Триглицерид(ТГ) Набор для анализа содержания
Примечание: Перед тестированием возьмите два или три разных образца для прогнозирования..
Операционное оборудование: Microplate reader/Spectrophotometer
Номер каталога: BC0625
Размер:100Т/96С
Компоненты:
Реагент I: Self-provided reagent, добавлять 80 mL of n-heptane and 80 mL of isopropyl alcohol to an empty glass bottle. Seal and mix well, хранение при 4℃.
Реагент II: 3 мл×1 флакон. Хранение при 4℃.
Реагент III: 10 мл×1 флакон. Хранение при 4℃.
Реагент IV: 3 мл×1 флакон. Хранение при 4℃, protected from light. Реагент V: 10 мл×1 флакон. Хранение при 4℃, protected from light. Реагент VI: 10 мл×1 флакон. Хранение при 4℃, protected from light.
Стандартный: powder ×1 bottle, добавлять 5 mL of Reagent I before use. 1 mg/mL triglyceride standard solution, хранение при 4℃.
Описание продукта:
Триглицерид(ТГ) is a fat molecule formed by long-chain fatty acids and glycerol, which is not only the main component of cell membrane, but also an important respiratory substrate. The TG is extracted with isopropyl alcohol, then hydrolysis to glycerol and fatty acids after saponification of TG by KOH. Glycerol is oxidized by periodic acid to form formaldehyde. Condensation of formaldehyde and acetylacetone to form yellow components in presence of chloride ions. The yellow component has a characteristic absorption at 420 nm and proportional to the TG content.
Требуемые реагенты и оборудование, которые не входят в комплект поставки:
Спектрофотометр/считыватель микропланшетов, микро-стеклянная кювета/96-луночный планшет с плоским дном, n-heptane, isopropyl alcohol, водяная баня, регулируемая пипетка, distilled water and 125 mL of empty bottle.
Процедура:
я. Базовые приготовления:
- Салфетка:
Ice-bath homogeneity is conducted according to the ratio of tissue mass (г): Reagent Ⅰ volume (мл) "=" 1: 5~10 (it is suggested to take about 0.1 g of tissue and add 1 мл реагента I). Центрифуга в 8000 g for 10 минут при 4℃, supernatant is used for test.
- Bacteria:
Collect 5 million cells or bacteria into the centrifuge tube, then discard the supernatant, final add 1 мл реагента I. Splitting bacteria or cell with ultrasonic for 1 минута (власть 20%, work time 2s, interval 1s). Центрифуга в 8000 g for 10 минут при 4℃, supernatant is used for test.
- сыворотка: Detect
II. Процедура:
- Preheat Spectrophotometer for 30 минуты, отрегулировать длину волны, чтобы 420 нм, установить ноль с помощью дистиллированной воды.
- Preheat water bath to 65℃.
Название реагента (мкл) | Пустая трубка (АБ) | Стандартная трубка( КАК) | Пробирка(В) |
Дистиллированная вода | 40 | – | – |
Стандартное решение | – | 40 | – |
TG test solution | – | – | 40 |
Reagent Ⅰ | 125 | 125 | 125 |
Reagent Ⅱ | 25 | 25 | 25 |
Mix thoroughly after adding Reagent I, add Reagent II, shake strongly for 30 с, stand several minutes. After layering, 15 μL of the upper layer solution is taken and put it into a new EP tube. |
- Detect TG content:
Название реагента (мкл) | Пустая трубка (АБ) | Стандартная трубка (КАК) | Пробирка (В) |
Upper layer solution | 15 | 15 | 15 |
Reagent Ⅲ (ул) | 50 | 50 | 50 |
Reagent Ⅳ (ул) | 15 | 15 | 15 |
Тщательно перемешать, water bath at 65℃ for 3 минуты. | |||
Reagent Ⅴ (ул) | 50 | 50 | 50 |
Reagent Ⅵ (ул) | 50 | 50 | 50 |
Тщательно перемешать, water bath at 65℃ for 3 минуты. |
После охлаждения, transfer liquid from the EP tube to a micro glass cuvette/96 well flat-bottom plate, and determine the absorbance at 420 нм.
Примечание: Blank tube and standard tube only need to be measured once.
III. Расчет:
1) сыворотка:
ТГ(mg/dL)= C×(В- АБ)÷(КАК- АБ)×100 =(В- АБ)÷(КАК- АБ)×100
2) Салфетка:
Концентрация белка:
ТГ(mg/mg prot)= C×V×(В- АБ)÷(КАК- АБ) ÷(Cpr×V)"="(В- АБ)÷(КАК- АБ) ÷Cpr
Вес образца:
ТГ(mg/g) = C×V×(В- АБ)÷(КАК- АБ) ÷W=(В- АБ)÷(КАК- АБ) ÷Вт
3 ) Bacteria or клетки:
ТГ(Ячейка U / 104) = C×(В- АБ)÷(КАК- АБ) ÷D=(В- АБ)÷(КАК- АБ) ÷D 1dL =100 mL;
В: The volume of reagent1, 1 мл;
С: Стандартная концентрация, 1 mg/ mL;
КПР: Концентрация белка образца (мг/мл); Вт: Вес образца(г);
Д: Density of bacteria or cell, 104 cell/mL.
Примечание:
- There are volatile substances in the kit. Gloves and masks should be worn during the experiment. The reagent bottle cap should be closed in time after
- After the addition of Reagent Ⅱ, it is necessary to repeatedly and violently vibrate, so that the triglyceride in the test solution can be fully extracted, and the oscillation amplitude, time, repeated times and waiting for stratification time should be
- In order to ensure the repeatability of the test, the cooling time after each water bath should be
- If the OD value of the test tube is greater than 1.5, it is recommended to dilute the sample with Reagent I properly before testing, and multiply it by the corresponding dilution multiple during calculation.
Рекомендации
- Fletcher M J. A colorimetric method for estimating serum triglycerides[Дж]. Clinica Chimica Acta, 1968, 22(3): 393-397.
- Hercules D M, Sheehan T L. Chemiluminescent determination of serum glycerol and triglycerides[Дж]. Analytical chemistry, 1978, 50(1):22-25.
сопутствующие товары
BC1890/BC1895 Free Cholestenone (FC) Набор для анализа содержания
BC0750/BC0755 Acetaldehyde Dehydrogenase(ALDH) Набор для анализа активности
BC0410/BC0415 Acetyl CoA carboxylase(ACC) Набор для анализа активности
BC1980/BC1985 Total Cholesterol(TC) Набор для анализа содержания
Технические характеристики:
The detection limit: 0.0372 мг/мл
Linear range: 0.0625-3 мг/мл
Отзывы
Отзывов пока нет.