Sanshibio Taq DNA Polymerase ที่เริ่มต้นอย่างรวดเร็ว

Taq Hot-Start DNA Polymerase

หมายเลขสินค้า：EH001 ข้อมูลจำเพาะ：500U/1000U/5000U Storage: เก็บที่อุณหภูมิ -20°C

การแนะนำสินค้า：

This product is an antibody-blocked hot-start enzyme that suppresses non-specific amplification caused by primer misannealing or primer dimer formation at low temperatures. It is suitable for Hot Start พีซีอาร์. Since the antibody is inactivated during the initial DNA denaturation step of the PCR reaction, there is no need for special deactivation treatment; it can be used under standard PCR conditions. The PCR product amplified using this product has an ‘A’ base added to the 3′ จบ, making it directly clonable into a T-Vector. It can also be cloned into blunt-end vectors after end polishing and phosphorylation.

เนื้อหาผลิตภัณฑ์：

พื้นที่จัดเก็บ:

เก็บที่อุณหภูมิ -20°C, โดยมีอายุการเก็บรักษาอย่างน้อย 12 เดือน.

คำจำกัดความของกิจกรรม:

การใช้ DNA อสุจิของ mahi-mahi ที่เปิดใช้งานเป็นเทมเพลต/ไพรเมอร์, กิจกรรมถูกกำหนดให้เป็น 1 หน่วย (ยู) ของวัสดุที่ไม่ละลายกรดรวมอยู่ด้วย, โดยการรับขึ้น 10 nmol ของนิวคลีโอไทด์ภายใน 30 นาทีที่ 74°C.

ควบคุมคุณภาพ:

ผลิตภัณฑ์นี้ผ่านการทดสอบคุณภาพและปราศจากฤทธิ์ของดีออกซีไรโบนิวคลีเอสเอ็นโดนิวคลีเอส, กิจกรรมของดีออกซีไรโบนิวคลีเอส เอ็กโซนิวคลีเอส, และการปนเปื้อนของไรโบนิวคลีเอส. เนื้อหาที่เหลือของ DNA จีโนมของโฮสต์อยู่ด้านล่าง 10 สำเนา.

การใช้ผลิตภัณฑ์:

Hot Start PCR; การกำหนดลำดับดีเอ็นเอ.

คำแนะนำสำหรับการใช้งาน:

• Allow the required reagents to equilibrate at room temperature until fully dissolved. Gently mix well (อย่าน้ำวน), and use after brief centrifugation to prevent excessive bubble formation and avoid repeated freeze-thaw cycles. If frequently used, เก็บที่อุณหภูมิ 4°C. Prepare the PCR reaction mixture according to the following components (prepare the reaction mixture on an ice box):

ระบบปฏิกิริยาที่แนะนำ:

บันทึก: ปริมาณของส่วนประกอบแต่ละอย่างในระบบปฏิกิริยาสามารถปรับได้ตามความต้องการที่แท้จริง.

• โดยทั่วไปแล้ว, สามารถใช้วิธีสองขั้นตอนสำหรับปฏิกิริยาได้; if the two-step amplification is not satisfactory, a three-step method can be used to set up the PCR reaction program.

บันทึก: สภาวะของปฏิกิริยาสามารถปรับและปรับให้เหมาะสมตามความต้องการที่แท้จริงได้.

• หลังจากปฏิกิริยาเสร็จสิ้น, analyze the experimental results. For detailed analysis methods, refer to the PCR amplification instrument operating manual.

ข้อควรระวัง:

1. Please choose an appropriate annealing (ส่วนขยาย) temperature based on the primer design. Typically, the Tm value of the primers is designed to be around 60°C. For primers with lower annealing temperatures or for amplifying long fragments exceeding 200 bp, ขอแนะนำวิธีสามขั้นตอน. The extension time can be adjusted based on the length of the PCR product, GC content, and other factors. The extension time per kb of product is closely related to template complexity. Simple templates use 20 วินาที, normal templates use 30 วินาที, and complex templates use 1 นาที.
2. The PCR reaction conditions should be set differently based on factors such as template, ไพรเมอร์, length of the PCR product, และเนื้อหา GC. The final concentration of commonly used primers can be adjusted within the range of 0.2-1.0 ไมโครเมตร. The DNA template concentration can also be adjusted based on its concentration. สำหรับเทมเพลตที่ซับซ้อนหรือเนื้อหา GC สูง, consider extending the denaturation/annealing or extension times, and increasing denaturation/annealing temperature.
3. Use dedicated areas and pipettors before and after amplification, ใส่ถุงมือ, และเปลี่ยนบ่อยๆ. After PCR amplification, do not open the reaction tubes directly. Place them at 4°C or -20°C to cool sufficiently before opening to minimize the risk of PCR product contamination in the experimental environment.