Oral Swab Genomic DNA Extraction Kit

1. ส่วนประกอบของชุดรีเอเจนต์

2. พื้นที่จัดเก็บ

ชุดรีเอเจนต์นี้ควรเก็บไว้ที่อุณหภูมิห้อง (15-25℃) and in dry conditions, with a shelf life of 12 เดือน. The DNA extraction purification columns can be stored for 1 year in a cool and dry environment. Proteinase K and อาร์เนส เอ contain preservatives, จึงสามารถขนส่งได้ที่อุณหภูมิห้อง, แต่สำหรับการจัดเก็บระยะยาว, they should be kept at -20℃.

3. คำแนะนำในการใช้ชุดรีเอเจนต์

3.1 This reagent kit is intended for molecular biology research and should not be used for disease diagnosis or treatment.

3.2 Some components in the reagent kit contain irritants. Protective measures such as wearing protective clothing and goggles are recommended.

3.3 During the usage of this reagent kit, a high-speed centrifuge, อ่างอาบน้ำ (อาบน้ำโลหะ), เครื่องผสมน้ำวน, เอทานอลปราศจากน้ำ, น้ำปราศจากไอออนฆ่าเชื้อ, and EP tubes need to be prepared by the user.

4. ข้อมูลเบื้องต้นเกี่ยวกับชุดรีเอเจนต์

The Oral Swab การทำให้บริสุทธิ์ของดีเอ็นเอ Kit provides a rapid and efficient method for purifying DNA from oral swabs, widely used for the extraction of epithelial cells such as oral epithelium.

The Oral Swab DNA Rapid Purification Kit can extract total DNA from oral epithelial cells within 30 นาที. The entire purification process does not require toxic reagents such as phenol-chloroform. The extracted DNA can be directly used for พีซีอาร์, การซับใต้, และแอพพลิเคชั่นอื่น ๆ.

5. หลักและวิธีการทดลอง

6. กระบวนการสกัด

Before Starting the Experiment:

ก. Reagent Buffer B and C อาจตกตะกอนภายใต้สภาวะอุณหภูมิต่ำ. We recommend heating at 65℃for 5 นาที. After the precipitate dissolves, it can be used normally.

บี. ก่อนใช้งาน, add the specified amount of anhydrous ethanol to ล้างบัฟเฟอร์ 1as indicated on the bottle label. Mark a check on the label to indicate the addition of anhydrous ethanol.

ค. บัฟเฟอร์การชะล้างคือ0.1x โซลูชัน TEcontaining minimal amounts of EDTA. If EDTA might affect subsequent experiments, it is advisable to substitute Elution Buffer with sterile deionized water.

1. การจัดการตัวอย่าง:
2. Sampling: Take a sterilized cotton swab, insert it into the mouth, rub against the inner cheek back and forth for more than 20 ครั้ง.
3. Use scissors to cut the head of the cotton swab, place it into a 2 ml centrifuge tube, and add 400ไมโครลิตรของ รีเอเจนต์ Buffer B.
4. เพิ่ม10μl Proteinase K (10 มก./มล) and 10μl RNase A (10 มก./มล), invert thoroughly, incubate at 65°C for 20 นาที, vortex for 10 seconds during incubation.
5. เพิ่ม 400ไมโครลิตรของ รีเอเจนต์ Buffer Cto the lysate, vortex thoroughly.
6. เพิ่ม 200μl of pre-chilled absolute ethanol, ผสมให้เข้ากัน; precipitation may occur, แต่จะไม่ส่งผลต่อการทดลองครั้งต่อไป.
7. Transfer the obtained liquid into a DNA extraction and purification column (ชุด) (approximately 650~700μl each time), เครื่องหมุนเหวี่ยงที่ >8,000 รอบต่อนาทีสำหรับ 1 นาที, discard the collected waste liquid, and reinsert the collection tube into the DNA extraction and purification column (ชุด) for the next step.
8. Place the DNA extraction and purification column (ชุด) into a collection tube, เพิ่ม 300μl ของ Wash Buffer 1, เครื่องหมุนเหวี่ยงที่ >8,000 รอบต่อนาทีสำหรับ 1 นาที, discard the waste liquid, and reinsert the DNA extraction and purification column (ชุด) ลงในท่อเพื่อขั้นตอนต่อไป.

(บันทึก: Ensure that absolute ethanol has been added to Wash Buffer 1.)

7. เพิ่ม 500μl ของ Wash Buffer 1to the DNA extraction and purification column (ชุด), เครื่องหมุนเหวี่ยงที่ 14,000 รอบต่อนาที (20,000×ก) สำหรับ 2 นาที, extend the centrifugation time appropriately to dry the membrane further.
8. Place the DNA extraction and purification column (ชุด) ลงในหลอดหมุนเหวี่ยงใหม่, open the lid, incubate at 65°C for 2 นาที; this step can be extended appropriately to evaporate ethanol as much as possible, preventing residual ethanol from affecting downstream experiments.
9. Elute 100μl ของบัฟเฟอร์การชะล้างลงบนเมมเบรน, เครื่องหมุนเหวี่ยงที่ 12,000 รอบต่อนาทีสำหรับ 2 นาที.

(บันทึก: 1. Eluting DNA with 50μl of Elution Buffer can increase DNA concentration but decrease total DNA yield; 2. Eluted DNA in the eluate can be reapplied to the DNA extraction and purification column, centrifuge again at 12,000 รอบต่อนาทีสำหรับ 2 minutes to increase DNA yield.)