หมายเลขสินค้า：AP2308001 ข้อมูลจำเพาะ：24ต | 48ต | 96ต พื้นที่จัดเก็บ：-20℃
การแนะนำสินค้า：
โรคจะงอยปากและขนนกของ Psittacine (Chlamydia psittaci, ซีพีเอส)” has a round or oval shape with a diameter of approximately 0.3μm. It proliferates in cell vacuoles, forming loosely packed inclusion bodies. Cps is a naturally occurring pathogen that can be transmitted among mammals. ดังนั้น, แต่แรก, รวดเร็ว, and convenient detection of Cps is crucial for diagnosis, ชะลอการแพร่กระจายของโรค, และป้องกันภาวะแทรกซ้อน. This test kit is designed based on the conserved sequences in the Cps gene, ด้วยเงื่อนไขที่เหมาะสมที่สุด, ช่วยให้สามารถวัดปริมาณฟลูออเรสเซนต์ได้อย่างแม่นยำ พีซีอาร์ การทดสอบช่องปาก, ไม้กวาดปิดบัง, เลือด, และตัวอย่างเนื้อเยื่ออื่นๆ จากนก. This facilitates the rapid determination of whether the host is infected with Cps.
เนื้อหาผลิตภัณฑ์：
| ส่วนประกอบรีเอเจนต์ | AN2308001-03（100T） |
| Cps Reaction Solution | 1150ไมโครลิตร |
| Cps Premix Solution | 1150ไมโครลิตร |
| Cps Positive control | 100ไมโครลิตร |
| การควบคุมเชิงลบ | 100ไมโครลิตร |
สภาพการเก็บรักษา：
เก็บที่อุณหภูมิ -20 ℃, อายุการเก็บรักษาเป็นอย่างน้อย 12 เดือน.
การดำเนินการทดลอง：
- การจัดเตรียมตัวอย่าง (พื้นที่เตรียมตัวอย่าง)
1.1 ข้อกำหนดตัวอย่าง:
– ไม้กวาดในช่องปากและในช่องปาก: ใช้สำลีปลอดเชื้อ, สอดเข้าไปในลำคอของนกหรือเสื้อคลุม, หมุนสามครั้ง, วางไว้ในหลอดหมุนเหวี่ยง, ตัดส่วนที่สัมผัสออก, ปิดฝาให้แน่น, และติดป้ายกำกับ. ตัวอย่างที่สามารถทดสอบได้ทันทีควรเก็บไว้ที่อุณหภูมิ 2-8°C ภายใน 24 ชั่วโมง, และตัวอย่างที่ไม่สามารถทดสอบได้ทันทีควรเก็บไว้ที่อุณหภูมิ -20°C.
– เลือดทั้งหมด: ใช้ EDTA เป็นสารกันเลือดแข็ง, หลีกเลี่ยงสารกันเลือดแข็งเฮปาริน, ใช้เลือดสดทั้งหมด, หรือเก็บที่อุณหภูมิ 2-8°C ไม่เกิน 7 วัน, หรือเก็บที่อุณหภูมิ -20°C ไม่เกิน 3 เดือน, หลีกเลี่ยงการแช่แข็งและละลายซ้ำๆ.
– เนื้อเยื่อ: รับประทานกล้ามเนื้อหรือเนื้อเยื่อสดไม่เกิน 100 มก, ใช้น้ำฆ่าเชื้อ200-500μLเพื่อเตรียมเนื้อเยื่อให้เป็นเนื้อเดียวกัน, และดำเนินการเตรียมตัวอย่างต่อไป.
