บีซีเอ โปรตีน ชุดทดสอบ
แมว: PC0020
ขนาด: 500ต (เครื่องอ่านไมโครเพลท) / 50ต (สเปกโตรโฟโตมิเตอร์)
พื้นที่จัดเก็บ: มาตรฐานโปรตีน BSA จะถูกเก็บไว้ที่ 4 ℃ สำหรับ 3 เดือน， หรือที่ -20°C เป็นเวลา 1 ปี, รีเอเจนต์อื่นๆ เก็บไว้ที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 1 ปี
ส่วนประกอบ:
| 500ต (50ต) | พื้นที่จัดเก็บ | |
| รีเอเจนต์ BCA | 100มล | RT |
| ด้วยรีเอเจนต์ | 3มล | RT |
| พีบีเอสเจือจาง | 30มล | RT |
| มาตรฐานบีเอสเอ(5มก./มล. บีเอสเอ) | 1มล | -20℃ |
รายละเอียดสินค้า:
- หลักการของชุดวิเคราะห์โปรตีน BCA:
- ขึ้นอยู่กับการลดลงของ Cu^2+ เป็น Cu^+ โดยโปรตีน.
- BCA ก่อตัวเป็นสารเชิงซ้อนสีม่วง-น้ำเงินโดยมี Cu^+ ภายใต้สภาวะที่เป็นด่าง.
- ตรวจพบการดูดซับที่ 562 นาโนเมตร.
- การหาปริมาณโปรตีนทำได้โดยการเปรียบเทียบการดูดกลืนแสงกับเส้นโค้งมาตรฐาน.
- ความเข้ากันได้กับผงซักฟอก:
- ผงซักฟอกทั่วไปเช่น เอกสารความปลอดภัย, ไทรทัน เอ็กซ์-100, และ Tween ไม่ส่งผลต่อผลการทดสอบ.
- ความไวต่อตัวแทนบางอย่าง:
- ได้รับผลกระทบจากสารคีเลต (อีดีทีเอ, กฟผ), สารรีดิวซ์ (ดีทีที, เมอร์แคปโตเอทานอล), และไขมัน.
- การพิจารณาพื้นหลังสูง:
- ในกรณีที่มีพื้นหลังสูงเนื่องจากการเจือจางตัวอย่างหรือไลเซต, พิจารณาใช้ชุดทดสอบโปรตีนของแบรดฟอร์ด.
มาตรการ
ก. ไมโครเพลทผู้อ่าน
- โซลูชั่นการทำงานของ BCA
เจือจาง 1 ปริมาตรของ Cu Reagent ด้วย 50 ปริมาตรของรีเอเจนต์ BCA (1:50). หากเกิดฝนตก, มันจะหายไปหลังจากผสม. รีเอเจนต์ทำงานของ BCA สามารถเก็บไว้ที่ RT ได้ 24 ชั่วโมง.
- โซลูชันการทำงานมาตรฐาน BSA
เจือจาง BSA 10ไมโครลิตร (5มก./มล) ด้วย PBS จนถึง100μl (0.5มก./มล). เพิ่ม 0, 2, 4, 6, 8, 12, 16, 20โซลูชันการทำงานมาตรฐาน µl BSA (0.5มก./มล) ถึง 96 จานหลุม, เพิ่ม PBS จนถึง20μl.
- เจือจางตัวอย่างอย่างเหมาะสม. เป็นการดีกว่าถ้าทำการไล่ระดับสีหลายๆ แบบ, เช่น 2, 4, และ 8 การเจือจางครั้ง. เพิ่มตัวอย่าง 20μl ลงใน 96 หลุม
บันทึก: เพื่อหลีกเลี่ยงข้อผิดพลาดในขั้นตอนการทำงาน, ทำให้จุดตัวอย่างอยู่ที่ 1/2 หลังเส้นมาตรฐานให้มากที่สุด, เนื่องจากปิเปตมีข้อผิดพลาดอย่างมากเมื่อเก็บตัวอย่างจำนวนเล็กน้อย, และจุดหน้าเส้นมาตรฐานอาจจะไม่ค่อยแม่นยำนัก.
