Введение
- Характеристики протеиназы К:
- Стабильная сериновая протеаза с широкой субстратной специфичностью..
- Разлагает многие белки в нативном состоянии даже в присутствии детергентов..
- Не активируется ионами металлов, хелатирующие агенты (например, ЭДТА), сульфгидрильные реагенты, или ингибиторы трипсина или химотрипсина.
- Стабилен в широком диапазоне pH. (4-12.5), с оптимальной активностью при pH 6,5–9,5.
- Активность можно стимулировать денатурирующими агентами. (например, Паспорт безопасности и мочевина).
- Быстрая денатурация происходит при температуре выше 70°C..
- Аутолиз увеличивается при щелочном pH, но некоторые фрагменты фермента сохраняют полную протеолитическую активность даже после обширного аутолиза..
- Приложения:
- Часто используется в молекулярной биологии для переваривания нежелательных белков., такие как нуклеазы в препаратах ДНК или РНК.
- Обычно используется в концентрации 50–200 мкг/мл в препаратах нуклеиновых кислот..
- Оптимальные условия: рН 7.5-8.0 и 37-55°С.
- Время инкубации варьируется от 30 минут до 18 часы.
Технические характеристики
| Функции | Технические характеристики |
| Молекулярная масса | 29.3кДа |
| Изоэлектрическая точка | 8.9 |
| Появление | Белый лиофилизированный порошок |
| Чистота | 95% (SDS-PAGE-анализ) |
| Конкретная деятельность | ≥34 единиц/мг белка |
| Температурная характеристика | Эффективная температура активности 37-70°C., а активность фермента при 65°С в два раза выше, чем при 25°С.. |
| Характеристики РН | 4.0-12.0, оптимальный диапазон ph7,5-11,5. |
| Условия сохранения | Рекомендуется хранить при температуре -20°C, чтобы обеспечить максимальную стабильность. (транспортировка или хранение при нормальной температуре не снижает активность фермента). Срок годности до 3 лет при -20°C и 2 лет при 2~8°C. |
| Метод использования | Приготовьте раствор 20 мг/мл., добавьте протеиназу К в пищеварительный раствор или лизат до достижения конечной концентрации 50-200 мкг/мл., и инкубировать при 55~70°С.. Протеиназу К после реакции можно удалить или инактивировать методом магнитных шариков., колоночный метод или фенол-хлороформная экстракция. Протеазу К можно инактивировать инкубацией при 95°С в течение 3 минут или 70°C для 15 минуты. |
| Обнаружение остатков нуклеиновой кислоты | Кубит не обнаружил Загрязнение ДНК человека не обнаружено (в реальном времени ПЦР) Загрязнение бактериальной ДНК не обнаружено (16S универсальный праймер ПЦР, 30 циклы) Загрязнение ДНК грибков не обнаружено (ИТС Праймер ПЦР) |
| Обнаружение нуклеазы | ДНКаза не обнаружена РНКаза не обнаружена Никаза не обнаружена |
| Рекомендуемое применение | Экстракция нуклеиновой кислоты, экстракция циркулирующей ДНК, экстракция нуклеиновой кислоты вируса |
Преимущества
- Не включая РНКазу, ДНКаза, и Никасе
- Нет остатков нуклеиновой кислоты (не обнаружен Qubit после извлечения всего 100 мг белка К)
- Отсутствие загрязнения ДНК человеческого происхождения (не обнаруживается с помощью Q-PCR)
- Отсутствие загрязнения бактериальной ДНК (не обнаруживается универсальным праймером 16S)
- Отсутствие загрязнения грибковой ДНК (не обнаруживается универсальным праймером 1ТС)
- Может транспортироваться и действителен в течение двух лет при нормальной температуре в сухой среде..
- Может использоваться для высокочувствительной свободной экстракции ДНК., экстракция нуклеиновой кислоты вируса, выделение ДНК цельной крови, и т. д..
Информация для заказа
| Содержание | C12100 | C12101 | C12102 | ПДБ-1000 |
| Протеиназа К, Лиофилизат, >30 ед./мг белка | 1 г | 10 г | 100 г | |
| Буферная PDB (20мм Трис, рН 7.5, 10мМ CaCl2, 50% глицерин, 0.1% Консерванты) | 1000 мл |
Отзывы
Отзывов пока нет.