Solarbio 포름알데히드 탈수소효소 (FDH) 활동 분석 키트 (동물 샘플)

제품정보

카탈로그 번호: BC4980

명세서: 50T/48S

키트 구성품

• 추출 용액: 60 밀리리터 x 1 병, 2~8°C에서 보관
• 시약 1: 35 밀리리터 x 1 병, 2~8°C에서 보관
• 시약 2: 파우더× 2 약병, -20°C에 보관
• 시약 3: 파우더× 2 약병, 2~8°C에서 보관
• 시약 4: 3 밀리리터 x 1 병, 2~8°C에서 보관

솔루션 준비

1. 시약 II: 추가하다 0.25 사용 전 증류수 mL. 사용하지 않은 시약은 -20℃에서 2주 동안 보관해야 합니다..
2. 시약 II의 작업 용액: 시험에 필요한 금액에 따라, 시약 II의 비율에 따라 작업 용액을 준비합니다. (μL): 증류수 (μL) =1:29, 사용할 시약을 준비합니다.. 시약 II의 작업 용액은 당일 제조된 경우 당일에 모두 사용해야 합니다..
3. 시약 III: 추가하다 1.5 사용 전 증류수 mL. 잘 섞어주세요. 사용하지 않은 시약은 -20℃에서 2주 동안 보관해야 합니다.

제품 설명

포름알데히드 탈수소효소는 대부분의 원핵생물과 모든 진핵생물에 존재합니다.. 포름알데히드를 전환시키는 산화환원효소이다.. 포름알데히드 탈수소효소는 포름알데히드와 NAD+를 촉매하여 NADH를 생성할 수 있습니다.. 흡광도 340 nm는 증가할 것이다. 340nm에서의 변화를 측정함으로써, 포름알데히드 탈수소효소의 활성을 계산할 수 있습니다..

노트:

1. 선택하는 것이 좋습니다 2-3 실험 전 사전 실험에 대해 큰 차이가 예상되는 샘플. 시료의 흡광도가 측정범위를 벗어나는 경우, 검출을 위해 샘플량을 희석하거나 늘리는 것이 좋습니다..

필수 장비 및 소모품:

• UV 분광 광도계
• 저온 원심분리기
• 항온 인큐베이터/수조
• 조정 가능한 피펫
• 1 mL 석영 큐벳
• 모르타르/균질화기
• 얼음과 증류수

작업 단계:

나. 샘플 처리 (테스트할 샘플의 양을 적절하게 조정할 수 있습니다., 특정 비율을 참조할 수 있습니다.)

• 조직: 동물조직 중량의 비율에 따라 (g): 추출액량 (밀리리터) = 1:5~10 (무게를 재는 것이 좋습니다 0.1 g의 동물 조직에 추가 1 mL의 추출 용액), 얼음 욕조에서 균질화, 원심분리기 8000 g, 4°C 10 분; 상층액을 취하다 (상층액이 충분히 맑지 않은 경우, 위의 원심분리 단계를 반복하는 것이 좋습니다.) 테스트를 위해 얼음 위에 올려 놓으세요..

II. 결정 단계

1. 적어도 UV 분광 광도계를 예열하십시오. 30 분, 파장을 조정하여 340 nm, 증류수로 제로화.
2. 시약 1과 시약 4를 37°C에서 예열합니다. 10 사용하기 몇 분 전.
3. 안에 1 mL 석영 큐벳, 추가하다 100 샘플의 μL, 550 시약 1의 μL, 250 시약 2 작업 용액의 μL, 50 시약 3의 μL, 그리고 50 μL의 시약 4를 순서대로. 즉시 완전히 혼합하고 다음 온도에서 흡광도 A1을 측정합니다. 340 nm 20 초. 37°C 수조나 인큐베이터에 넣어서 5 반응하는 데 몇 분, 빨리 떼어내고 닦아서 말려주세요, 5분 20초에서의 흡광도 A2를 결정합니다.. 흡광도 A1을 기록합니다. 340 nm 20 초 및 이후 흡광도 A2 5 분. ΔA = A2 계산 – A1.

III. 동물 조직 내 FDH 활성 계산

1. 샘플을 기반으로 한 계산 단백질 농도:

단위 정의: 효소 활성의 1단위는 다음을 촉매하는 효소의 양으로 정의됩니다. 생산품 1 조직 단백질 mg당 분당 NADH nmol.