太陽能生物考馬斯 (布拉德福德) 蛋白質測定試劑盒 50T

貓號: PC0015

尺寸: 50時間

貯存: 開封後密封保存, 本套件自訂購日起九個月內有效.

描述

考馬斯G-250染料是一種用於總蛋白檢測和定量的比色試劑. 在酸性介質中，考馬斯染料與蛋白質結合，導致最大吸收立即從 465 nm 轉移到 595 nm，同時顏色從綠色變為藍色. 在一定濃度範圍內, A595測得的吸光度值與蛋白質濃度成正比.

協定

• 微孔板讀者
  1. 完全溶解 BSA 標準品, 稀釋10ul至250ul, 終濃度0.2mg/ml. 稀釋緩衝液取決於測量的蛋白質樣品. 為了簡單起見, 建議使用0.9%NaCl或PBS.
  2. 5×G250 充分混合，然後用 4ml ddH2O 稀釋 1ml 5×G250. 1×G250溶液4℃可保存1週.
  3. 標準根據 0, 2, 4, 6, 8, 12, 16, 和20ul分別加入96孔板中, 和 PBS 稀釋以補充.
  4. 稀釋樣品(準備一些漸變, 例如 2 次, 4 次, 8 倍稀釋), 並加入20ul樣品 96 出色地. 為了避免錯誤, 樣本點需要設定在標準線之後 1/2.
  5. 每孔加入200ul稀釋的1×G250, 室溫為 3-5 分分鐘.
  6. 吸光度的測定.
  7. 根據標準曲線計算樣品蛋白

• 紫外可見分光光度計分光光度計

1. 8*10毫升離心管(或更多) 並標記為1~8.
2. 用 2.4ml PBS 將 100ul BSA 稀釋至 2mg/ml.
3. 5×G250 使用前充分混合. 1ml 5×G250 用 4ml ddH2O 稀釋. 1×G250溶液4℃可保存1週.
4. 按下表添加試劑 (每孔5ml, 多餘的用於清潔比色皿)

5. 測定OD值後 3 反應分鐘數. 以確保實驗的準確性, 每隔一段時間測定OD值 2 分分鐘

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