Введение
Кровь является ценным источником ДНК для различных клинических применений и научных исследований.. Однако, извлечение ДНК из образцов крови представляет несколько проблем:
Соображения безопасности:
- Образцы крови могут содержать болезнетворные микроорганизмы, создавая риск заражения для исследователей и загрязняя лабораторную среду.
- Традиционные методы часто включают в себя опасные химические вещества, такие как фенол-хлороформ..
Потеря ДНК:
- Удаление эритроцитов, обычный этап предварительной обработки может привести к потере желаемых фракций ДНК, таких как вирусная ДНК, циркулирующая ДНК, и микробная ДНК.
Примеси и ингибиторы:
- Кровь содержит различные компоненты, которые могут мешать последующим анализам, например: ПЦР и Саузерн-блоттинг.
Новая технология улучшения извлечения ДНК из крови:
Этот продукт предлагает новый подход к решению этих проблем.:
- Безопасно и эффективно: Метод исключает необходимость удаления эритроцитов., минимизация инфекционных отходов и потенциального загрязнения.
- Комплексное восстановление ДНК: Протокол позволяет очищать тотальную ДНК., включая геномный, митохондриальный, популярный, и циркулирующая ДНК, предоставление более полной картины для анализа.
- Широкая совместимость образцов: Метод эффективно очищает ДНК от различных компонентов крови, таких как цельная кровь. (свежий или замороженный), плазма, сыворотка, желтая шуба, и более.
- Последующие приложения: Извлеченная высококачественная ДНК пригодна для надежного анализа ПЦР и Саузерн-блоттинга..
Это инновационное решение упрощает извлечение ДНК из крови, обеспечивая при этом безопасность., эффективность, и комплексное восстановление ДНК. Это представляет собой значительный прогресс для исследователей, работающих в различных областях, таких как диагностика., криминалистика, и медицинские исследования.
Технические характеристики
| Функции | Технические характеристики |
| Основные функции | Выделение общей ДНК из 200 мкл цельной крови |
| Приложения | ПЦР, Южный болт и обнаружение вирусов, и т. д. |
| Метод очистки | Мини спин-колонка |
| Технология очистки | Кремнеземная технология |
| Метод процесса | Руководство (центрифугирование или вакуум) |
| Тип образца | Цельная кровь (свежий или замороженный), сыворотка, плазма, молоко, слюна, и другие жидкие образцы и культивируемые клетки |
| Сумма образца | <200мкл цельной крови или других жидких образцов, <5*106 лимфоциты или культуральные клетки Животные, не относящиеся к млекопитающим, у которых есть ядро в эритроцитах. (богатый ДНК, такие как птицы и рыбы): 5~20 мкл цельной крови за раз. |
| Объем элюирования | ≥20 мкл |
| Время за прогон | ≤30 минут |
| Объем переносимой жидкости на колонку | 800мкл |
| Привязка выхода колонки | 100мкг |
Принцип
Этот метод обеспечивает надежное и удобное решение для исследователей, работающих в различных областях, требующих для анализа очищенную ДНК., например, ПЦР, Саузерн-блоттинг, и секвенирование нового поколения.
Эффективная очистка ДНК с помощью технологии колонок с силикагелем
В этом продукте используется метод на основе колонки с диоксидом кремния для быстрой и эффективной очистки ДНК.. Вот описание процесса:
- Лизис и переваривание образца: Образец обрабатывается раствором лизата и протеазой для разрушения клеточных мембран и расщепления белков.. При этом ДНК попадает в раствор..
- Связывание с кремнеземной мембраной: Лизат, содержащий ДНК, переносят в колонку с силикагелем.. Кремнеземная мембрана в колонке специфически связывает молекулы ДНК посредством благоприятных взаимодействий.. Белки и другие примеси остаются несвязанными..
- Мойка: Промывочные буферы пропускаются через колонку, удаление несвязанных белков и клеточного мусора, которые не прилипли к кремнеземной мембране.
- Элюирование: Окончательно, буфер с низким содержанием соли (обычно 10 мм Трис, рН 9.0, и 0.5 мМ ЭДТА) используется для элюирования очищенной ДНК с кремнеземной мембраны.. Этот буфер нарушает взаимодействие между ДНК и кремнеземом., позволяя собрать очищенную ДНК в отдельную пробирку.
Преимущества
- Высококачественная ДНК – соответствует множеству последующих приложений, включая ПЦР, кПЦР, ферментативное пищеварение, гибридизация, и т. д..
- Быстрый – без отделения лейкоцитов, органическая экстракция, или осаждение этанолом
- Простой – все нуклеиновые кислоты могут быть получены прямым расщеплением
- Широкая применимость- работать с различными жидкими пробами
Содержимое комплекта
| Содержание | Д311102 | Д311103 |
| Время очистки | 50 | 250 |
| Мини-колонки HiPure DNA I | 50 | 2 Икс 125 |
| 2Пробирки для сбора мл | 100 | 5 Икс 100 |
| Буфер АЛ | 15 мл | 60 мл |
| Буфер DW1 | 30 мл | 150 мл |
| Буфер GW2* | 12 мл | 50 мл |
| Протеиназа К | 24 мг | 120 мг |
| Буфер для растворения протеазы | 1.8 мл | 10 мл |
| Буфер АЕ | 15 мл | 60 мл |
Хранение и стабильность
Для оптимальной производительности:
- Храните протеиназу К при температуре 2–8°C. (холодильник) по прибытии.
Допустимое кратковременное хранение:
- Протеиназа К может храниться до 12 недели при комнатной температуре (15-25°С) не влияя на его производительность.
Остальные компоненты комплекта:
- Храните все остальные компоненты набора в сухом месте при комнатной температуре. (15-25°С).
- Они стабильны по крайней мере 18 месяцев в таких условиях.
Важная заметка:
- При хранении всего комплекта при комнатной температуре, убедитесь, что буферы повторно растворены перед использованием, и всегда нагревайте все буферы до комнатной температуры перед их использованием..
