Solarbio 澱粉含量測定試劑盒

澱粉含量測定試劑盒

筆記: 測試前取兩個或三個不同的樣本進行預測. 操作設備: 分光光度計/酶標儀.

目錄號: BC0705

尺寸: 100T/96S

成分:

試劑一: 110 毫升×1. 4℃保存.

試劑二: 110 毫升×1. 4℃保存.

試劑三: 粉末×2. 4℃保存.

標準: 粉末×1, 10 毫克葡萄糖 (無水的). 4℃保存.

標準溶液: 溶於 1 mL 蒸餾水至 10 使用標準溶液時mg/mL葡萄糖標準溶液. 它可以存儲為 2 4℃下幾週.

工作溶液: 添加 2.625 mL 蒸餾水至試劑 III, 慢慢加入 14.875 mL 濃 H2SO4, 使用前不斷攪拌並充分溶解. 它可以存儲為 1 4℃下一周.

產品描述:

澱粉是植物體內糖的主要儲存形式. 澱粉含量的測定對於評估食品的營養價值和研究植物糖代謝具有重要意義.

透過以下方法將可溶性糖與澱粉分離 80% 乙醇, 然後透過酸水解將澱粉分解成葡萄糖. 澱粉含量可以使用蒽酮比色法測量葡萄糖含量來計算.

需要但未提供的試劑和設備:

分光光度計/酶標儀, 水浴, 可調式移液器, 微型玻璃比色皿/96孔平底板, 研缽/均質器, 冰, 濃硫酸和蒸餾水.

程式:

我. 樣品製備:

1. 1. 拿 5 毫克樣品, 在研缽中研磨並添加 1 試劑 I 的毫升數. 均質化後, 轉移至離心管, 放入80℃水浴中浸泡 30 分分鐘, 然後在室溫下離心並 3000 ×g 為 5 分分鐘, 棄去上清液, 保留降水.
   2. 添加 0.5 mL 蒸餾水至沉澱. 放入沸水浴中浸泡 15 分分鐘 (旋緊蓋子以防止水分流失)
   3. 冷卻後, 添加 1 試劑 II 毫升, 放入沸水浴15分鐘, 搖晃3~5次
   4. 冷卻後, 室溫離心和 3000 ×g 為 15 分分鐘, 取上清液進行測試.

二. 決心 程式:

1. 預熱分光光度計/酵素標儀 30 分分鐘, 調整波長至 620 奈米, 用蒸餾水調零.
2. 將水浴調整至95°C.
3. 標準工作溶液: 稀釋 10 mg/mL標準溶液加蒸餾水至 0.4, 0.2, 0.1, 0.05, 0.04, 0.03, 0.02, 0.01 毫克/毫升.
4. 標準測試: 拿 50 µL 標準溶液或 50 µL 蒸餾水 (毛坯管) 和 250 µL 工作溶液至 EP 管. 置於95℃水浴中 10 分分鐘 (旋緊蓋子以防止水分流失), 自然冷卻至室溫, 拿 200 µL 至微型玻璃比色皿/96 孔平底板, 測定標準溶液的吸光度(作為) 和空白對照(AB) 在 620 奈米. 計算 ΔA=AS — AB. 空白管和標準曲線只需測試一到兩次.
5. 樣品測試: 拿 50 µL 樣品和 250 µL 工作液加入 EP 置於 95℃水浴中 10 分分鐘 (旋緊蓋子以防止水分流失), 自然冷卻至室溫, 拿 200 µL 至微型玻璃比色皿/96 孔平底板, 測定試管的吸光度(在) 在 620 奈米. 計算 ΔAˊ= AT — AB.

三、. 計算:

1. 建立標準曲線

取葡萄糖標準溶液 (0.4, 0.2, 0.1, 0.05, 0.04, 0.03, 0.02, 0.01 毫克/毫升) 作為 x 軸, ΔA 為 y 軸, 繪製標準曲線，得到線性迴歸方程式y=kx+b, 將 ΔAˊ 代入方程式得到 x(毫克/毫升).

2. 澱粉含量的計算 依樣品質量計算 澱粉含量 (毫克/克質量) = x×F×VE÷W÷1.11=1.351x÷W×F VE: 提取後體積, 1.5 毫升;

瓦: 樣品質量, G;

F: 稀釋比例;

1.11: 是將本方法測得的葡萄糖含量換算成澱粉含量的常數, 那是, 111

μg葡萄糖經蒽酮試劑顯色, 這相當於 100 µg 澱粉（蒽酮試劑）.

筆記:

1. 由於工作液具有強腐蝕性, 請使用
2. 如果吸光度值超出線性範圍, 測定前可增加或稀釋樣品量.

實驗範例:

1. 取玉米0.05g進行樣品處理, 取上清液, 然後按照確定步驟進行操作. 使用 96 孔板測量並計算ΔA′=AT-AB= 0.728-0.622 =0.195, 標準曲線 y = 3.1829x + 0.002, 計算 x =195. 澱粉含量 (毫克/克質量) = 1.351x×F÷W= 1.351×0.195 × 128÷0.05 = 674.4 毫克/克質量.

參考

• 克雷格·K·M. 蒽酮試劑在測定穀物中澱粉含量的應用[J]. 食品與農業科學雜誌, 1956, 7(1):40-44.
• 小維爾斯, 西爾弗曼L. 蒽酮法測定澱粉和纖維素 [J]. 分析化學, 1949, 21(8):950-953.

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