1.2 การจัดเตรียมตัวอย่าง:
อ้างถึง SanshiBio “ชุดสกัด DNA อย่างรวดเร็วของจีโนมสัตว์ (สำหรับการวิเคราะห์ PCR)” คู่มือ (แคตตาล็อก: DP202), หรือชุด/วิธีการสกัดกรดนิวคลีอิกอื่นๆ ที่ตรงตามข้อกำหนดที่เกี่ยวข้อง, สำหรับการสกัดกรดนิวคลีอิกจากตัวอย่างที่ผ่านการแปรรูป. วางกรดนิวคลีอิกตัวอย่างที่สกัดแล้วไว้ในตู้เย็นและทำการทดสอบโดยเร็วที่สุด. เก็บที่อุณหภูมิ 4°C ไม่เกิน 7 วันหรือที่อุณหภูมิ -20°C ไม่เกิน 6 เดือน.
- การเตรียมระบบปฏิกิริยา (พื้นที่ปฏิกิริยา)
2.1 นำส่วนประกอบแต่ละส่วนของชุดออกมา, ละลายอย่างสมบูรณ์ที่อุณหภูมิห้อง, เครื่องหมุนเหวี่ยงสำหรับ 10 วินาที, และปั่นแยกของเหลวภายในผนังท่อและฝาท่อไปที่ด้านล่างของท่อ. เตรียมสารละลายสำหรับปฏิกิริยาตามปริมาณตัวอย่าง (n+2, โดยที่ n คือจำนวนตัวอย่าง, ขอแนะนำให้ตั้งค่า 1 การควบคุมเชิงบวกและ 1 การควบคุมเชิงลบสำหรับการทดสอบแต่ละครั้ง). วิธีการเตรียมเฉพาะ: เอา (n+2) reaction tubes containing Cps premix solution, add 11.5µL of Cps reaction solution to each tube, ใช้ปิเปตเพื่อผสมให้ละเอียด, 23µL ต่อหลุม, และเก็บในตู้เย็น.
2.2 จากนั้นเพิ่มตัวควบคุมเชิงลบ 2μL ตามลำดับ, ตัวอย่างกรดนิวคลีอิกที่สกัดได้, and Cps positive control to the reaction solution. ปิดฝาท่อ, ทำบันทึก, และปริมาตรรวมของแต่ละปฏิกิริยาคือ 25ไมโครลิตร. ผสมให้เข้ากัน, เครื่องหมุนเหวี่ยงสำหรับ 10 วินาที, และทำการทดลองขยายสัญญาณด้วยเครื่องมือ PCR.
- การขยาย PCR (พื้นที่การขยายและการวิเคราะห์ผลิตภัณฑ์)
การเสียสภาพล่วงหน้าที่ 95°C สำหรับ 2 นาที; การเสียสภาพที่ 95°C สำหรับ 10 วินาที, การหลอมและยืดที่อุณหภูมิ 60°C สำหรับ 35 วินาที, 40 รอบ. เก็บสัญญาณเรืองแสงที่อุณหภูมิ 60°C. เลือกช่องเรืองแสง FAM (ใช้เครื่องมือ PCR เชิงปริมาณเรืองแสงแบบเรียลไทม์ เช่น ซีรี่ส์ ABI, ในกรณีที่จำเป็น, ติดต่อผู้ผลิตหรือเพิ่มสีย้อมสำหรับแก้ไข ROX; มิฉะนั้น, ปฏิบัติตามขั้นตอนปกติ).
- การตีความผลลัพธ์
4.1 เงื่อนไขสำหรับความถูกต้องของการทดสอบ:
การควบคุมเชิงบวก ค่า Ct ของช่อง FAM < 28 และก “ส”-สังเกตเส้นโค้งการขยายรูปทรง; การควบคุมเชิงลบไม่มีค่า Ct หรือค่า Ct ≥ 38 และไม่ “ส”-เส้นโค้งการขยายรูปทรง, การทดลองนั้นถูกต้อง. มิฉะนั้น, ทำการทดลองซ้ำ; หากการทดสอบซ้ำยังคงไม่ถูกต้อง, ติดต่อเจ้าหน้าที่ด้านเทคนิคของผู้ผลิต.
