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介紹
蛋白酶 K 是一種穩定的絲胺酸蛋白酶，具有廣泛的底物特異性. 即使存在去垢劑，它也會降解許多天然狀態的蛋白質. 它不被金屬離子激活, 螯合劑 (例如, 乙二胺四乙酸), 巰基試劑, 或透過 Tripsinor 胰凝乳蛋白酶抑制劑. 在較寬的 pH 範圍內保持穩定 (4-12.5), 在 pH 6.5–9.5 時具有最佳活性. 可以透過添加變性劑來刺激活性 (安全資料表 和尿素). 溫度高於 70°C 時酵素會快速變性. 在鹼性 pH 值下，酵素的自溶作用逐漸發生. 然而, 蛋白酶 K 不會因自溶而完全失活. 一些酶片段繼續保持其完整的蛋白水解活性, 即使經過廣泛的自溶.
蛋白酶 K 經常在分子生物學應用中用於消化不需要的蛋白質, 例如微生物 DNA 或 RNA 製劑中的核酸酶, 培養細胞, 和植物. 在 pH 值的核酸製劑中，此酵素的使用濃度通常為 50–200 μg/ml 7.5-8.0 和37-55°C. 孵化時間各不相同 30 分鐘到 18 小時.
細節
規格
| 特徵 | 規格 |
| 分子量 | 29.3kDa |
| 等電點 | 8.9 |
| 純度 | 95% (SDS-PAGE分析) |
| 具體活性 | ≥600單位/毫升 |
| 溫度特性 | 70℃ (最高活動溫度) (有效活動溫度為37-70℃) |
| PH特性 | 4.0-12.0, 最佳範圍為ph7.5-11.5. 消化不良的汁液, 65 度 |
| 保存條件 | 建議低溫保存，最大程度保證活性的穩定性 (常溫運輸或儲存不會降低酵素活性). 常溫下保存期限長達1年. |
| 使用方法 | 將蛋白酶K加入消化液或裂解液中至終濃度為50-200ug/ml，並在55~70℃下孵育. 反應後的蛋白酶K可透過磁珠法去除或滅活, 過柱法或酚氯仿萃取. 95℃ 孵育可滅活蛋白酶 K 3 分鐘或 70°C 15 分分鐘 |
| 核酸殘留檢測 | 量子比特量化, ≤1ppm. 無人類來源 DNA 污染 (未即時偵測到 聚合酶鍊式反應) |
| 核酸酶檢測 | 未檢測到 DNA 酶 未檢測到 RNase |
| 推薦應用 | 組織和細胞DNA提取, 病毒核酸分離 |
優點
- 即用型常溫液體蛋白酶K
- 便於運送及常溫保存
- 高活性, 20 毫克/毫升, >600 毫安金/毫升
訂購資訊
| 內容 | C12103 | C12104 |
| 蛋白酶K溶液 (20毫克/毫升) | 10 毫升 | 1000 毫升 |
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