Ribulose 1, 5-bisphosphate carboxylase/oxygenase(Rubisco) Assay Kit

Соларбио Рибулоза 1 5-бисфосфаткарбоксилаза/оксигеназа (Рубиско) Набор для анализа

Name: Solarbio Ribulose 1 5-bisphosphate carboxylase/oxygenase (Rubisco) Assay Kit
SKU: 5393
Availability: InStock

$474.00 – $740.00

Доставка в долларах США 45 - Бесплатно свыше долларов США 300

размер

Очистить

DTE — китайская платформа электронной коммерции, специализирующаяся на онлайн-продажах молекулярных тестов., ИФА, и сопутствующие товары.

Производитель: Ведущие китайские бренды
Перевозки: Ускоренная доставка FedEx напрямую с заводов.
Право на возврат или замену в течение 30 дни
Способы оплаты: Безопасный PayPal или кредитная карта.

Описание

Примечание: Перед тестом возьмите два или три разных образца для прогнозирования..

Операционное оборудование: Спектрофотометр

Кот нет: BC0440

Размер:50Т/48С

Компоненты:

Реагент	Спецификация	Условия хранения	Подготовка перед использованием
Извлечь раствор	50 мл × 1	4℃	–
Реагент I	50 мл × 1	4℃	–
Реагент II	Порошок × 1	-20℃	–
Реагент III	Порошок × 2	-20℃	Растворить с 1 мл дистиллированной воды перед использованием; Если после осциллирования появляется мутность, центрифуга перед использованием.
Реагент IV	Порошок × 1	-20℃	Растворить с 2 мл дистиллированной воды перед использованием.
Рабочее решение	–	–	Перед использованием добавьте весь реагент I в реагент II., тщательно перемешать, и инкубировать при 25℃ в течение 5 минуты.

Описание продукта:

Рибулозо-1,5-бисфосфаткарбоксилаза/оксигеназа (Рубиско) является ключевым ферментом фотосинтеза растений..
Он контролирует фиксацию углекислого газа и регулирует поступление углерода в цикл Кальвина и цикл фотодыхания..
Активность Рубиско напрямую влияет на скорость фотосинтеза..
Рубиско катализирует соединение рибулозо-1,5-дифосфата. (РуБП) и диоксид углерода с образованием 3-фосфоглицерата (ПГА).
PGA далее превращается в глицеральдегид-3-фосфат., сопровождается окислением НАДН с образованием НАД+..
НАДН поглощает свет при 340 нм, в то время как НАД+ нет.
В этом комплекте, Активность Рубиско определяют путем измерения снижения поглощения НАДН при 340 нм.

Требуемые реагенты и оборудование, которые не входят в комплект поставки:

Ультрафиолетовый спектрофотометр, настольная центрифуга, регулируемая пипетка, водяная баня, 1 мл кварцевая кювета, ступка/гомогенизатор, лед, дистиллированная вода.

Процедура:

Базовые приготовления:

- Бактерии или клетки:
  - Соберите бактерии или клетки в центрифужную пробирку и центрифугируйте, чтобы удалить супернатант..
  - Добавлять 1 мл раствора экстракта 5 миллионов бактерий или клеток.
  - Используйте ультразвук (на льду, 20% власть, 3 второй сын, 10 несколько секунд, повторенный 30 раз) лизировать бактерии или клетки.
  - Центрифуга в 10000 ×g для 10 минут при 4°C для удаления нерастворимых материалов и сбора надосадочной жидкости на льду для тестирования..
- Салфетка:
  - Добавлять 1 мл раствора экстракта 0.1 г ткани (желательно свежие образцы растений) и гомогенизировать на льду.
  - Центрифуга в 10000 ×g для 10 минут при 4°C для удаления нерастворимых материалов, и собрать надосадочную жидкость на льду для тестирования.