4.2 การตีความผลลัพธ์ตัวอย่าง:
ค่ากะรัต ≤ 33 และ “ส”-shaped amplification curve indicates Cps positive;
ค่ากะรัตระหว่าง 33 < กะรัต < 38 ถือว่าน่าสงสัย, และแนะนำให้ทำการทดสอบซ้ำ. หากช่อง FAM ทดสอบค่า Ct อีกครั้ง < 33 หลังจากไม่รวมการปนเปื้อนของละอองลอยและมีเส้นโค้งการขยายที่ชัดเจน, it is considered Cps positive, มิฉะนั้นจะถือว่าเป็นเชิงลบ;
ไม่มีค่า Ct หรือค่า Ct ≥ 38 และไม่ “ส”-shaped amplification curve indicate Cps negative.
ข้อควรระวัง：
- เพื่อป้องกันการปนเปื้อน, การทดลองควรแบ่งพาร์ติชันอย่างเคร่งครัด, และการแยกทางกายภาพระหว่างพาร์ติชันเป็นที่ต้องการเพื่อหลีกเลี่ยงการปนเปื้อนข้ามเนื่องจากปัจจัยของมนุษย์. สวมเสื้อกาวน์แล็บและถุงมือยางในระหว่างการทดลอง, ใช้เครื่องมืออย่างอิสระในด้านต่างๆ, and change gloves and lab coats when needed. หลังจาก PCR, อย่าเปิดฝาทันที; เปิดหลังจากเย็นเพียงพอแล้วเพื่อลดการปนเปื้อนของละอองลอย.
- ละลายรีเอเจนต์ให้หมดก่อนใช้งาน, แต่หลีกเลี่ยงการแช่แข็ง-ละลายซ้ำๆ. หลอดปฏิกิริยา PCR ที่ให้มาในชุดคือ 0.2 มล; หากจำเป็นต้องเปลี่ยน, ถ่ายโอนหลังจากการละลายเสร็จสมบูรณ์. ปฏิบัติตามคำแนะนำในการเตรียมรีเอเจนต์และการเติมตัวอย่างอย่างเคร่งครัด. เวิร์กสเตชัน, เครื่องหมุนเหวี่ยง, ปิเปต, และอุปกรณ์อื่นๆ ควรฆ่าเชื้อด้วยน้ำยาฆ่าเชื้อที่มีคลอรีนเป็นประจำ, แอลกอฮอล์, สารชำระล้างกรดนิวคลีอิก, หรือแสงยูวี.
- ผลลัพธ์ที่เป็นลบไม่ได้หมายความว่าโฮสต์ไม่ได้ติดไวรัสเสมอไป. ตัวอย่างมีคุณภาพต่ำ, โหลดไวรัสต่ำ, หรือมีสารยับยั้งอย่างแรง (เช่นแอลกอฮอล์, ยาฆ่าเชื้อ, สารกันเลือดแข็ง, ฯลฯ) อาจส่งผลให้สกัดกรดนิวคลีอิกไม่สำเร็จ (การตรวจจับ) และก “เชิงลบ” ผลลัพธ์. ปฏิบัติตามเกณฑ์การตีความผลลัพธ์, และเมื่อมีผลลัพธ์ที่น่าสงสัย, อันดับแรก ไม่รวมการปนเปื้อนของละอองลอย. หากมีคำถามอื่นๆ, ติดต่อเจ้าหน้าที่ด้านเทคนิคของผู้ผลิต.
- ผลิตภัณฑ์นี้ใช้เพียงครั้งเดียวเท่านั้น. ส่วนประกอบในรีเอเจนต์ไวต่อแสงธรรมชาติ; หลีกเลี่ยงการสัมผัสแสงระหว่างการบรรจุและการเก็บรักษา. หลังจากบรรจุภัณฑ์, อย่าแช่แข็ง-ละลายซ้ำๆ. สำหรับใช้ในการวิจัยทางวิทยาศาสตร์เท่านั้น; ไม่ใช่เพื่อการวินิจฉัยทางคลินิกหรือเพื่อวัตถุประสงค์อื่น.
รีวิว
ยังไม่มีบทวิจารณ์