Sanshibio 2× โพรบ qPCR มิกซ์

2× โพรบ qPCR มิกซ์

หมายเลขสินค้า：EH002 ข้อมูลจำเพาะ：1mL Storage: เก็บที่อุณหภูมิ -20°C

การแนะนำสินค้า：

This product is a specialized reagent for Real-Time qPCR using the probe method. It contains an antibody-blocked hot-start enzyme that effectively suppresses non-specific amplification caused by primer misannealing or primer dimer formation at low temperatures, thereby enhancing the specificity of the amplification reaction. This product exhibits high amplification efficiency and detection sensitivity, allowing for the generation of a robust standard curve across a broad quantification range, ทำให้สามารถวัดปริมาณได้อย่างแม่นยำ. Moreover, it is compatible with various fluorescence quantitative พีซีอาร์ instruments, รวมถึงจาก Applied Biosystems, เอพเพนดอร์ฟ, ไบโอ-ราด, โรช, และแบรนด์ในประเทศอื่นๆ.

เนื้อหาผลิตภัณฑ์：

บันทึก：ROX Reference Dye can be obtained separately or through the manufacturer to correct inter-well fluorescence signal discrepancies in certain company’s Real-Time PCR amplifiers. ROX Reference Dye I is suitable for ABI PRISM 7000/7700/7300/7900HT and Step One Plus Real-Time PCR Systems, ฯลฯ. ROX Reference Dye II is suitable for 7500 ระบบ PCR แบบเรียลไทม์, 7500 ระบบ PCR แบบเรียลไทม์ที่รวดเร็ว, สตราทาจีน Mx3000P, Mx3005P, และเอ็มเอ็กซ์4000, ฯลฯ. The final concentration of ROX Reference Dye I and II is 1×. Real-time fluorescence quantitative PCR amplifiers such as LightCycler, Thermal Cycler Dice ระบบเรียลไทม์ II, และระบบ Smart Cycler ไม่จำเป็นต้องใช้ ROX Reference Dye.

พื้นที่จัดเก็บ:

เก็บที่อุณหภูมิ -20°C, โดยมีอายุการเก็บรักษาขั้นต่ำที่ 12 เดือน.

คำจำกัดความของกิจกรรม:

การใช้ DNA อสุจิของ mahi-mahi ที่เปิดใช้งานเป็นเทมเพลต/ไพรเมอร์, กิจกรรมถูกกำหนดให้เป็น 1 หน่วย (ยู) ของวัสดุที่ไม่ละลายกรดรวมอยู่ด้วย, โดยการรับขึ้น 10 nmol ของนิวคลีโอไทด์ภายใน 30 นาทีที่ 74°C.

ควบคุมคุณภาพ:

ผลิตภัณฑ์นี้ผ่านการทดสอบคุณภาพและปราศจากฤทธิ์ของดีออกซีไรโบนิวคลีเอสเอ็นโดนิวคลีเอส, กิจกรรมของดีออกซีไรโบนิวคลีเอส เอ็กโซนิวคลีเอส, และการปนเปื้อนของไรโบนิวคลีเอส. เนื้อหาที่เหลือของ DNA จีโนมของโฮสต์อยู่ด้านล่าง 10 สำเนา.

การใช้ผลิตภัณฑ์:

Real-time fluorescence quantitative singleplex or multiplex (2-4 channels) คิวพีซีอาร์ (probe method) amplification of DNA or cDNA; absolute quantification qPCR.

คำแนะนำสำหรับการใช้งาน:

• Equilibrate the required reagents at room temperature until fully dissolved, gently mix well (อย่าน้ำวน), use after a brief centrifugation to prevent excessive bubble formation, and avoid repeated freeze-thaw cycles. หากใช้บ่อยๆ, เก็บที่อุณหภูมิ 4°C. Prepare the PCR reaction mixture according to the components listed below (prepare the reaction mixture on an ice box):

บันทึก：ปริมาณของส่วนประกอบแต่ละอย่างในระบบปฏิกิริยาสามารถปรับได้ตามความต้องการที่แท้จริง. Users need to decide whether to add ROX Reference Dye based on the actual model being used.

• โดยทั่วไปแล้ว, สามารถใช้วิธีสองขั้นตอนสำหรับปฏิกิริยาได้; if the two-step amplification is not satisfactory, a three-step method can be used to set up the PCR reaction program.

บันทึก: สภาวะของปฏิกิริยาสามารถปรับและปรับให้เหมาะสมตามความต้องการที่แท้จริงได้.

• หลังจากปฏิกิริยาเสร็จสิ้น, analyze the experimental results. For detailed analysis methods, refer to the PCR amplification instrument operating manual.

ข้อควรระวัง:

1. The concentration of the primers used can be adjusted within the range of 0.2-1.0 ไมโครเมตร, and the DNA template can be appropriately adjusted based on its concentration.
2. Choose an appropriate annealing (ส่วนขยาย) temperature based on the primer design. Typically, the Tm value of the primers is designed to be around 60°C. For primers with lower annealing temperatures or for amplifying long fragments exceeding 200 bp, ขอแนะนำวิธีสามขั้นตอน.
3. The concentration of the probe used can be optimized within the range of 0.1-0.4 ไมโครเมตร. Conduct experiments with gradient concentrations to find the optimal combination of primers and probes. The use of probes depends on the Real Time PCR instrument, probe type, and fluorescent label type. Refer to the instrument manual or specific requirements for each fluorescent probe for adjustments.
4. Use dedicated areas and pipettors before and after amplification, ใส่ถุงมือ, และเปลี่ยนบ่อยๆ. After PCR amplification, do not open the reaction tubes directly. Place them at 4°C or -20°C to cool sufficiently before opening to minimize the risk of PCR product contamination in the experimental environment.