- ปฏิกิริยาบีซีเอ
เพิ่มสารละลายการทำงาน BCA 200μl ลงไป 96 จานหลุม, และฟักที่อุณหภูมิ 37°C เป็นเวลา 15-30 นาที. วัด
การดูดกลืนแสงที่ 562 นาโนเมตร, และวาดเส้นโค้งมาตรฐานเพื่อคำนวณปริมาณโปรตีนของตัวอย่าง. หลีกเลี่ยงการระเหยของน้ำไม่ให้ส่งผลต่อผลการทดสอบเมื่อใช้ตู้ฟัก.
บี. สเปกโตรโฟโตมิเตอร์
- โซลูชั่นการทำงานของ BCA
เจือจาง 1 ปริมาตรของ Cu Reagent ด้วย 50 ปริมาตรของรีเอเจนต์ BCA (1:50). หากเกิดฝนตก, มันจะหายไปหลังจากผสม. รีเอเจนต์ทำงานของ BCA สามารถเก็บไว้ที่ RT ได้ 24 ชั่วโมง.
- โซลูชันการทำงานมาตรฐาน BSA
เจือจาง BSA 100μl (5มก./มล) กับ PBS จนกระทั่ง 1 มล (0.5มก./มล).
- เตรียมแปด. (หรือมากกว่านั้น) 5หลอดเซนตริฟิวจ์ มล, และเติมรีเอเจนต์ดังนี้:
| หลอดหมุนเหวี่ยง No. | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 (ตัวอย่าง 1) | 8 (ตัวอย่าง 2) | 9 (ตัวอย่าง 3) |
| โซลูชันการทำงานมาตรฐาน BSA | 0 | 40ไมโครลิตร | 80ไมโครลิตร | 120ไมโครลิตร | 160ไมโครลิตร | 200ไมโครลิตร | 200ไมโครลิตร | 200ไมโครลิตร | 200ไมโครลิตร |
| พีบีเอส | 200ไมโครลิตร | 160ไมโครลิตร | 120ไมโครลิตร | 80ไมโครลิตร | 40ไมโครลิตร | 0 | 0 | 0 | 0 |
| โซลูชั่นการทำงานของ BCA | 2มล | 2มล | 2มล | 2มล | 2มล | 2มล | 2มล | 2มล | 2มล |
บันทึก
ฟักตัวที่ 37 ℃ เป็นเวลา 15-30 นาที. วัดการดูดกลืนแสงที่ 562 นาโนเมตร, และวาดเส้นโค้งมาตรฐานเพื่อคำนวณปริมาณโปรตีนของตัวอย่าง. หลีกเลี่ยงการระเหยของน้ำไม่ให้ส่งผลต่อผลการทดสอบเมื่อใช้ตู้ฟัก.
- Cu Reagent และ PBS Dilution สามารถเก็บไว้ที่ 2-8 ℃ เมื่อไม่ได้ใช้รีเอเจนต์เป็นเวลานาน. เมื่อรีเอเจนต์ BCA ตกผลึกและตกตะกอนที่อุณหภูมิต่ำ, สามารถบ่มที่อุณหภูมิ 37°C เพื่อให้ละลายได้หมดโดยไม่กระทบต่อการใช้งาน.
- หากตัวอย่างมีสารรบกวนจำนวนมาก, โปรดใช้ BCA Protein AssayKit (PC0020).
- เพื่อความปลอดภัยและสุขภาพของคุณ, กรุณาสวมถุงมือและหน้ากากผ้ากอซ
สินค้าที่เกี่ยวข้อง
PC0001 สารละลายมาตรฐานโปรตีน (5มก./มล. บีเอสเอ) PC0021 รีเอเจนต์ BCA
PC0030 Lowry Protein Assay Kit PC0010 Bradford Protein Assay Kit R0010 บัฟเฟอร์ RIPA(สูง)
R0050 ชุดสกัดโปรตีนนิวเคลียร์ P1200 SDS-PAGE ชุดเจล
T1070 Tris-Glycine รันนิ่งบัฟเฟอร์,5×
PR1600 พรีสเตนโปรตีนมาร์กเกอร์(14.4kD-97.4kD) P1015 บัฟเฟอร์การโหลด SDS-PAGE,4×(กับดีทีที) D1060 WB บัฟเฟอร์การถ่ายโอน,10×
PE0010 ECL Western Blotting Substrate
รีวิว
ยังไม่มีบทวิจารณ์