介紹
該試劑盒專為總 RNA 純化而設計, 包括miRNA和其他小RNA分子 (18恩特), 來自培養細胞以及各種動物和人體組織, 包括難以裂解的組織樣本. 或者, 富含 miRNA 的部分和總 RNA (>200恩特) 級分可以單獨純化. 該套件結合了苯酚/胍-基於樣品的裂解和基於矽膠膜的總 RNA 純化. MagZol試劑, 包含在套件中, 是苯酚和硫氰酸胍的單相溶液, 旨在促進組織裂解, 抑制RNA酶, 也可以透過有機萃取從裂解物中去除大部分細胞 DNA 和蛋白質.
細節
規格
| 特徵 | 規格 |
| 主要功能 | 分離 miRNA 和其他小 RNA 分子(18恩特), 來自培養細胞以及各種動物和人體組織, 使用 MagZol 試劑和色譜管柱 |
| 應用領域 | RT-聚合酶鍊式反應, 印跡雜交, 多聚A+純化, 核酸保護與體外翻譯 |
| 純化方法 | 小型的 旋轉柱 |
| 淨化技術 | 二氧化矽技術 |
| 工藝方法 | 手動的 (離心或真空) |
| 樣品類型 | 動物組織, 貼壁細胞, 懸浮細胞, 細菌, ETC |
| 樣品量 | 真核培養細胞: ≤ 10^7, 動物組織:<100毫克, 酵母培養細胞:<5 x10^7, 細菌:<10^9 |
| 洗脫體積 | ≥15μl |
| 每次運行時間 | ≤40分鐘 |
| 每根柱的載液量 | 800微升 |
| 柱結合率 | 100微克 |
原則
Hipure矽膠柱以高結合力為基礎的玻璃纖維濾膜. 高濃度電離劑條件下 (例如鹽酸胍或異硫氰酸胍), 濾膜可透過氫鍵和靜電吸附核酸, 而蛋白質和其他雜質則沒有被吸附和去除. 清洗吸附有核酸的濾膜，去除殘留的蛋白質和鹽分. 最後, 吸附在濾膜上的核酸可以用低鹽緩衝液洗掉 (例如緩衝液TE) 或水. 所得的核酸純度高，可直接用於各種下游實驗.
該試劑盒結合了酸/胍 (麥格佐爾) 玻璃纖維過濾膜純化萃取技術, 可提高複雜樣品和低RNA含量樣品的萃取效果. 樣品用 MagZol 試劑和氯仿處理後, 上清液中添加乙醇以提供適當的結合條件, 然後轉移至純化柱並離心. 大分子RNA可有效與膜結合. 收集含有小RNA的濾液, 加入更多的乙醇來調控小RNA的結合能力, 污染物可以是有效的F透過第二次清潔很快就被沖走了. 最後, 用無 RNase 的水洗脫純化的 RNA.
優點
- 高品質 – 一步 RNA萃取 試劑與矽膠柱結合可獲得最高濃度
- 快速地 – 可以提取多個樣本 40 分分鐘
- 適用性高 – 樣本包括動物, 植物, 細菌, 細胞, ETC.
- 高濃度 – 有效去除大分子RNA, 富集小RNA並提高靈敏度
套件內容
| 內容 | R431002 | R431003 |
| 淨化時間 | 50 準備工作 | 250 準備工作 |
| HiPure RNA 迷你柱 | 100 | 2 X 250 |
| 2毫升收集管 | 100 | 2 X 250 |
| MagZol試劑 | 60 毫升 | 270 毫升 |
| 緩衝區RWC | 20 毫升 | 80 毫升 |
| 緩衝器 RW2* | 20 毫升 | 2 X 50 毫升 |
| 無核糖核酸酶水 | 10 毫升 | 30 毫升 |
儲存和穩定性
MagZol 試劑到達後應儲存於 2-8°C 下. 然而, 短期儲存 (取決於 24 週) 在室溫下 (15-25℃) 不影響其性能. 其餘試劑盒成分可在室溫下保存 (15-25℃) 並且至少穩定 18 在這些條件下幾個月.
評論
還沒有評論.