Процедура определения:

- - - Предварительно нагрейте УФ-спектрофотометр для 30 минут и отрегулируйте длину волны 340 нм. Обнуление прибора дистиллированной водой.
    - Добавьте следующие реагенты:

Реагент (мкл)	Пробирка (Т)	Пустая трубка (Б)
Образец	100	–
дистиллированная вода	–	100
Реагент III	35	35
Реагент IV	35	35
Рабочее решение	900	900

Определить поглощение при 340 нм в момент 20с и 5мин20с, записать как A1 и A2 соответственно. ΔА(Т)=А2(Т)-А1(Т), ΔА(Б)=А2(Б)-А1(Б), ΔА=ΔА(Т)-ΔА(Б). Хранится при температуре 25 ℃ во время реакции.. Пустые пробирки необходимо тестировать только один или два раза..

Расчет:

Концентрация белка:

- Определение единицы измерения: Одна единица ферментативной активности определяется как количество фермента, катализирующего выработку 1 нмоль НАДН в минуту на каждый миллиграмм белка.
- Рубиско (Ед/мг прот) Расчет:
  - Рубиско(Ед/мг прот) "=" [ΔА ÷ (ε×d) × 10^9 × Веревка] ÷ (Против × Цпр) ÷ Т
  - Рубиско(Ед/мг прот) "=" 344 × ΔA ÷ Cпр

Вес образца:

- Определение единицы измерения: Одна единица ферментативной активности определяется как количество фермента, катализирующего выработку 1 нмоль НАДН в минуту на каждый грамм ткани.
- Рубиско (Е/г веса) Расчет:
  - Рубиско(Е/г веса) "=" [ΔА ÷ (ε×d) × 10^9 × Веревка] ÷ (Вт ÷ Ve × Vs) ÷ Т
  - Рубиско(Е/г веса) "=" 344 × ΔА ÷ Вт

Бактерии или культивируемые клетки:

- Определение единицы измерения: Одна единица ферментативной активности определяется как количество фермента, катализирующего выработку 1 нмоль НАДН в минуту на каждый 10,000 клетки или бактерии.
- Рубиско (U/10^4 ячейка) Расчет:
  - Рубиско(U/10^4 ячейка) "=" [ΔА ÷ (ε×d) × 10^9 × Веревка] ÷ (Вс ÷ Ве × 500) ÷ Т
  - Рубиско(U/10^4 ячейка) "=" 0.69 ×ΔА

Константы и параметры:

е: Молярный коэффициент экстинкции НАДН, 6.22 × 10^3 л/моль/см
д: Световой путь кюветы, 1 см
Веревка: Общий объем реакции, 1.07 × 10^-3 л
Против: Объем супернатанта, 0.1 мл
ве: Добавленный объем раствора экстракта, 1 мл
КПР: Концентрация белка образца (мг/мл)
Т: Время реакции, 5 минуты
Вт: Вес образца (г)
500: 5 миллионы клеток или бактерий
10^9: 1 моль = 10^9 нмоль

Экспериментальный пример:

Возьмите 0,1 г листьев растения., добавлять 1 мл раствора экстракта для гомогенизации, возьмите супернатант, а затем действовать в соответствии с этапами определения.

Измерьте микрокварцевой кюветой и рассчитайте.

ΔАТ= АТ1-АТ2=1,279-1,206=0,073, ΔAB=AB1–AB2=0,834-0,823=0,011,

ΔА= ΔAT -ΔAB=0,073-0,011=0,062

Рубиско деятельность (Ед/г массы) "=" 344 × ΔA ÷ W =344×0,062÷0,1=213,28 Ед/г массы.

Сопутствующие товары:

BC0310/BC0315 Коэнзим I НАД(ЧАС) Набор для анализа содержания

BC1030/BC1035 НАД-киназа (НАДК) Набор для анализа активности

BC0630/BC0635 НАДН-оксидаза (НОКС) Набор для анализа активности

BC1130/BC1135 НАД яблочный фермент (ЧЕРЕЗ МЕНЯ) Набор для анализа активности

Подробности

размер	25Т, 50Т

Отзывы (0)

Отзывы

Отзывов пока нет.

Будьте первым, кто оставил отзыв на “Соларбио Рибулоза 1 5-бисфосфаткарбоксилаза/оксигеназа (Рубиско) Набор для анализа”