Введение
Набор предназначен для очистки тотальной РНК., включая микроРНК и другие малые молекулы РНК (18нт), из культивируемых клеток и различных тканей животных и человека, включая образцы труднолизируемых тканей. Alternatively, a miRNA-enriched fraction and a total RNA (>200нт) fraction can be purified separately. This Kit combines phenol/гуанидин-based lysis of samples and silica membrane–based purification of total RNA. Магзол Реагент, входит в комплекты, представляет собой монофазный раствор фенола и тиоцианата гуанидина., designed to facilitate lysis of tissues, to inhibit RNases, and also to remove most of the cellular DNA and proteins from the lysate by organic extraction.
Подробности
Технические характеристики
| Функции | Технические характеристики |
| Основные функции | Isolation miRNA and other small RNA molecules(18нт), из культивируемых клеток и различных тканей животных и человека, using MagZol reagent and column |
| Приложения | РТ-ПЦР, Нозерн Блот, поли А+очистка, защита нуклеиновых кислот и трансляция in vitro |
| Метод очистки | Мини спин-колонка |
| Технология очистки | Кремнеземная технология |
| Метод процесса | Руководство (центрифугирование или вакуум) |
| Тип образца | Ткани животных, адгезивные клетки, suspension cells, бактерии, и т. д. |
| Сумма образца | Eukaryotic culture cells: ≤ 10^7, Животные ткани:<100мг, Yeast culture cells:<5 x10^7, Bacteria:<10^9 |
| Объем элюирования | ≥15 мкл |
| Время за прогон | ≤40 минут |
| Объем переносимой жидкости на колонку | 800мкл |
| Привязка выхода колонки | 100мкг |
Принцип
Колонка с силикагелем Hipure основана на фильтрующей мембране из стекловолокна с высокой силой связывания.. При условии высокой концентрации ионизирующего агента (such asguanidine hydrochloride or guanidine isothiocyanate), мембрана фильтра может адсорбировать нуклеиновую кислоту посредством водородной связи и электростатического, while protein andother impurities are not adsorbed and removed. Мембрану фильтра, адсорбированную нуклеиновой кислотой, промывают для удаления остаточного белка и соли.. Окончательно, нуклеиновая кислота, адсорбированная на мембране фильтра, может быть промыта буфером с низким содержанием соли. (например, буфер TE) или вода. Полученная нуклеиновая кислота имеет высокую чистоту и может быть непосредственно использована в различных последующих экспериментах..
This kit combines acid/guanidine (MagZol) extraction technology with glass fiber filter membrane purification, which can improve the extraction effect of complex samples and samples with low RNA content. After the sample is treated with MagZol reagent and chloroform, the supernatant is added with ethanol to provide appropriate binding conditions, then transferred to the purification column and centrifuged. Macromolecular RNA can be efficiently bound to the membrane. Collect the filtrate containing small RNA, add more ethanol to adjust the binding capacity of small RNA, the pollutants can be efficiently washed away by second cleaning. Окончательно, the purified RNA was eluted by RNase free water.
Преимущества
- Высокое качество – один шаг экстракция РНК реагент в сочетании с колонкой с силикагелем позволяет получить самую высокую концентрацию
- Быстрый – несколько образцов могут быть извлечены в 40 минуты
- Высокая применимость – образцы, включая животных, растения, бактерии, клетки, и т. д..
- Высокая концентрация – эффективно удалять макромолекулярную РНК, обогатить малую РНК и улучшить чувствительность
Содержимое комплекта
| Содержание | R431002 | R431003 |
| Время очистки | 50 Приготовления | 250 Приготовления |
| Мини-колонки HiPure RNA | 100 | 2 Икс 250 |
| 2Пробирки для сбора мл | 100 | 2 Икс 250 |
| Магзол Реагент | 60 мл | 270 мл |
| Буфер RWC | 20 мл | 80 мл |
| Буфер RW2* | 20 мл | 2 Икс 50 мл |
| Вода, не содержащая РНКазы | 10 мл | 30 мл |
Хранение и стабильность
Реагент MagZol следует хранить при температуре 2–8°C по прибытии.. Однако, кратковременное хранение (вплоть до 24 недели) при комнатной температуре (15-25°С) не влияет на его работоспособность. Остальные компоненты набора можно хранить при комнатной температуре. (15-25°С) и стабильны по крайней мере 18 месяцев в таких условиях.
Отзывы
Отзывов пока нет.