Соларбио Кумасси (Брэдфорд) Набор для анализа белка 50T

Кот №.: PC0015

Размер: 50Т

Хранилище: Сохранность пломбы после вскрытия, данный комплект с момента заказа действителен в течение девяти месяцев.

Описание

Краситель Кумасси G-250 представляет собой колориметрический реагент, используемый для обнаружения и количественного определения общего белка.. В кислой среде краситель Кумасси связывается с белком, вызывая немедленный сдвиг максимума поглощения с 465 нм на 595 нм с сопутствующим изменением цвета с зеленого на синий.. В определенном диапазоне концентраций, измеренное значение поглощения A595 прямо пропорционально концентрации белка.

Протокол

• МикропланшетЧитатель
  1. Полностью растворить стандарт BSA, разбавить от 10 мкл до 250 мкл, конечная концентрация 0,2мг/мл. Буфер для разведения зависел от измеряемого образца белка.. Ради простоты, рекомендуется использовать 0,9% NaCl или PBS..
  2. 5×G250 тщательно перемешайте перед добавлением 1 мл 5 × G250, разбавленного 4 мл ddH2O.. 1×Решение G250 может сэкономить одну неделю при температуре 4 ℃.
  3. Стандарт согласно 0, 2, 4, 6, 8, 12, 16, и 20 мкл соответственно добавлены в 96-луночные планшеты, и разведение PBS для дополнения.
  4. Разбавьте образец(подготовьте несколько градиентов, такой как 2 раз, 4 раз, 8 разбавление), и добавьте образец 20 мкл в 96 хорошо. Чтобы избежать ошибок, точки отбора проб необходимо устанавливать после стандартной линии 1/2.
  5. Добавьте 200 мкл разбавленного 1 × G250 в каждую лунку., комнатная температура для 3-5 минут.
  6. Определение поглощения.
  7. По стандартной кривой рассчитывают образец белка

• УФ-ВидСпектрофотометр

1. 8*10центрифужная пробирка мл(или больше) и помечены цифрами 1~8.
2. Разбавьте 100 мкл BSA 2,4 мл PBS до концентрации 2 мг/мл..
3. 5×G250 тщательно перемешайте перед использованием.. 1мл 5×G250, разбавленный 4 мл ddH2O. 1×Решение G250 может сэкономить одну неделю при температуре 4℃..
4. Добавьте реагенты согласно следующей таблице. (каждая лунка 5мл, дополнительное используется для очистки кюветы)

5. Измерьте значение OD после 3 минуты реакции. Чтобы убедиться в точности эксперимента, измеряйте значение OD каждые 2 минуты

сопутствующие товары:

PC0001 Стандартный раствор белка (5мг/мл БСА) PC0021 Реагент BCA

PC0030 Набор для анализа белка Лоури PC0020 БСА-белок Набор для анализа R0010 Буфер RIPA(высокий)

PR1600 Предварительно окрашенный белковый маркер(14.4кД-97,4кД) R0050 Набор для экстракции ядерного белка

Сопутствующая статья:

• Чжунюань Ли,Сюмэй Ли,Тяньхуэй Лю,и другие. Критическая роль открытых поверхностных остатков для термостабильности и галотолерантности новой ксиланазы GH11 из метагеномной библиотеки солончако-щелочной почвы. Международный журнал биологических макромолекул Лес. Июль 2019;133:316-323. (IF784)
• Циньлу Чжан,Цянь Лю,Мэнхан Ду,и другие. Цетуксимаб и доксорубицин, нагруженные магнитными наночастицами Fe3O4, покрытыми декстраном, как новые целевые наноносители для лечения немелкоклеточного рака легких. Журнал магнетизма и магнитных материалов. Июнь 2018. (IF046)