Набор для анализа содержания крахмала Solarbio

Набор для анализа содержания крахмала

Примечание: Перед тестированием возьмите два или три разных образца для прогнозирования.. Операционное оборудование: Спектрофотометр/считыватель микропланшетов.

Кот нет: BC0705

Размер: 100Т/96С

Компоненты:

Реагент I: 110 мл×1. Хранение при 4℃.

Реагент II: 110 мл×1. Хранение при 4℃.

Реагент III: Порошок×2. Хранение при 4℃.

Стандартный: Порошок×1, 10 мг глюкозы (безводный). Хранение при 4℃.

Стандартное решение: Растворен с 1 мл дистиллированной воды до 10 Стандартный раствор глюкозы в мг/мл, если стандартный раствор будет использоваться. Его можно хранить в течение 2 недели при 4℃.

Рабочее решение: Добавлять 2.625 мл дистиллированной воды к Реагенту III, медленно добавляй 14.875 мл концентрированной H2SO4, постоянно помешивайте и полностью растворите перед использованием. Его можно хранить в течение 1 неделю при 4℃.

Описание продукта:

Крахмал – основная форма хранения сахара в растениях.. Определение содержания крахмала имеет большое значение при оценке пищевой ценности продуктов питания и исследовании обмена сахаров у растений..

Отделить растворимый сахар от крахмала 80% спирт этиловый, затем разложить крахмал на глюкозу путем кислотного гидролиза. Содержание крахмала можно рассчитать путем измерения содержания глюкозы антрон-колориметрическим методом..

Требуемые реагенты и оборудование, которые не входят в комплект поставки:

Спектрофотометр/считыватель микропланшетов, водяная баня, регулируемая пипетка, микро-стеклянная кювета/96-луночный планшет с плоским дном, ступка/гомогенизатор, лед, концентрированная H2SO4 и дистиллированная вода.

Процедура:

я. Базовые приготовления:

1. 1. Брать 5 мг образца, растереть в ступке и добавить 1 мл реагента I. После гомогенизации, перенос в центрифужную пробирку, поместить на водяную баню при температуре 80℃ на 30 минуты, затем центрифугируйте при комнатной температуре и 3000 ×g для 5 минуты, выбросить супернатант, удерживать осадки.
   2. Добавлять 0.5 мл дистиллированной воды до осадка. Поставить на кипящую водяную баню на 15 минуты (затяните крышку, чтобы предотвратить потерю воды)
   3. После охлаждения, добавлять 1 мл реагента II, поместить на кипящую водяную баню на 15 мин., встряхните 3-5 раз
   4. После охлаждения, центрифуга при комнатной температуре и 3000 ×g для 15 минуты, взять супернатант на анализ.

II. Определение процедура:

1. Предварительно разогрейте спектрофотометр/считыватель микропланшетов для 30 минуты, отрегулировать длину волны, чтобы 620 нм, установить ноль с помощью дистиллированной воды.
2. Отрегулируйте водяную баню до 95°C..
3. Стандартное рабочее решение: разбавить 10 мг/мл стандартного раствора с дистиллированной водой до 0.4, 0.2, 0.1, 0.05, 0.04, 0.03, 0.02, 0.01 мг/мл.
4. Стандартный тест: Брать 50 мкл стандартного раствора или 50 мкл дистиллированной воды (Пустая трубка) и 250 мкл рабочего раствора в EP-пробирку. Поместите в водяную баню с температурой 95℃ для 10 минуты (затяните крышку, чтобы предотвратить потерю воды), естественное охлаждение до комнатной температуры, брать 200 мкл в стеклянную микрокювету/96-луночный планшет с плоским дном, определить поглощение стандартного раствора(КАК) и пустой контроль(АБ) в 620 нм. Вычислить ΔA=AS — AB. Пустую пробирку и стандартную кривую необходимо тестировать только один или два раза..
5. Образец теста: Брать 50 мкл образца и 250 мкл рабочего раствора EP. Поместите в водяную баню с температурой 95℃ для 10 минуты (затяните крышку, чтобы предотвратить потерю воды), естественно охладить до комнатной температуры, брать 200 мкл в стеклянную микрокювету/96-луночный планшет с плоским дном, определить оптическую плотность пробирки(В) в 620 нм. Вычислить ΔAˊ= AT — AB.

III. Расчеты:

1. Создать стандартную кривую

Возьмите стандартный раствор глюкозы. (0.4, 0.2, 0.1, 0.05, 0.04, 0.03, 0.02, 0.01 мг/мл) как ось X, ΔA как ось Y, построить стандартную кривую и получить уравнение линейной регрессии y=kx+b, подстановка ΔAˊ в уравнение дает x(мг/мл).

2. Расчет содержания крахмала Рассчитывается по массе образца Содержание крахмала (мг/г массы) = x×F×VE÷W÷1,11=1,351x÷W×F VE: объем после экстракции, 1.5 мл;

Вт: масса образца, г;

Ф: коэффициент разбавления;

1.11: — константа перевода содержания глюкозы, измеренного этим методом, в содержание крахмала., то есть, 111

мкг глюкозы окрашивают антронным реактивом, что эквивалентно 100 мкг крахмала с помощью антронового реагента.

Примечание:

1. Поскольку рабочая жидкость очень агрессивна., пожалуйста, действуйте с
2. Если значение поглощения превышает линейный диапазон, размер выборки может быть увеличен или разбавлен перед определением.

Экспериментальный пример:

1. Возьмите 0,05 г кукурузы для обработки образца., возьмите супернатант, а затем действовать в соответствии с этапами определения. Использовать 96 луночный планшет для измерения и расчета ΔA'=AT-AB= 0.728-0.622 =0,195, стандартная кривая y = 3,1829x + 0.002, вычислить х = 195. Содержание крахмала (мг/г массы) = 1,351x×F÷W= 1,351×0,195×128÷0,05 = 674.4 мг/г массы.

Рекомендации

• Клегг К М. Применение реагента антрон для оценки крахмала в зерновых культурах.[Дж]. Журнал науки о продовольствии и сельском хозяйстве, 1956, 7(1):40-44.
• Вайлз-младший, Сильверман Л. Определение крахмала и целлюлозы с антроном [Дж]. Аналитическая химия, 1949, 21(8):950-953.

сопутствующие товары

BC0610/BC0615 Почвенная β-глюкозидаза (б- ГК) Набор для анализа активности

Набор для анализа активности β-амилазы BC2040/BC2045

BC1850/BC1855 Растворимая синтаза крахмала(ССС) Набор для анализа активности