ชุดทดสอบไกลโคเจน

บันทึก: ใช้ตัวอย่างที่แตกต่างกันสองหรือสามตัวอย่างเพื่อทำนายก่อนการทดสอบ.

อุปกรณ์การดำเนินงาน: Spectrophotometer/ microplate reader

หมายเลขแค็ตตาล็อก: BC0345

ขนาด:100ที/96ส

ส่วนประกอบ:

Extract reagent: 100มล.×1, storage at 4℃.

รีเจนท์ 1: ผง×1, storage at 4℃.10 mg of glucose, เพิ่ม 1 mL of distilled water to dissolve it before use. Diluted with distilled water to 0.1 mg/mL glucose solution for standby, ready to use. 0.1 mg/mL glucose standard solution, storage at 4℃.

Regent Ⅱ: ผง×1, storage at 4℃.

วิธีแก้ปัญหาการทำงาน: Pour 6 mL of distilled water into Reagent Ⅱ and slowly pour 24 mL of concentrated sulfuric acid. Dissolve and mix thoroughly before use. Unused reagents are valid at 4 °C for one week.

รายละเอียดสินค้า

Glycogen is a high molecular polysaccharide composed of glucose units. It is one of the main storage forms of sugar. It is mainly stored in the liver and muscle as backup energy, and is called liver glycogen and muscle glycogen, ตามลำดับ. Glycogen can regulate blood glucose concentration. Glycogen can be synthesized in the liver when blood glucose rises. When blood sugar decreases, liver glycogen is broken down into glucose to supplement blood sugar. ดังนั้น, liver glycogen is important to maintain the relative balance of blood sugar. Muscle glycogen is a form of glycogen storage in muscles. When lots of blood sugar is consumed during strenuous exercise, muscle glycogen cannot be broken down directly into blood sugar. It must first be broken down to produce lactic acid, which is circulated to the liver with the blood, and transformed into liver glycogen through glycogen glucose.

Determination principle: anthrone method. Glycogen is extracted with strong alkaline extract, and the glycogen content is measured using an anthrone method under strongly acidic conditions.

รีเอเจนต์และอุปกรณ์ที่จำเป็นแต่ไม่ได้จัดเตรียมไว้ให้.

สpectrophotometer/ microplate reader, เครื่องหมุนเหวี่ยงบนโต๊ะ, ปิเปตโอน, คิวเวตต์แก้วขนาดเล็ก/จาน 96 หลุม, mortar, concentrated sulfuric acid (H2SO4) และน้ำกลั่น.

ขั้นตอน:

ฉัน. Sample extraction:

1. Cells or bacteria: เก็บรวบรวม 5-10 million bacteria or cells into a centrifuge tube, discard the supernatant after centrifugation; add 0.75mL of extraction reagent to ultrasonically break bacteria or cells (พลัง 20% or 200W, ultrasonic 3s, 10s interval, ทำซ้ำ 30 ครั้ง) ); Transfer to a 10mL tube, boil in a boiling water bath for 20min (close tightly to prevent water loss), shake the tube every 5 min to fully mix; take out the tube and cool, take up to 5mL with distilled water and mix. Centrifuge at 8000g and 25℃ for 10min, take the supernatant for testing.

2. เนื้อเยื่อ: Weigh 0.1~0.2g sample and put it in a 10 mL tube, เพิ่ม 0.75 mL of Extraction solution, boil in boiling water bath for 20 นาที (close tightly to prevent water loss), shake the test tube every 5 min to fully mix. After all the tissue dissolved, take out the tube and cool down, then make up to 5 มล. ด้วยน้ำกลั่น. Centrifuge at 8000g and 25℃ for 10 นาที, take the supernatant for testing.

ครั้งที่สอง. การกำหนด ขั้นตอน:

1. Preheat the สpectrophotometer/ microplate reader for 30 นาที, ปรับความยาวคลื่นเป็น 620 นาโนเมตร, ตั้งค่าศูนย์ด้วยการกลั่น
2. Sampling table (add the following regents in EPtube)

ผสมให้เข้ากัน, place in a boiling water bath for 10 นาที (close tightly to prevent water loss), cool, and take 200 μL into micro glass cuvette/96-well plate to read the absorbance of the blank tube, standard tube, and measurement tube at 620 นาโนเมตร, and record them as A1, A2, and A3. The blank tube and standard tube need only be tested once.

สาม. การคำนวณ:

1. น้ำหนักตัวอย่าง

Sorbitol (mg/g fresh weight) -(Cs×V1)×(A3-A1)÷(A2-A1)÷(W×V1÷V2)÷1.11

= 0.450×(A3-A1)÷（A2-A1)۞W

2. ความเข้มข้นของโปรตีน

Sorbitol (มก./มก. โปรต) - (Cs×V1)×(A3-A1) ÷(A2-A1) ÷(V1×Cpr) ÷1.11

=0.09×(A3-A1) ÷（A2-A1) __ซีพีอาร์

3. The number of bacteria or cells:

Sorbitol（mg/104 cell）= (Cs×V1)×(A3-A1)÷(A2-A1)÷(number of bacteria or cells×V1÷V2) ÷1.11

= 0.450×(A3-A1)÷（A2-A1)÷number of bacteria or cells

1.11: It is a constant that glucose content converted to glycogen content, That is, the color of 111 μg of glucose with anthrone reagent is equivalent to that of 100 μg of glycogen with anthrone reagent.

Cs: the concentration of standard, 0.1 mg/mL V1: ปริมาณตัวอย่าง, 0.06 มล;

V2: Total sample volume, 5 มล;

ซีพีอาร์: ตัวอย่างความเข้มข้นของโปรตีน, มก./มล; ว: น้ำหนักตัวอย่าง, ก

Number of bacteria or cells: 104 as the unit, หมื่น

บันทึก:

If A is greater than 1.4, dilute the sample with distilled water and multiply it by the corresponding dilution factor in the calculation formula.

สินค้าที่เกี่ยวข้อง

BC2450/BC2455 Plant Tissue Fructose Content Assay Kit

BC2540/BC2545 Cellulase(CL) ชุดทดสอบกิจกรรม

BC0330/BC0335 Trehalose Content Assay Kit

BC2510/BC2515 Trehalase Activity Assay Kit

BC2520/BC2525 Sorbitol Content Assay Kit

BC2530/BC2535 Sorbitol Dehydrogenase(SDH) ชุดทดสอบกิจกรรม

BC0230/BC0235 Reducing Sugar(RS) ชุดทดสอบเนื้อหา

BC2490/BC2495 Blood Glucose Content Assay Kit

Technical Specification:

The detection limit: 0.002 มก./มล

The linear range: 0.003125-0.25 มก./มล