종 농도가 50-200ug/ml가 될 때까지 소화액 또는 용해물에 단백질분해효소 K를 추가합니다., 55~70°C에서 배양하세요.. 반응 후 Proteinase K를 Magnetic Bead 방식으로 제거 또는 비활성화 가능, 컬럼 방법 또는 페놀-클로로포름 추출. 프로테아제 K는 95°C에서 배양하면 비활성화될 수 있습니다. 3 분 또는 70°C 15 분. |
| 핵산 잔류물 검출 | Qubit이 감지하지 못했습니다 인간 DNA 오염이 감지되지 않음 (실시간 PCR) 세균 DNA 오염이 감지되지 않음 (16S 유니버셜 프라이머 PCR, 30 사이클) 곰팡이 DNA 오염이 감지되지 않음 (ITS 프라이머 PCR) |
| 뉴클레아제 검출 | DNase가 감지되지 않음 RNase가 감지되지 않음 니카제가 감지되지 않음 |
| 추천 애플리케이션 | 핵산 추출, 순환 DNA 추출, 바이러스 핵산 추출 |
장점
- RNase를 포함하지 않음, DNase, 그리고 닉카제
- 핵산 잔류물 없음 (전체 100mg 단백질 K를 추출한 후 Qubit에서 감지되지 않음)
- 인간 유래 DNA 오염 없음 (Q-PCR에서는 감지되지 않음)
- 박테리아 DNA 오염 없음 (16S 범용 프라이머에서는 감지되지 않음)
- 곰팡이 DNA 오염 없음 (1TS Universal Primer에서는 검출되지 않습니다.)
- 운송 가능하며 건조한 환경, 상온에서 2년 동안 유효합니다..
- 고감도의 free DNA 추출에 사용 가능, 바이러스 핵산 추출, 전혈 DNA 추출, 등.
주문정보
| 내용물 | C12100 | C12101 | C12102 | PDB-1000 |
| 단백질분해효소 K, 동결건조, >30 단백질 단위/mg | 1 g | 10 g | 100 g | |
| 버퍼 PDB (20mM 트리스, pH 7.5, 10mM CaCl2, 50% 글리세린, 0.1% 방부제) | 1000 밀리리터 |
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