Обзор продукта:
Дитиотреитол (DTT) это реагент, используемый для восстановления связей S-S в белках.. В биохимических исследованиях, это тиол-защитный агент, особый фермент ингибитор, и используется для измерения активности ферментов. Его также используют при приготовлении SDS-СТРАНИЦА буфер выборки.
Подготовка:
Растворите 3,09 г ДТТ в 20 мл 0,01 моль/л раствора ацетата натрия. (pH5,2), фильтруем и стерилизуем, затем аликвоты во флаконы по 1 мл и хранить при -20 ℃..
Количество CAS:
Появление:
Белая игла или белые гранулы
Чистота:
≥99%
Условия хранения дитиотреитола:
2-8℃
Срок годности:
Четыре года
Что такое дитиотреитол (DTT)?
Дитиотреитол (DTT) представляет собой небольшую органическую молекулу, способную восстанавливать агенты с химической формулой C4H10O2S2..
Это линейная молекула в восстановленном состоянии, которая после окисления становится шестичленной кольцевой структурой, содержащей дисульфидную связь..
Название дитиотреитол происходит от слова эритрит. (четырехуглеродный сахар). Изомером ДТТ является дитиоэритрит. (ДТЕ), который является C3-эпимером DTT.
Что должно ты знаешь о Дитиотреитол хранилище?
Общие условия хранения порошка DTT следует хранить при температуре -20 ℃.. 1Раствор M DTT можно хранить при температуре -20℃ более 2 годы.
ДТТ относительно нестабилен из-за легкого окисления воздухом., однако, срок годности можно продлить замораживанием или обращением в среде инертного газа..
Поскольку нуклеофильность протонированной серы ниже, эффективная восстановительная способность ДТТ также снижается с уменьшением pH.; Трис(2-карбоксиэтил)фосфин HCl (TCEP гидрохлорид) может использоваться как альтернатива DTT в условиях низкого pH., и он также более стабилен, чем DTT.
Каковы Приложения ДТТ?
- Он используется в качестве восстанавливающего агента и агента снятия защиты с тиолированной ДНК.. Тиолированные концевые атомы серы ДНК имеют тенденцию образовывать димеры в растворе., особенно в присутствии кислорода. Эта димеризация значительно снижает эффективность некоторых экспериментов по реакциям сочетания. (например, иммобилизация ДНК в биосенсорах). Добавление ДТТ к раствору ДНК и удаление его после периода реакции может уменьшить димеризацию ДНК..
- Используется для восстановления дисульфидных связей в белках.. Его можно использовать для предотвращения образования внутримолекулярных или межмолекулярных дисульфидных связей между остатками цистеина в белках.. Однако, ДТТ обычно не способен восстанавливать дисульфидные связи, встроенные в структуру белка. (не доступен растворителю). Восстановление таких дисульфидных связей обычно требует денатурации белка. (нагревание при высокой температуре или добавление денатурантов, таких как 6М гуанидин гидрохлорид, 8М мочевина, или 1% Паспорт безопасности).
Наоборот, глубину внедрения можно определить по разнице в скорости восстановления дисульфидной связи в присутствии ДТТ.
Почему DTT сильный сокращение агент?
ДТТ – очень сильный восстановитель., и его восстановительная способность во многом обусловлена конформационной стабильностью его окисленного шестичленного кольца. (содержащий дисульфидную связь).
При pH 7, его окислительно-восстановительный потенциал -0.33 вольты.
Среди них, промежуточное состояние, образующееся в реакции, очень нестабильно, потому что вторая тиоловая группа ДТТ имеет тенденцию соединяться с окисленным атомом серы., поэтому промежуточное состояние быстро трансформируется в циклическую окисленную структуру ДТТ., тем самым завершая восстановление дисульфидной связи.
Восстанавливающая способность DTT зависит от pH и работает только тогда, когда pH превышает 7. Это связано с тем, что только депротонированный тиолат-анион (-С-) является реактивным, в то время как тиол (-Ш.Х.) не является реактивным; pKa меркаптана обычно составляет около 8.3.
Чем опасен ДТТ для организма человека?
Дитиотреитол (DTT) представляет собой низкомолекулярный органический восстановитель, издающий неприятный запах.. Это может быть вредно для здоровья при вдыхании, проглотил, или впитывается через кожу. Воздействие DTT может вызвать ряд проблем со здоровьем., включая:
- Раздражение кожи и глаз: DTT может раздражать кожу и глаза при контакте.. Симптомы могут включать покраснение., зуд, горящий, и слезящиеся глаза.
- Раздражение дыхательных путей: Вдыхание пыли или тумана DTT может вызвать раздражение дыхательных путей., вызывающий кашель, чихание, одышка, и хрипы.
- Сенсибилизация кожи: Длительное или неоднократное воздействие ДТТ может привести к сенсибилизации кожи., где кожа становится сверхчувствительной к ДТТ, вызывая аллергическую реакцию при дальнейшем контакте. Это может проявиться в виде сыпи, волдыри, или отек.
Меры безопасности:
- При работе с DTT надевайте перчатки и средства защиты глаз., особенно в твердых формах или формах с высокой концентрацией.
- Работайте в хорошо вентилируемом вытяжном шкафу, чтобы избежать вдыхания..
- Избегайте контакта с кожей и глазами.
- Тщательно мойте руки после работы с DTT..
- Утилизируйте отходы DTT в соответствии с местными правилами..
Заключение
DTT — ценный инструмент в биологических исследованиях, но важно обращаться с ним осторожно, чтобы избежать потенциальной опасности для здоровья.. Соблюдая рекомендуемые меры безопасности, вы можете минимизировать риски, связанные с использованием DTT.
