Введение
Набор предназначен для очистки тотальной РНК., включая микроРНК и другие малые молекулы РНК (18нт), из культивируемых клеток и различных тканей животных и человека, включая образцы труднолизируемых тканей.
Подробности
Технические характеристики
Функции | Технические характеристики |
Основные функции | Выделение тотальной РНК и микроРНК из клеток и тканей без реагента MagZol. |
Приложения | РТ-ПЦР, Нозерн Блот, поли А+очистка, защита нуклеиновых кислот и трансляция in vitro |
Метод очистки | Мини спин-колонка |
Технология очистки | Кремнеземная технология |
Метод процесса | Руководство (центрифугирование или вакуум) |
Тип образца | Клетка, Животные ткани, Растительная ткань |
Сумма образца | Клетки: ≤ 5 х 10^6, Животные ткани:<10мг |
Объем элюирования | ≥30 мкл |
Время за прогон | ≤40 минут |
Объем переносимой жидкости на колонку | 800мкл |
Привязка выхода колонки | 100мкг |
Принцип
Биологические образцы сначала лизируются и гомогенизируются в сильно денатурирующей среде. гуанидин изотиоцианатсодержащий буфер, который немедленно инактивирует ДНКазы и РНКазы, чтобы обеспечить выделение неповрежденной ДНК и РНК.. Затем лизат пропускают через спин-колонку Mini.. Этот столбец, в сочетании с высокосолевым буфером, позволяет избирательно и эффективно связывать геномную ДНК. Поток из колонки расщепляется протеиназой К в присутствии этанола.. Это оптимизированное пищеварение, вместе с последующим добавлением дополнительного количества этанола, обеспечивает соответствующее связывание тотальной РНК, включая микроРНК, в колонку. Загрязнения эффективно смываются и элюируется высококачественная РНК..
Преимущества
- Высокое качество – один шаг экстракция РНК реагент в сочетании с колонкой с силикагелем позволяет получить самую высокую концентрацию
- Быстрый – несколько образцов могут быть извлечены в 40 минуты
- Высокая применимость – образцы, включая животных, растения, бактерии, клетки, и т. д..
- Высокая концентрация – эффективно удалять макромолекулярную РНК, обогатить малую РНК и улучшить чувствительность
- Безопасный – без экстракции фенола хлороформом и без использования реагента Тризол.
Содержимое комплекта
Содержание | Р431102 | Р431103 |
Время очистки | 50 Приготовления | 250 Приготовления |
Мини-колонки HiPure RNA | 100 | 2 Икс 250 |
2Пробирки для сбора мл | 100 | 2 Икс 250 |
Протеиназа К | 48 мг | 240 мг |
Буфер для растворения протеазы | 5 мл | 15 мл |
Буфер RLC | 40 мл | 200 мл |
Буфер RWC | 20 мл | 80 мл |
Буфер RW2* | 20 мл | 2 Икс 50 мл |
Вода, не содержащая РНКазы | 10 мл | 60 мл |
Хранение и стабильность
Протеиназу К следует хранить при температуре 2–8°C по прибытии.. Однако, кратковременное хранение (вплоть до 12 недели) при комнатной температуре (15-25°С) не влияет на их работоспособность. Остальные компоненты набора можно хранить при комнатной температуре. (15-25°С) и стабильны по крайней мере 18 месяцев в таких условиях.
Отзывы
Отзывов пока нет.