Набор для анализа белка Solarbio BCA

БСА (Бицинхониновая кислота) Набор для анализа белка — широко используемый метод количественного определения концентрации белка в образце.. Этот анализ основан на колориметрическом обнаружении меди.(II) ионы восстанавливаются белками в щелочных условиях. Интенсивность полученного фиолетового цвета пропорциональна концентрации белка., позволяющий провести точную количественную оценку.

Вот общее руководство по использованию БСА-белок Набор для анализа:

Требуемые материалы:

1. Набор для анализа белка BCA
2. Образцы белка (стандартные растворы или неизвестные образцы)
3. Микропланшет или кюветы
4. Микропипетки и наконечники
5. Ридер для микропланшетов или спектрофотометр
6. Дистиллированная вода

Процедура:

1. Приготовление белковых стандартов:
   • Подготовьте серию белковых стандартов с известными концентрациями.. Эти стандарты будут использоваться для создания стандартной кривой для количественного определения..
2. Подготовка образцов:
   • Разбавьте образцы белка до концентрации, соответствующей стандартам.. Для точного количественного определения важно, чтобы образцы находились в пределах линейного диапазона анализа..
3. Приготовление рабочего реагента BCA:
   • Смешайте реагент BCA A. (Раствор бицинхониновой кислоты) и реагент BCA B (Медь(II) раствор сульфата) в 50:1 соотношение. Обеспечьте тщательное перемешивание.
4. Инкубация:
   • Добавьте рабочий реагент BCA в свои стандарты и образцы., а затем инкубировать реакционную смесь при подходящей температуре (обычно 37°C) для 30 минуты. В течение этого времени, белки в образцах уменьшают содержание ионов меди, образуя комплекс пурпурного цвета.
5. Измерение:
   • После инкубации, измерить поглощение каждой лунки на длине волны около 562 нм с использованием микропланшетного ридера или спектрофотометра. Поглощение прямо пропорционально концентрации белка..
6. Создание стандартной кривой:
   • Постройте график значений поглощения стандартов в зависимости от их известных концентраций, чтобы построить стандартную кривую.. Эта кривая будет использоваться для определения концентрации белка в неизвестных образцах..
7. Количественная оценка неизвестных образцов:
   • Измерьте оптическую плотность неизвестных образцов и используйте стандартную кривую для определения концентрации белка в них..
8. Анализ данных:
   • Рассчитайте концентрации белка на основе стандартной кривой.. Большинство считывателей микропланшетов имеют программное обеспечение, которое может автоматизировать этот процесс..
9. Полученные результаты:
   • Сообщайте о концентрациях белка в ваших образцах в соответствующих единицах. (например, мг/мл) на основе анализа BCA.

Важно следовать конкретным инструкциям производителя набора для анализа белка BCA., поскольку точный протокол может различаться в зависимости от набора. Кроме того, убедитесь, что все реагенты правильно хранятся, и анализ проводится в рекомендуемых условиях для получения точных и надежных результатов..

Набор для анализа белка BCA основан на белке, восстанавливающем Cu2+ до Cu+, и на принципе, согласно которому BCA образует пурпурно-синий комплекс с Cu1+ в щелочных условиях., с последующим определением поглощения при 562 нм и сравнением со стандартной кривой для количественного определения белка..